Desenvolvimento de métodos bioanalíticos para acetamida

• Autor(a) principal: Oliveira, Sara Barone de
• Data de Publicação: 2011
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10773/8076
• topic: Química; Acrilamida; Toxicidade; Biossensores

O presente trabalho teve como objectivo desenvolver um método bioanalítico baseado em sensores acústicos, para detectar e quantificar amidas tóxicas, entre as quais acetamida e acrilamida. Utilizou-se a enzima amidase (EC 3.5.1.4) de Pseudomonas aeruginosa L10, para converter a acetamida em compostos de menor toxicidade como o ião amónio e ácido acético. O ião amónio foi detectado por um sensor acústico com um revestimento químico apropriado. Testaram-se dois sistemas associando as duas componentes (química e biológica). No primeiro depositaram-se as duas componentes sobre um cristal. No segundo, inseriu-se num sistema de injecção em iluxo (FIA) o cristal revestido com o componente químico e a biológico foi imobilizado num biorreactor. Na concepção do biorreactor, testaram-se vários métodos de imobilização para o biocatalisador. Este foi confinado em contas de alginato de cálcio e imobilizado em esferas e capilares de vidro silanizados. A silanização foi feita pelo método de sol-gel e com solventes orgânicos com 3-aminopropiltrietoxissilano (APTS). A imobilização do biocatalisador foi feita com glutaraldeído (GA). Em todos estes casos, obtiveram-se respostas da conversão da acetamida pela amidase, tendo-se conseguido melhores resultados com a funcionalização das paredes do capilar com extracto celular.