Nanoconjugados para Gene Silencing

• Autor(a) principal: Pires, David Filipe Salgueiro
• Data de Publicação: 2021
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10362/125766
• topic: Cancro; Nanopartículas de Ouro; Nanomedicina; ASOs; KRAS; Domínio/Área Científica::Engenharia e Tecnologia::Outras Engenharias e Tecnologias

O cancro continua a ser um desafio médico complexo e uma das principais causas de morte no mundo. Mobiliza grandes quantidades de recursos anualmente, procurando entender os mecanismos que lhe são adjacentes, de forma encontrar um tratamento eficiente. A nanomedicina tem tido um papel ativo no desenvolvimento de ferramentas inovadoras para o diagnóstico e tratamento do cancro, por exemplo, na criação de estratégias de entrega de ácidos nucleicos mediados por nanopartículas de ouro (AuNPs). Estas estratégias tiram partido do tamanho, forma, propriedades de superfície, e facilidade de funcionalização com diferentes biomoléculas das mesmas, formando sistemas de entrega eficientes. Neste trabalho, procurámos utilizar o sistema ASOs de forma a tentar silenciar a expressão genética de KRAS, e perceber a capacidade de discriminação diferencial do sistema para com os seus alvos moleculares. KRAS é um proto-oncogene que quando mutado se encontra constitutivamente ativo, sendo responsável por desencadear cascatas de fosforilação que resultam na formação e desenvolvimento de células cancerígenas, escapando aos pontos de controlo do ciclo celular. Assim, foram construídos Au-nanoconjugados anti-KRAS, direcionados às sequências específicas de mRNA expressas nas linhagens HCT116 e HT29, duas linhas celulares imortalizadas de cancro colorretal. A ativação deste oncogene encontra-se mutada em 50% dos casos de cancro colorretal, o terceiro cancro mais incidente no mundo, em 2018, e o segundo mais mortal. Nesta tese, foram conseguidas reduções na expressão genética de KRAS de até 45%, podendo estas ser ainda aumentadas futuramente através de estudos de otimização (concentrações utilizadas, tempos de incubação) e de especificidade.