Desenvolvimento de novas moléculas para terapia de diferenciação na tumorigénese neural

• Autor(a) principal: Silva, Dário Miguel Valezim
• Data de Publicação: 2017
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10362/25307
• topic: células estaminais neurais; diferenciação; MDM2; p53; spiropirazolina oxindole; Domínio/Área Científica::Engenharia e Tecnologia::Engenharia Química

Em mais de 50% dos tumores humanos, o gene TP53 está mutado ou deletado enquanto que, em tumores com p53 wild type, a função da p53 é inativada pela sobre-expressão dos seus reguladores negativos, como por exemplo, a proteína murine double minute 2 (MDM2). Posto isto, inibir a interação p53-MDM2, de modo a reativar a p53, surgiu como uma nova estratégia no combate contra a progressão tumoral. Além dos papeis bem conhecidos da p53, esta mostrou ter um papel chave na diferenciação celular, inibindo o potencial cancerígeno das células estaminais promovendo o processo de diferenciação celular, incluindo a neurogénese. Várias famílias de spirooxindóis foram desenhadas para inibir a interação p53-MDM2. No entanto, o efeito desses compostos na regulação da diferenciação celular e consequente regulação do fenótipo maligno dos tumores nunca foi explorado e, por isso, nesta tese, foi sintetizada uma nova biblioteca de spiropirazolina oxindóis com o intuito de descobrir novos reativadores da p53 com potencial para induzir diferenciação celular. Inicialmente, foi realizado um screening dos compostos nas linhas celulares cancerígenas HCT116 p53(+/+) e HCT116 p53(-/-) de modo a avaliar a citoxicidade e seletividade dos compostos para a proteína p53. Posteriormente, foi avaliado o potencial diferenciador do composto mais seletivo em células estaminais neurais (NSCs). Neste trabalho, identificámos a spiropirazolina oxindole 11a como o composto mais seletivo para a linha celular HCT116 p53(+/+) apresentando um IC50 de 25 μM, sendo que estas características sugeriam um potencial deste composto na indução de diferenciação em NCSs. De fato, demonstrou-se que o composto induz diferenciação em NSCs através da redução dos níveis da proteína SOX2 e aumento dos níveis da proteína βIII-tubulina, marcadores de multipotência e diferenciação, respetivamente. Notavelmente, este composto demonstrou capacidade na redução do estado de indiferenciação em células cancerígenas de glioma (Gl-261), através daredução dos níveis proteicos de SOX2.