Avaliação in vivo de efeitos da suplementação alimentar de uma alga marinha, Porphyra umbilicalis em murganhos K14HPV16

• Autor(a) principal: Santos, Susana Manuela Coelho dos
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10348/9327
• topic: Porphyra umbilicalis; ensaio de genotoxicidade; papilomavírus; modelo animal; murino

O murganho transgénico K14HPV16 é um modelo animal de carcinoma escamoso da pele que pode ser utilizado para testar as propriedades biológicas de compostos naturais e sintéticos. A região early do vírus do papiloma humano tipo 16 (HPV16) foi inserida no genoma de murganhos FVB/n sob a regulação do promotor do gene da citoqueratina 14 (K14). Este modelo desenvolve espontaneamente lesões cutâneas, idênticas às causadas pelo HPV, que induz cancros na zona anogenital e da orofaringe. Porphyra umbilicalis pertence ao grupo das algas vermelhas marinhas e exibe propriedades antitumorais, anti-inflamatórias e antimutagénicas já comprovadas em Drosophila melanogaster (dados ainda não publicados). No entanto, ainda há pouca informação sobre o seu potencial em modelos animais mamíferos. Este ensaio experimental teve como objetivo avaliar o efeito desta alga incorporada na dieta de murganhos K14HPV16. Para tal, utilizaram-se 44 murganhos fêmeas, das quais 22 eram K14HPV16 e as outras 22 wildtype, com 20 semanas de idade. Os animais foram divididos em quatro grupos. O grupo I (HPV16-/- , n=11) e o grupo II (HPV16+/. , n=11), suplementados com Porphyra umbilicalis e, como controlo, o grupo III (HPV16-/- , n=11) e o grupo IV (HPV16+/- , n=11), alimentados com dieta base. Porphyra umbilicalis foi incorporada na dieta a 10% (m/m) e os animais ingeriram-na ad libitum, durante vinte e dois dias consecutivos. Durante o ensaio foi avaliado o bem-estar animal através de parâmetros como a massa corporal, postura e resposta a estímulos externos. No final da experiência todos os animais sobreviveram e nenhum apresentava sintomas de um mal-estar. Os animais foram sacrificados por overdose de xilazinaketamina e procedeu-se à sua necropsia completa para recolha de órgãos. O sangue foi recolhido por punção intracardíaca, registaram-se as massas absolutas de cada órgão e foram realizados dois ensaios de genotoxicidade em células sanguíneas: o ensaio do cometa e o teste dos micronúcleos (MN). Ambos os ensaios indicam que a Porphyra umbilicalis reduziu o dano genético associado ao HPV16. Os parâmetros bioquímicos e histológicos não revelaram possível toxicidade da alga na concentração utilizada. A análise histológica da pele indica que a Porphyra umbilicalis tem capacidade para reduzir a incidência de lesões pré-malignas induzidas pelo HPV16 neste modelo. Assim, os nossos resultados indicam que a suplementação da dieta dos murganhos com Porphyra umbilicalis não está associada à ocorrência de alterações na fisiologia normal dos animais, tendo a vantagem de reduzir os danos no DNA e a incidência de lesões pré-malignas