Clonagem e expressão da região P1 da protéina VP1 de sapovirus

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Chanes, Carolina Rodrigues
Data de Publicação: 2015
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UCB
Texto Completo: https://repositorio.ucb.br:9443/jspui/handle/10869/6026
Resumo: Biomedicina
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Este trabalho objetiva a clonagem e expressão da proteína P1 em sistema bacteriano com fins futuros de desenvolvimento de anticorpos para uso diagnóstico. Com o gene codificante da proteína P1, de 600pb, foi realizada uma clonagem em plasmídeo (pENTR-2b) depois uma subclonagem num vetor de expressão (pDEST17) usando o sistema Gateway, todas reações positivaram, e foram confirmadas pelo sequenciamento dos plasmídeos. Em seguida a indução da expressão com L-arabinose foi realizada e foram coletadas as alíquotas. Estas alíquotas foram corridas em gel de poliacrilamida revelando bandas de 20kDa, mais intensas com 4 horas de indução, nos pellets. Estes mesmos pellets foram submetidos ao teste de Western blot, com anticorpos anti-HisTag para ligação específica com a proteína de interesse; O resultado obtido foi favorável, mostrando reação apenas na banda de 20kDa, o tamanho esperado da proteína. O Sapovírus está aumentando de forma expressiva seu reconhecimento em surtos diarreicos no mundo todo, tornando necessária uma técnica confiável, simples e com custo efetivo razoável para uso diagnóstico na rotina laboratorial.Submitted by Ana Paula Amorim (ana.amorim@ucb.br) on 2016-04-13T23:00:56Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 20618 bytes, checksum: b67ac4fa37d756ac08366dbc4e32ada7 (MD5) CarolinaRodriguesChanes.pdf: 807455 bytes, checksum: fb5fcbb4215cc3e3430fcdce68053861 (MD5)Approved for entry into archive by Kelson Anthony de Menezes(kelson@ucb.br) on 2016-07-05T11:49:05Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 20618 bytes, checksum: b67ac4fa37d756ac08366dbc4e32ada7 (MD5) CarolinaRodriguesChanes.pdf: 807455 bytes, checksum: fb5fcbb4215cc3e3430fcdce68053861 (MD5)Made available in DSpace on 2016-07-05T11:49:05Z (GMT). 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