Cultura de tecidos de feijoeiro visando a introdução de genes exógenos

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Barros, Leila Maria Gomes
Data de Publicação: 1997
Outros Autores: Gama, Maria I. Conceição, Gonçalves, Christina Helena Rupp de Paiva, Barreto, Cristine Chaves, Santana, Eliana de Fátima, Carneiro, Vera Tavares de Campos
Tipo de documento: Artigo
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UCB
Texto Completo: http://twingo.ucb.br:8080/jspui/handle/10869/709
https://repositorio.ucb.br:9443/jspui/handle/123456789/7907
Resumo: O objetivo deste trabalho foi determinar parâmetros da cultura de tecidos de feijoeiro necessários para a aplicação da técnica de transformação via Agrobacterium. Diversos genótipos de feijoeiro (Phaseolus vulgaris L.) foram cultivados in vitro. Alguns parâmetros visando à infecção de ápices caulinares com Agrobacterium tumefaciens foram otimizados, como a eliminação da agrobactéria após a co-cultura e a concentração de kanamicina suficiente para a seleção dos ápices infectados. Multibrotaçôes em nós cotiledonares foram obtidas com freqüência de até 55,7%, dependendo do genótipo utilizado. Estes nós foram infectados com A. tumefaciens contendo em seu plasmídeo Ti o gene da P-glucuronidase (GUS) sob regulação de promotor eucariótico. Entre as multibrotaçôes obtidas, 30% apresentaram região onde foi detectada atividade do gene GUS. Demonstrou-se também a susceptibilidade de feijoeiro a Agrobacterium rhizogenes. Raízes transgênicas foram obtidas após infecção de epicótilos.
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Alguns parâmetros visando à infecção de ápices caulinares com Agrobacterium tumefaciens foram otimizados, como a eliminação da agrobactéria após a co-cultura e a concentração de kanamicina suficiente para a seleção dos ápices infectados. Multibrotaçôes em nós cotiledonares foram obtidas com freqüência de até 55,7%, dependendo do genótipo utilizado. Estes nós foram infectados com A. tumefaciens contendo em seu plasmídeo Ti o gene da P-glucuronidase (GUS) sob regulação de promotor eucariótico. Entre as multibrotaçôes obtidas, 30% apresentaram região onde foi detectada atividade do gene GUS. Demonstrou-se também a susceptibilidade de feijoeiro a Agrobacterium rhizogenes. Raízes transgênicas foram obtidas após infecção de epicótilos.The objective of this work was to determine different bean tissue culture parameters necessary to the application of Agrobacterium-mediated transformation technique. Several bean (Phaseolus vulgaris L.) genotypes were cultured in vitro. The protocols for Agrobacterium elimination, after infection of the apical meristems with Agrobacterium tumefaciens and the selective kanamycin concentration were determined. Depending on the genotype, multiple buds were obtained from cotiledonary nodes in a frequency up to 55.7%. The cotiledonary nodes were infected withA. tumefaciens carrying in the Ti plasmid the gene for P-glucuronidase (GUS) under the control of an eucariotic promoter. Regions with GUS activity were detected in 30% ofthe shoots. The susceptibility ofbean to Agrobacterium rhizogenes was also shown. Transgenic roots were obtained after infection of epicotyls with A. rhizogenes.Made available in DSpace on 2016-10-10T03:53:03Z (GMT). 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The objective of this work was to determine different bean tissue culture parameters necessary to the application of Agrobacterium-mediated transformation technique. Several bean (Phaseolus vulgaris L.) genotypes were cultured in vitro. The protocols for Agrobacterium elimination, after infection of the apical meristems with Agrobacterium tumefaciens and the selective kanamycin concentration were determined. Depending on the genotype, multiple buds were obtained from cotiledonary nodes in a frequency up to 55.7%. The cotiledonary nodes were infected withA. tumefaciens carrying in the Ti plasmid the gene for P-glucuronidase (GUS) under the control of an eucariotic promoter. Regions with GUS activity were detected in 30% ofthe shoots. The susceptibility ofbean to Agrobacterium rhizogenes was also shown. Transgenic roots were obtained after infection of epicotyls with A. rhizogenes.
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