Caracterização, desenvolvimento tecnológico de extratos padronizados e avaliação da toxicidade de Dysphania Ambrosioides (L.) Mosyakin & Clemants (Amaranthaceae)
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2018 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Biblioteca Digital Brasileira de Teses e Dissertações da UEG |
Texto Completo: | http://www.bdtd.ueg.br/handle/tede/1458 |
Resumo: | Dysphania ambrosioides (L.) Mosyakin & Clemants (sin: Chenopodium ambrosoides L.), Amaranthaceae, é empregada na medicina popular brasileira e é conhecida como erva-de-santa-maria e mastruz. Possui propriedades antiparasitárias, antibacterianas, anti-inflamatórias, antifúngicas e antitumorais. O presente trabalho visa a caracterização e o desenvolvimento tecnológico do extrato seco das partes aéreas de D. ambrosioides, padronizado em flavonoides expressos como rutina, bem como a avaliação da sua toxicidade. Os espécimes foram coletados nas regiões de Anápolis, Goiânia, Itapuranga e Pirenópolis, estado de Goiás, e as exsicatas foram depositadas no herbário da Universidade Estadual de Goiás com registros HUEG11387-11392, 11873. O material vegetal foi dessecado e caracterizado por métodos farmacopeicos. Parte do material foi macerado, percolado em etanol 70% (p/p), numa proporção droga/solvente de 10% (p/p). O extrato obtido foi concentrado, caracterizado e acrescido de dióxido de silício coloidal para secagem por aspersão (spray-drying). A droga vegetal também foi submetida à extração assistida por ultrassom (EAU), para a qual foram desenvolvidos e validados métodos analíticos de identificação e doseamento de rutina por cromatografia a líquido de alta eficiência (CLAE), e de flavonoides totais expressos como rutina, por método espectrofotométrico. Os processos de EAU e de obtenção do extrato seco padronizado em flavonoides, expressos como rutina, foram otimizados utilizando o modelo de planejamento fatorial Box Behnken (33) e a Metodologia de Superfície de Resposta (MSR). O extrato seco padronizado e caracterizado foi submetido a ensaios toxicológicos in vitro em Artemia salina nas concentrações de 62,5 a 1000 μg/mL e também in vivo, de toxicidade oral aguda em ratas Wistar, aprovado pela comissão de ética no uso de animais, nas dosagens de 300 e 2000 mg/kg. Os ensaios farmacopeicos demonstraram parâmetros relevantes na identificação vegetal da espécie e controle de qualidade da matéria-prima vegetal. Para o extrato bruto de partes aéreas de D. ambrosioides, o método analítico em cromatografia a líquido de alta eficiência para identificação e doseamento do marcador rutina foi validado parcialmente para os parâmetros seletividade e linearidade. Já o método analítico espectrofotométrico atendeu aos critérios de seletividade, linearidade, precisão, exatidão e robustez, sendo rápido, barato e de fácil execução no doseamento de flavonoides expressos como rutina. Na EAU as melhores condições para as variáveis analisadas foram: tempo de extração de 60 minutos, temperatura de 57ºC e teor etanólico de 57% (p/p). Para a obtenção do extrato seco padronizado as melhores condições, neste estudo, foram: concentração do adjuvante de secagem de 50% (p/p), temperatura de entrada de 148ºC, fluxo de alimentação 0,5 L/h. Para os ensaios toxicológicos, o extrato seco padronizado foi considerado átoxico no ensaio de Artemia salina e classificado como de baixa toxicidade no protocolo de toxicidade oral aguda em roedores, com DL50 entre 2000 a 5000 mg/Kg. Os resultados obtidos contribuem para o desenvolvimento de Resumo xviii matérias-primas de alta qualidade e baixa toxicidade a partir das partes aéreas de D. ambrosioides. No entanto, devem ser conduzidos ainda estudos de toxicidade crônica, subcrônica e materno-fetal. |
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Caracterização, desenvolvimento tecnológico de extratos padronizados e avaliação da toxicidade de Dysphania Ambrosioides (L.) Mosyakin & Clemants (Amaranthaceae)Chenopodium ambrosioidesFlavonoidesExtrato padronizadoMetodologia de superfície de respostaExtração assistida por ultrassomSpray dryingChenopodium ambrosioidesFlavonoidsStandardized extractResponse surface methodologyUltrasound-assisted extractionSpray dryingCIENCIAS DA SAUDEDysphania ambrosioides (L.) Mosyakin & Clemants (sin: Chenopodium ambrosoides L.), Amaranthaceae, é empregada na medicina popular brasileira e é conhecida como erva-de-santa-maria e mastruz. Possui propriedades antiparasitárias, antibacterianas, anti-inflamatórias, antifúngicas e antitumorais. O presente trabalho visa a caracterização e o desenvolvimento tecnológico do extrato seco das partes aéreas de D. ambrosioides, padronizado em flavonoides expressos como rutina, bem como a avaliação da sua toxicidade. Os espécimes foram coletados nas regiões de Anápolis, Goiânia, Itapuranga e Pirenópolis, estado de Goiás, e as exsicatas foram depositadas no herbário da Universidade Estadual de Goiás com registros HUEG11387-11392, 11873. O material vegetal foi dessecado e caracterizado por métodos farmacopeicos. Parte do material foi macerado, percolado em etanol 70% (p/p), numa proporção droga/solvente de 10% (p/p). O extrato obtido foi concentrado, caracterizado e acrescido de dióxido de silício coloidal para secagem por aspersão (spray-drying). A droga vegetal também foi submetida à extração assistida por ultrassom (EAU), para a qual foram desenvolvidos e validados métodos analíticos de identificação e doseamento de rutina por cromatografia a líquido de alta eficiência (CLAE), e de flavonoides totais expressos como rutina, por método espectrofotométrico. Os processos de EAU e de obtenção do extrato seco padronizado em flavonoides, expressos como rutina, foram otimizados utilizando o modelo de planejamento fatorial Box Behnken (33) e a Metodologia de Superfície de Resposta (MSR). O extrato seco padronizado e caracterizado foi submetido a ensaios toxicológicos in vitro em Artemia salina nas concentrações de 62,5 a 1000 μg/mL e também in vivo, de toxicidade oral aguda em ratas Wistar, aprovado pela comissão de ética no uso de animais, nas dosagens de 300 e 2000 mg/kg. Os ensaios farmacopeicos demonstraram parâmetros relevantes na identificação vegetal da espécie e controle de qualidade da matéria-prima vegetal. Para o extrato bruto de partes aéreas de D. ambrosioides, o método analítico em cromatografia a líquido de alta eficiência para identificação e doseamento do marcador rutina foi validado parcialmente para os parâmetros seletividade e linearidade. Já o método analítico espectrofotométrico atendeu aos critérios de seletividade, linearidade, precisão, exatidão e robustez, sendo rápido, barato e de fácil execução no doseamento de flavonoides expressos como rutina. Na EAU as melhores condições para as variáveis analisadas foram: tempo de extração de 60 minutos, temperatura de 57ºC e teor etanólico de 57% (p/p). Para a obtenção do extrato seco padronizado as melhores condições, neste estudo, foram: concentração do adjuvante de secagem de 50% (p/p), temperatura de entrada de 148ºC, fluxo de alimentação 0,5 L/h. Para os ensaios toxicológicos, o extrato seco padronizado foi considerado átoxico no ensaio de Artemia salina e classificado como de baixa toxicidade no protocolo de toxicidade oral aguda em roedores, com DL50 entre 2000 a 5000 mg/Kg. Os resultados obtidos contribuem para o desenvolvimento de Resumo xviii matérias-primas de alta qualidade e baixa toxicidade a partir das partes aéreas de D. ambrosioides. No entanto, devem ser conduzidos ainda estudos de toxicidade crônica, subcrônica e materno-fetal.Dysphania ambrosioides (L.) Mosyakin & Clemants (syn: Chenopodium ambrosoides L.), Amaranthaceae, is used in Brazilian folk medicine and is known as “erva-de-santa-maria” and “mastruz”. It has antiparasitic, antibacterial, anti-inflammatory, antifungal and antitumor properties. The present work aims at the characterization and technological development of the dry extract of D. ambrosioides aerial parts, standardized in flavonoids expressed as rutin, as well as the evaluation of its toxicity. The specimens were collected in the regions of Anápolis, Goiânia, Itapuranga and Pirenópolis, State of Goiás, identified and the vouchers were deposited at State University of Goiás herbarium, with number registers HUEG11387- 11392, 11873. The plant material was dried and characterized by pharmacopoeia methods. Part of the material was macerated, percolated in 70% (w/w) ethanol, in a drug/solvent ratio of 10% (w/w). The extract obtained was concentrated, characterized and added with colloidal silicon dioxide for spray-drying. The plant material was also submitted to ultrasound-assisted extraction (UAE), for which analytical methods for identification and quantification of rutin by high performance liquid chromatography (HPLC) and of total flavonoids, expressed as rutin, by spectrophotometric method were developed and validated. The processes of UAE and of dry extract standardization in flavonoids, as rutin equivalents, were optimized using a Box Behnken (33) design and the Response Surface Methodology (RSM). The standardized and characterized dry extract was subjected to in vitro and in vivo pre-clinical toxicological tests performed, respectively, in Artemia salina at concentrations of 62.5 to 1000 μg/mL, and in Wistar rats, approved by ethics commission, at dosages of 300 and 2000 mg/kg. The pharmacopoeia tests demonstrated relevant parameters in the vegetal identification of the species and quality control of the vegetal raw material. For the crude extract of aerial parts of D. ambrosioides, the high performance liquid chromatography analytical method for identification and assay of rutin was partially validated for the selectivity and linearity parameters. The spectrophotometric analytical method met the criteria of selectivity, linearity, precision, accuracy and robustness, being a fast, inexpensive and easy method to perform the dosage of flavonoids expressed as rutin. In the UAE the best conditions for the analyzed variables were: extraction time of 60 minutes, temperature of 57ºC and ethanol content of 57% (w/w). In order to obtain the standardized dry extract, the best conditions achieved in this study were: 50% (w/w) adjuvant concentration, inlet temperature of 148°C, feed flow of 0.5 L/h. For toxicological tests, the standardized dry extract was considered nontoxic in the test of Artemia salina and classified as low toxicity in the acute oral toxicity protocol in rodents, with LD50 between 2000 and 5000 mg/kg. The results obtained contribute to the development of high quality and low toxicity raw materials from D. ambrosioides aerial parts. However, chronic, sub chronic and maternal-fetal toxicity studies should be conducted.Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPqUniversidade Estadual de GoiásUEG ::Coordenação de Mestrado em Ciências Aplicadas a Produtos para SaúdeBrasilUEGPrograma de Pós-Graduação Stricto sensu em Ciências Aplicadas a Produtos para Saúde (PPG-CAPS)Paula, Joelma Abadia Marciano dehttp://lattes.cnpq.br/0118857572417556Amaral, Vanessa Cristiane de S.Ferreira, Thaís Moreira Silva2024-03-19T16:51:33Z2018-09-18info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfSILVA, T. M. Caracterização, desenvolvimento tecnológico de extratos padronizados e avaliação da toxicidade de Dysphania Ambrosioides (L.) Mosyakin & Clemants (Amaranthaceae). 2018. 129 f. Dissertação (Mestrado em Produtos para Saúde) - Câmpus Central - Sede: Anápolis - CET - Ciências Exatas e Tecnológicas Henrique Santillo, Universidade Estadual de Goiás, Anápolis, GO.http://www.bdtd.ueg.br/handle/tede/1458porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Biblioteca Digital Brasileira de Teses e Dissertações da UEGinstname:Universidade Estadual de Goiás (UEG)instacron:UEG2024-03-19T16:51:34Zoai:tede2:tede/1458Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttps://www.bdtd.ueg.br/PUBhttps://www.bdtd.ueg.br/oai/requestbibliotecaunucet@ueg.br||opendoar:2024-03-19T16:51:34Biblioteca Digital Brasileira de Teses e Dissertações da UEG - Universidade Estadual de Goiás (UEG)false |
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