Determinação de cotinina urinária por HPLC-UV para avaliação da exposição de pacientes asmáticos ao tabagismo
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Data de Publicação: | 2016 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UFBA |
Texto Completo: | https://repositorio.ufba.br/handle/ri/34933 |
Resumo: | Embora o hábito de fumar seja bem antigo, a preocupação a respeito dos malefícios trazidos pelo uso do cigarro é recente, sendo relatada na literatura pela primeira vez na década de 70. A fumaça do cigarro é uma mistura complexa, composta por material particulado e gás, na qual mais de 4000 substâncias já foram identificadas, sendo que, pelo menos, 50 destas apresenta algum potencial cancerígeno. A nicotina presente em maior concentração nesta fumaça é o alcaloide responsável pela dependência. O tabagismo afeta de maneira direta enfermidades do trato respiratório, principalmente indivíduos que apresentam quadro de asma, pois além de agravar os sintomas, traz efeito negativo sobre o tratamento. Nesse sentido, a avaliação do grau de exposição se faz necessário para estimar como este fator está influenciando a resposta do tratamento do asmático. Para tanto, é imprescindível o biomonitoramento do indivíduo à exposição a fumaça de cigarro, através da determinação do metabólito da nicotina mais estável e de maior concentração, a cotinina, eliminada pela urina. Este trabalho teve como objetivo determinar os níveis de exposição de pacientes do Núcleo Excelência de Asma (NEA) através da quantificação da cotinina na urina. Foram analisadas 1317 amostras de pacientes com diferentes graus de quadro asmático (grupo controle, asma leve e asma grave). Os níveis de cotinina foram determinados através da implantação e validação de um método já descrito na literatura que combina a utilização de um padrão interno (PI), 2-fenilimidazol, extração do PI e da cotinina presentes na urina com diclorometano e determinação por cromatografia liquida de alta eficiência (CLAE) com detecção UV (= 260 nm). A validação consistiu na avaliação de alguns parâmetros descritos pela resolução n° 899 de 29 de maio de 2003 da ANVISA: linearidade, seletividade, precisão (intermediária e repetitividade), exatidão, limites de detecção e quantificação. O método em questão apresentou uma boa linearidade na faixa de trabalho (0-1500 μg.L-1), mostrou-se seletivo ao analito em questão, além de apresentar percentagens de desvio padrão relativo (DRP) aceitáveis para os parâmetros precisão intermediária e repetitividade (8,4 e 6,4% respectivamente para um padrão de cotinina em urina de 100 μg.L-1). A exatidão foi avaliada através da percentagem de recuperação de um padrão de 500 μg.L-1 cotinina em urina, sendo encontrado um valor de 103,4%. Os limites de detecção e quantificação foram 6,46 e 19,59 μg.L-1, respectivamente. Em geral, os pacientes do NEA apresentaram baixos índices de exposição à fumaça do cigarro. Cerca de 86% destes apresentaram concentrações de cotinina urinária abaixo do limite de detecção. Na comparação entre as respostas obtidas pela aplicação de um questionário padrão e os níveis de cotinina que caracterizou o paciente como fumante ativo nos pacientes do grupo controle, asma leve e asma grave verificou-se um percentual de contradição de 1,42, 0,73 e 6,0% respectivamente. Este fato indica que uma parte dos pacientes com asma grave omitem a sua condição de fumante por medo de não ser aceito no programa. |
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2022-03-24T15:34:30Z2022-03-242022-03-24T15:34:30Z2016-12-13VASCONCELLOS, Diego da Silva. Determinação de cotinina urinária por HPLC-UV para avaliação da exposição de pacientes asmáticos ao tabagismo. 2016. 80 f. Dissertação (Mestrado em Química) - Instituto de Química, Universidade Federal da Bahia, Salvador, Bahia, 2016.https://repositorio.ufba.br/handle/ri/34933Embora o hábito de fumar seja bem antigo, a preocupação a respeito dos malefícios trazidos pelo uso do cigarro é recente, sendo relatada na literatura pela primeira vez na década de 70. A fumaça do cigarro é uma mistura complexa, composta por material particulado e gás, na qual mais de 4000 substâncias já foram identificadas, sendo que, pelo menos, 50 destas apresenta algum potencial cancerígeno. A nicotina presente em maior concentração nesta fumaça é o alcaloide responsável pela dependência. O tabagismo afeta de maneira direta enfermidades do trato respiratório, principalmente indivíduos que apresentam quadro de asma, pois além de agravar os sintomas, traz efeito negativo sobre o tratamento. Nesse sentido, a avaliação do grau de exposição se faz necessário para estimar como este fator está influenciando a resposta do tratamento do asmático. Para tanto, é imprescindível o biomonitoramento do indivíduo à exposição a fumaça de cigarro, através da determinação do metabólito da nicotina mais estável e de maior concentração, a cotinina, eliminada pela urina. Este trabalho teve como objetivo determinar os níveis de exposição de pacientes do Núcleo Excelência de Asma (NEA) através da quantificação da cotinina na urina. Foram analisadas 1317 amostras de pacientes com diferentes graus de quadro asmático (grupo controle, asma leve e asma grave). 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Este fato indica que uma parte dos pacientes com asma grave omitem a sua condição de fumante por medo de não ser aceito no programa.Although cigarette smoking is very old, concern about the harm caused by cigarette smoking is recent and has been reported in the literature for the first time in the 1970s. Cigarette smoke is a complex mixture of particulate matter and gas , In which more than 4000 substances have already been identified, and at least 50 of them have some carcinogenic potential. The nicotine present in the highest concentration in this smoke is the alkaloid responsible for the dependence. Smoking directly affects diseases of the respiratory tract, mainly individuals presenting with asthma, because besides aggravating the symptoms, it has a negative effect on the treatment. In this sense, the evaluation of the degree of exposure is necessary to estimate how this factor is influencing the treatment response of the asthmatic. Therefore, it is essential to biomonitor the individual to exposure to cigarette smoke, by determining the most stable nicotine metabolite and higher concentration, cotinine, eliminated by urine. The aim of this study was to determine the exposure levels of patients from the Nucleus Excellence of Asthma (NEA) by quantifying cotinine in urine. 1317 samples from patients with different degrees of asthmatic disease (control group, mild asthma and severe asthma) were analyzed. Cotinine levels were determined through the implantation and validation of a method already described in the literature that combines the use of an internal standard (IS), 2-phenylimidazole, extraction of IS and cotinine present in the urine with dichloromethane and determination by High pressure liquid chromatography (HPLC) with UV detection ( = 260 nm). The validation consisted of the evaluation of some parameters described by ANVISA resolution n ° 899 of May 29, 2003: linearity, selectivity, precision (intermediate and repeatability), accuracy, limits of detection and quantification. The method in question showed a good linearity in the working range (0-1500 μg.L-1), was selective to the analyte in question, besides presenting percentages of relative standard deviation (RSD) acceptable for the parameters intermediate precision and Repeatability (8.4 and 6.4%, respectively, for a cotinine urine standard of 100 μg.L-1). Accuracy was assessed by the percentage recovery of a standard of 500 μg.L-1 cotinine in urine, being found a value of 103.4%. The limits of detection and quantification were 6.46 and 19.59 μg.L-1, respectively. In general, NEA patients had low rates of exposure to cigarette smoke. About 86% of these had urinary cotinine concentrations below the limit of detection. In the comparison between the responses obtained by applying a standard questionnaire and the levels of cotinine that characterized the patient as an active smoker in the control, mild asthma and severe asthma patients, a contradiction percentage of 1.42, 0.73 and 6.0% respectively. This fact indicates that some patients with severe asthma omit their smoking status for fear of not being accepted into the program.Submitted by Luciana Silva (lucianassaraujo@ufba.br) on 2022-03-24T13:29:22Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO DIEGO VASCONCELLOS PDF.pdf: 3512231 bytes, checksum: 3819d2367b565673a138e75f3310100d (MD5)Approved for entry into archive by Solange Rocha (soluny@gmail.com) on 2022-03-24T15:34:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO DIEGO VASCONCELLOS PDF.pdf: 3512231 bytes, checksum: 3819d2367b565673a138e75f3310100d (MD5)Made available in DSpace on 2022-03-24T15:34:30Z (GMT). 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