Extração, purificação e atividade anticoagulante de polissacarídeos sulfatados da Alga Marinha Parda Lobophora variegata

• Autor(a) principal: Alencar, Daniel Barroso de
• Data de Publicação: 2007
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da Universidade Federal do Ceará (UFC)
• Texto Completo: http://www.repositorio.ufc.br/handle/riufc/38072
• topic: Alga marinha parda - Brasil, Nordeste; Alga marinha parda - Beneficiamento; Engenharia de Pesca

Os polissacarídeos sulfatados (PS) são macromoléculas complexas formadas por unidades repetitivas de açúcares e carregadas negativamente, e suas atividades biológicas tem despertado grande interesse na ciências médicas. O objetivo desse trabalho foi extrair, purificar e avaliar a atividade anticoagulante dos PS da alga marinha parda Lobophora variegata. Para a extração foram utilizados 2 g de alga seca que foram, inicialmente, hidratadas com tampão acetato de sódio 100 mM, pH 5,0 + EDTA 5 mM + cisteína 5 mM. Em seguida, adicionou-se ao material uma solução de papaína bruta (30 mg.mL-1) e a mistura foi incubada em banho-maria a 60°C por 24 horas. Após uma filtração e centrifugação, os PS foram precipitados com cloreto de cetilpiridínio (CPC) e, posteriormente, precipitados, mais uma vez, com álcool etílico absoluto. Os PS foram então dissolvidos em uma solução de NaCI 2 M:etanol (100:15;v:v), lavados duas vezes com etanol 80% e uma vez com etanol absoluto. Em seguida, o material foi levado à estufa a 60°C para secagem, obtendo os PS totais. Posteriormente, os PS foram fracionados em uma coluna de DEAE-celulose acoplada a um coletor de frações, sendo eluídas com diferentes concentrações de NaCI. A presença dos PS nas frações foi monitorada pela reação metacromática e pelo teste de Dubois. A atividade anticoagulante foi determinada através do teste do APTT, utilizando um coagulômetro e plasma humano citratado. A extração dos PS da alga marinha parda L. variegata apresentou um rendimento de 28,4%. Os resultados obtidos no fracionamento mostraram que as frações mais metacromáticas foram eluídas com 0,5 e 0,7 M de NaCI e o teste de Dubois detectou uma maior presença de açúcar nas frações obtidas da 32 extração. Com relação à atividade anticoagulante, de uma maneira geral, os PS de L. variegata apresentaram uma baixa atividade, com exceção da fração eluída com 1,2 M de NaCI, obtida no fracionamento dos PS obtidos da 12 extração.