Utilização da linhagem invasiva Lactococcus lactis FnBPA como veículo para a entrega, via mucosas, do plasmídeo vacinal pValac, codificando o antígeno ESAT-6 de Mycobacterium tuberculosis à camundongos BALB/c e avaliação do perfil imunológico gerado por essa nova formulação vacinal

• Autor(a) principal: Vanessa Bastos Pereira
• Data de Publicação: 2014
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUOS-9N6JV2
• topic: Genética; Lactococcus lactis; Sistema de entrega de DNA; Tuberculose; Genética; Proteína recombinante; Vacinas de DNA

O uso de bactérias não patogênicas, como as bactérias lácticas (BL), constitui uma alternativa atrativa e segura para a entrega de vacinas de DNA pela via oral. Lactococcus lactis, uma BL modelo, é considerada GRAS (Generally Recognized As Safe) e, portanto, tem sido amplamente utilizada para a produção e entrega de antígenos e citocinas ao nível de mucosas. Desta forma, L. lactis surge como uma alternativa atrativa para a veiculação de vacinas de DNA. Assim, acredita-se que o uso da linhagem invasiva de L. lactis, expressando o gene FnBPA (Fibronectin binding protein A) de Staphyloccocus aureus, contendo o vector pValac, para a expressão eucariótica do antigénio ESAT-6 (6-kDa early secreted antigenic target) de Mycobacterium tuberculosis, pode representar uma nova estratégia para o controle da tuberculose; uma doença infecciosa que afeta, na sua forma latente, 1/3 da população mundial. Neste contexto, este trabalho teve como objetivo a utilização de L. lactis FnBPA(pValac:ESAT-6) para a imunização de camundongos e avaliação da resposta imunológica gerada por esta nova estratégia vacinal. Para isto, a linhagem L. lactis FnBPA(pValac:ESAT-6) foi utilizada para a realização de experimentos de imunização oral em camundongos BALB/c, a fim de caracterizar o perfil da resposta imune gerada. Após a imunização, os níveis de citocinas e imunoglobulinas foram medidos por Ensaio Imunoenzimático (ELISA), onde foi verificado uma elevada produção de IFN- pelos esplenócitos murinos imunizados com a linhagem L. lactis FnBPA(pValac:ESAT-6), demonstrando uma resposta imune do tipo Th1, necessária na imunização contra a infecção por M. tuberculosis. Além disto, foi possível detectar a presença de sIgA anti- ESAT-6 no extrato das fezes e cólon dos animais, evidenciando uma resposta imune de mucosas após imunização com a linhagem L. lactis FnBPA(pValac:ESAT-6). Sendo assim, este trabalho constitui o primeiro passo rumo à validação desta nova vacina de DNA baseada em BL geneticamente modificadas.