Avaliação da espermatogênese, níveis plasmáticos de esteroides sexuais e expressão de HSP70, PCNA e caspase-3 em Prochilodus argenteus: um estudo comparativo em dois pontos do rio São Francisco, a jusante da barragem de Três Marias

• Autor(a) principal: Fabricio Flavio Theophilo Domingos
• Data de Publicação: 2012
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUOS-965GBW
• topic: Prochilodus argenteus; Esteróides sexuais; HSP70; PCNA; Rio São Francisco; Espermatogênese; Apoptose; Prochilodus argenteus; Esteroides; Antígeno nuclear de célula em proliferação; Apoptose; Espermatogenese; Biologia

O desenvolvimento e a maturação testicular de peixes são regulados por hormônios sexuais que influenciam nos processos de proliferação e morte celular das células germinativas e somáticas. O estresse causado pelas alterações das condições ambientais induz a expressão de proteínas de choque térmico (HSPs) que tem um papel fundamental na homeostase testicular. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a maturação testicular, a espermatogênese, os níveis plasmáticos de esteroides sexuais assim como os níveis de HSP70, proliferação celular (PCNA) e apoptose (TUNEL e caspase-3) em testículos de curimatã-pacu Prochilodus argenteus. Para isso, o estudo foi realizado em três etapas. Inicialmente avaliamos e comparamos a espermatogênese e os níveis de esteroides sexuais em curimatã-pacu coletados em dois pontos do rio São Francisco, a jusante da barragem de Três Marias. No período reprodutivo, a proporção volumétrica e o número de cistos de espermatogônias foram significativamente maiores em peixes do ponto 1, imediatamente a jusante da barragem, onde a proliferação celular e apoptose foram mais elevadas na fase espermatogonial. Em peixes do ponto 2, tanto os parâmetros morfométricos e as reações de PCNA e TUNEL foram mais elevados em cistos de espermatócitos. Esses resultados associados às mudanças sazonais da atividade testicular, níveis de testosterona, 17 -estradiol, 17-hidroxiprogesterona e o índice gonadassomático indicam que a espermatogênese de P. argenteus é mais ativa em peixes capturados no ponto 2, após a confluência com o rio Abaeté. Na segunda etapa estudamos a expressão de HSP70, PCNA e caspase-3 durante o ciclo reprodutivo de P. argenteus coletados após a confluência com rio Abaeté, onde as condições ambientais são favoráveis para reprodução da espécie. Os níveis de HSP70 aumentaram significativamente em testículos de junho a dezembro (repouso a maturação testicular) diminuindo em março (regressão testicular). As marcações do PCNA acompanharam as variações sazonais da atividade testicular, sendo predominante em espermatogônias tipo A em junho e em espermatogônias tipo B em junho, setembro e março, enquanto espermatócitos primários foram marcados principalmente em dezembro. A reação TUNEL-positiva foi detectada no núcleo das células germinativas em todas as fases de desenvolvimento, exceto em espermatozóides. A atividade enzimática da caspase-3 diminuiu de junho a dezembro, aumentando em março. Esses resultados sugerem que HSP70 pode proteger as células germinativas da apoptose dependente de caspase-3 durante a atividade testicular. Na terceira etapa estudamos os níveis de HSP70 e caspase-3 como biomarcador de impacto ambiental utilizando testículos e fígado de P. argenteus. Os níveis de HSP70 e caspase-3 em testículos e fígado foram significativamente maiores nos peixes coletados no ponto 1 durante a estação chuvosa em relação à estação seca. Desta forma, nossos resultados demonstram que as análises morfométricas, os níveis de esteroides sexuais e a níveis proteicos de HSP70, PCNA e caspase-3 podem fornecer ferramentas úteis para a avaliação da espermatogênese de populações de peixes em ambientes naturais.