Caracterização biológica e molecular de tripomastigotas de Trypanosoma cruzi provenientes de células deficientes na proteína lisossomal LAMP
Autor(a) principal: | |
---|---|
Data de Publicação: | 2021 |
Tipo de documento: | Tese |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UFMG |
Texto Completo: | http://hdl.handle.net/1843/51245 |
Resumo: | O Trypanosoma cruzi invade células fagocíticas não profissionais através da subversão do processo de reparo de membrana da célula hospedeira, o qual é dependente de lesões à membrana plasmática e sinalização celular, aumento intracelular de cálcio e recrutamento de lisossomos. Células deficientes em LAMP (Lysosome Associated Membrane Proteins – LAMP) 1 e 2, são menos permissivas à invasão pelo T. cruzi, porém mais propensas à multiplicação intracelular deste parasito. O que determina essa maior multiplicação não é conhecido. No entanto, sabe-se que várias passagens por ambientes intracelulares diferentes pode, significativamente, mudar o perfil de expressão de genes do T. cruzi. Neste trabalho, nós avaliamos se uma única passagem por fibroblastos selvagens (WT) ou deficientes em LAMP (KO) poderia influenciar a capacidade de invasão de tripomastigotas da cepa Y de T. cruzi em mioblastos L6 e fibroblastos WT. Parasitos liberados de células LAMP-2 KO (TcY-L2-/-) apresentaram maiores taxas de invasão, sinalização de cálcio e injúria à membrana celular, em mioblastos L6, quando comparados àqueles liberados de fibroblastos WT (TcY-WT) ou LAMP-1/2 KO (TcY-L1/2-/-). Por outro lado, TcY-L1/2-/- apresentou maiores taxas de invasão, sinalização de cálcio e injúria à membrana celular, em fibroblastos WT, quando comparados aos outros parasitos. TcY-WT, por outro lado, embora tenha apresentado taxas de invasão e de sinalização de cálcio intermediárias em fibroblastos WT, induziram menores níveis de injúria, reforçando que a sinalização mediada por proteínas tem também contribuição importante para a indução de sinais de cálcio pelo parasito. Estes resultados claramente demonstram que parasitos liberados de fibroblastos WT ou LAMP KO são distintos uns dos outros. Adicionalmente, a capacidade de invasão destes parasitos também pode variar dependendo de quais tipos celulares eles interagem. Como estas alterações provavelmente refletem diferenças entre as moléculas de superfície do parasito, nós também avaliamos seus subproteomas. Alguns complexos proteicos, proteínas de membrana e proteínas secretadas foram encontrados regulados, como alguns membros das famílias MASP, mucinas, trans-sialidases e GP63, os quais desempenham um importante papel durante a infecção pelo parasito. |
id |
UFMG_34f8acda476cf0cf760d9ea3aa50617b |
---|---|
oai_identifier_str |
oai:repositorio.ufmg.br:1843/51245 |
network_acronym_str |
UFMG |
network_name_str |
Repositório Institucional da UFMG |
repository_id_str |
|
spelling |
Luciana de Oliveira Andradehttp://lattes.cnpq.br/4050897100676302Hélida Monteiro de AndradeWalderez Ornelas DutraDaniella Castanheira BatholomeuCarlos Andre Ornelas RicartIgor de Almeidahttp://lattes.cnpq.br/0163522670689098Anny Carolline Silva Oliveira2023-03-27T16:18:01Z2023-03-27T16:18:01Z2021-10-28http://hdl.handle.net/1843/51245O Trypanosoma cruzi invade células fagocíticas não profissionais através da subversão do processo de reparo de membrana da célula hospedeira, o qual é dependente de lesões à membrana plasmática e sinalização celular, aumento intracelular de cálcio e recrutamento de lisossomos. Células deficientes em LAMP (Lysosome Associated Membrane Proteins – LAMP) 1 e 2, são menos permissivas à invasão pelo T. cruzi, porém mais propensas à multiplicação intracelular deste parasito. O que determina essa maior multiplicação não é conhecido. No entanto, sabe-se que várias passagens por ambientes intracelulares diferentes pode, significativamente, mudar o perfil de expressão de genes do T. cruzi. Neste trabalho, nós avaliamos se uma única passagem por fibroblastos selvagens (WT) ou deficientes em LAMP (KO) poderia influenciar a capacidade de invasão de tripomastigotas da cepa Y de T. cruzi em mioblastos L6 e fibroblastos WT. Parasitos liberados de células LAMP-2 KO (TcY-L2-/-) apresentaram maiores taxas de invasão, sinalização de cálcio e injúria à membrana celular, em mioblastos L6, quando comparados àqueles liberados de fibroblastos WT (TcY-WT) ou LAMP-1/2 KO (TcY-L1/2-/-). Por outro lado, TcY-L1/2-/- apresentou maiores taxas de invasão, sinalização de cálcio e injúria à membrana celular, em fibroblastos WT, quando comparados aos outros parasitos. TcY-WT, por outro lado, embora tenha apresentado taxas de invasão e de sinalização de cálcio intermediárias em fibroblastos WT, induziram menores níveis de injúria, reforçando que a sinalização mediada por proteínas tem também contribuição importante para a indução de sinais de cálcio pelo parasito. Estes resultados claramente demonstram que parasitos liberados de fibroblastos WT ou LAMP KO são distintos uns dos outros. Adicionalmente, a capacidade de invasão destes parasitos também pode variar dependendo de quais tipos celulares eles interagem. Como estas alterações provavelmente refletem diferenças entre as moléculas de superfície do parasito, nós também avaliamos seus subproteomas. Alguns complexos proteicos, proteínas de membrana e proteínas secretadas foram encontrados regulados, como alguns membros das famílias MASP, mucinas, trans-sialidases e GP63, os quais desempenham um importante papel durante a infecção pelo parasito.Trypanosoma cruzi invades non-professional phagocytic cells by subverting their membrane repair process, which is dependent on membrane injury and cell signaling, intracellular calcium increase and lysosome recruitment. Cells lacking Lysosome Associated Membrane Proteins 1 and 2 (LAMP-1 and LAMP-2) are less permissive to parasite invasion, however more prone to parasite intracellular multiplication. Several passages through a different intracellular environment can significantly change T. cruzi’s gene expression profile. Here, we evaluated whether one single passage through LAMP deficient (KO) or wild type (WT) fibroblasts could influence invasion ability of T. cruzi Y strain trypomastigotes in L6 myoblasts and WT fibroblasts. Parasites released from LAMP-2 KO cells (TcY-L2-/-) showed higher invasion, calcium signaling and membrane injury rates when compared to those released from WT (TcY-WT) or LAMP-1/2 KO cells (TcY-L1/2-/-) in L6 myoblasts. On the other hand, TcY-L1/2-/- showed higher invasion, calcium signaling and cell membrane injury rates compared to the others in WT fibroblasts. TcY-WT, on the other hand, although presented an intermediary invasion and calcium signaling rates in WT cells, induced lower levels of injury, reinforcing that protein signaling also have a significant contribution to parasite induced calcium signals. These results clearly show that parasites released from WT or LAMP KO cells are distinct from each other. Additionally, these parasites ability to invade the cell may be distinct depending with which cell type they interact with. Since these alterations most likely would reflect differences among parasite surface molecules, we also evaluated their subproteome. Few protein complexes, membrane and secreted proteins were found regulated, such as some members of MASP, mucins, trans-sialidases and gp63 proteins family, which may play an important role during parasite infection.CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível SuperiorporUniversidade Federal de Minas GeraisPrograma de Pós-Graduação em Biologia CelularUFMGBrasilICB - DEPARTAMENTO DE MORFOLOGIAPrograma Institucional de Internacionalização – CAPES - PrIntBiologia celularDoença de ChagasTryoanosoma cruziEspaço intracelularGlicoproteínas de membrana associadas ao lisossomoTrypanosoma cruziDoença de ChagasProteínas LAMPInvasãoAmbiente intracelularAnálise proteômicaTMT (tandem mass tags)Caracterização biológica e molecular de tripomastigotas de Trypanosoma cruzi provenientes de células deficientes na proteína lisossomal LAMPinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFMGinstname:Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)instacron:UFMGORIGINALCaracterização biológica e molecular de tripomastigotas de Trypanosoma cruzi provenientes de células deficientes na proteína lisossomal LAMP.pdfCaracterização biológica e molecular de tripomastigotas de Trypanosoma cruzi provenientes de células deficientes na proteína lisossomal LAMP.pdfapplication/pdf5926996https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/51245/1/Caracteriza%c3%a7%c3%a3o%20biol%c3%b3gica%20e%20molecular%20de%20tripomastigotas%20de%20Trypanosoma%20cruzi%20provenientes%20de%20c%c3%a9lulas%20deficientes%20na%20prote%c3%adna%20lisossomal%20LAMP.pdfd3c2891855b2287cc587f0ba4f1c1f5fMD51LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-82118https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/51245/2/license.txtcda590c95a0b51b4d15f60c9642ca272MD521843/512452023-03-27 13:18:01.769oai:repositorio.ufmg.br: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ório de PublicaçõesPUBhttps://repositorio.ufmg.br/oaiopendoar:2023-03-27T16:18:01Repositório Institucional da UFMG - Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)false |
dc.title.pt_BR.fl_str_mv |
Caracterização biológica e molecular de tripomastigotas de Trypanosoma cruzi provenientes de células deficientes na proteína lisossomal LAMP |
title |
Caracterização biológica e molecular de tripomastigotas de Trypanosoma cruzi provenientes de células deficientes na proteína lisossomal LAMP |
spellingShingle |
Caracterização biológica e molecular de tripomastigotas de Trypanosoma cruzi provenientes de células deficientes na proteína lisossomal LAMP Anny Carolline Silva Oliveira Trypanosoma cruzi Doença de Chagas Proteínas LAMP Invasão Ambiente intracelular Análise proteômica TMT (tandem mass tags) Biologia celular Doença de Chagas Tryoanosoma cruzi Espaço intracelular Glicoproteínas de membrana associadas ao lisossomo |
title_short |
Caracterização biológica e molecular de tripomastigotas de Trypanosoma cruzi provenientes de células deficientes na proteína lisossomal LAMP |
title_full |
Caracterização biológica e molecular de tripomastigotas de Trypanosoma cruzi provenientes de células deficientes na proteína lisossomal LAMP |
title_fullStr |
Caracterização biológica e molecular de tripomastigotas de Trypanosoma cruzi provenientes de células deficientes na proteína lisossomal LAMP |
title_full_unstemmed |
Caracterização biológica e molecular de tripomastigotas de Trypanosoma cruzi provenientes de células deficientes na proteína lisossomal LAMP |
title_sort |
Caracterização biológica e molecular de tripomastigotas de Trypanosoma cruzi provenientes de células deficientes na proteína lisossomal LAMP |
author |
Anny Carolline Silva Oliveira |
author_facet |
Anny Carolline Silva Oliveira |
author_role |
author |
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv |
Luciana de Oliveira Andrade |
dc.contributor.advisor1Lattes.fl_str_mv |
http://lattes.cnpq.br/4050897100676302 |
dc.contributor.advisor-co1.fl_str_mv |
Hélida Monteiro de Andrade |
dc.contributor.referee1.fl_str_mv |
Walderez Ornelas Dutra |
dc.contributor.referee2.fl_str_mv |
Daniella Castanheira Batholomeu |
dc.contributor.referee3.fl_str_mv |
Carlos Andre Ornelas Ricart |
dc.contributor.referee4.fl_str_mv |
Igor de Almeida |
dc.contributor.authorLattes.fl_str_mv |
http://lattes.cnpq.br/0163522670689098 |
dc.contributor.author.fl_str_mv |
Anny Carolline Silva Oliveira |
contributor_str_mv |
Luciana de Oliveira Andrade Hélida Monteiro de Andrade Walderez Ornelas Dutra Daniella Castanheira Batholomeu Carlos Andre Ornelas Ricart Igor de Almeida |
dc.subject.por.fl_str_mv |
Trypanosoma cruzi Doença de Chagas Proteínas LAMP Invasão Ambiente intracelular Análise proteômica TMT (tandem mass tags) |
topic |
Trypanosoma cruzi Doença de Chagas Proteínas LAMP Invasão Ambiente intracelular Análise proteômica TMT (tandem mass tags) Biologia celular Doença de Chagas Tryoanosoma cruzi Espaço intracelular Glicoproteínas de membrana associadas ao lisossomo |
dc.subject.other.pt_BR.fl_str_mv |
Biologia celular Doença de Chagas Tryoanosoma cruzi Espaço intracelular Glicoproteínas de membrana associadas ao lisossomo |
description |
O Trypanosoma cruzi invade células fagocíticas não profissionais através da subversão do processo de reparo de membrana da célula hospedeira, o qual é dependente de lesões à membrana plasmática e sinalização celular, aumento intracelular de cálcio e recrutamento de lisossomos. Células deficientes em LAMP (Lysosome Associated Membrane Proteins – LAMP) 1 e 2, são menos permissivas à invasão pelo T. cruzi, porém mais propensas à multiplicação intracelular deste parasito. O que determina essa maior multiplicação não é conhecido. No entanto, sabe-se que várias passagens por ambientes intracelulares diferentes pode, significativamente, mudar o perfil de expressão de genes do T. cruzi. Neste trabalho, nós avaliamos se uma única passagem por fibroblastos selvagens (WT) ou deficientes em LAMP (KO) poderia influenciar a capacidade de invasão de tripomastigotas da cepa Y de T. cruzi em mioblastos L6 e fibroblastos WT. Parasitos liberados de células LAMP-2 KO (TcY-L2-/-) apresentaram maiores taxas de invasão, sinalização de cálcio e injúria à membrana celular, em mioblastos L6, quando comparados àqueles liberados de fibroblastos WT (TcY-WT) ou LAMP-1/2 KO (TcY-L1/2-/-). Por outro lado, TcY-L1/2-/- apresentou maiores taxas de invasão, sinalização de cálcio e injúria à membrana celular, em fibroblastos WT, quando comparados aos outros parasitos. TcY-WT, por outro lado, embora tenha apresentado taxas de invasão e de sinalização de cálcio intermediárias em fibroblastos WT, induziram menores níveis de injúria, reforçando que a sinalização mediada por proteínas tem também contribuição importante para a indução de sinais de cálcio pelo parasito. Estes resultados claramente demonstram que parasitos liberados de fibroblastos WT ou LAMP KO são distintos uns dos outros. Adicionalmente, a capacidade de invasão destes parasitos também pode variar dependendo de quais tipos celulares eles interagem. Como estas alterações provavelmente refletem diferenças entre as moléculas de superfície do parasito, nós também avaliamos seus subproteomas. Alguns complexos proteicos, proteínas de membrana e proteínas secretadas foram encontrados regulados, como alguns membros das famílias MASP, mucinas, trans-sialidases e GP63, os quais desempenham um importante papel durante a infecção pelo parasito. |
publishDate |
2021 |
dc.date.issued.fl_str_mv |
2021-10-28 |
dc.date.accessioned.fl_str_mv |
2023-03-27T16:18:01Z |
dc.date.available.fl_str_mv |
2023-03-27T16:18:01Z |
dc.type.status.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
dc.type.driver.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
format |
doctoralThesis |
status_str |
publishedVersion |
dc.identifier.uri.fl_str_mv |
http://hdl.handle.net/1843/51245 |
url |
http://hdl.handle.net/1843/51245 |
dc.language.iso.fl_str_mv |
por |
language |
por |
dc.relation.pt_BR.fl_str_mv |
Programa Institucional de Internacionalização – CAPES - PrInt |
dc.rights.driver.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/openAccess |
eu_rights_str_mv |
openAccess |
dc.publisher.none.fl_str_mv |
Universidade Federal de Minas Gerais |
dc.publisher.program.fl_str_mv |
Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular |
dc.publisher.initials.fl_str_mv |
UFMG |
dc.publisher.country.fl_str_mv |
Brasil |
dc.publisher.department.fl_str_mv |
ICB - DEPARTAMENTO DE MORFOLOGIA |
publisher.none.fl_str_mv |
Universidade Federal de Minas Gerais |
dc.source.none.fl_str_mv |
reponame:Repositório Institucional da UFMG instname:Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG) instacron:UFMG |
instname_str |
Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG) |
instacron_str |
UFMG |
institution |
UFMG |
reponame_str |
Repositório Institucional da UFMG |
collection |
Repositório Institucional da UFMG |
bitstream.url.fl_str_mv |
https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/51245/1/Caracteriza%c3%a7%c3%a3o%20biol%c3%b3gica%20e%20molecular%20de%20tripomastigotas%20de%20Trypanosoma%20cruzi%20provenientes%20de%20c%c3%a9lulas%20deficientes%20na%20prote%c3%adna%20lisossomal%20LAMP.pdf https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/51245/2/license.txt |
bitstream.checksum.fl_str_mv |
d3c2891855b2287cc587f0ba4f1c1f5f cda590c95a0b51b4d15f60c9642ca272 |
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv |
MD5 MD5 |
repository.name.fl_str_mv |
Repositório Institucional da UFMG - Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG) |
repository.mail.fl_str_mv |
|
_version_ |
1803589208892243968 |