Protocolo de vacinação utilizando vírus recombinantes expressando as proteínas SAG1, SAG2 e SAG3 de Toxoplasma gondii

• Autor(a) principal: Erica Araujo Mendes
• Data de Publicação: 2011
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUOS-8N6J55
• topic: Imunologia; Resposta imune; Virus recombinantes; Bioquímica; Toxoplasma gondii; Adenovirus; Vacinas

No presente estudo, avaliamos a capacidade de adenovírus recombinantes (rAd) codificando os antígenos SAG1, SAG2 e SAG3 de Toxoplasma gondii (AdSAG1, AdSAG2 e AdSAG3, respectivamente) em induzir resposta imune e proteção contra o parasita. Camundongos C57BL/6 receberam duas doses de AdSAG1, AdSAG2, AdSAG3 ou de um adenovírus controle (AdCTRL). A produção de anticorpos específicos anti-SAG, bem como a ativação de linfócitos T capazes de reconhecer esses antígenos foram avaliadas após a vacinação. Cada rAd induziu a produção de IgG específica contra a SAG que codifica. Por outro lado, apenas o AdSAG1 levou a ativação significativa de linfócitos T produtores de IFN-, os quais responderam in vitro a um extrato de antígenos de T. gondii e a um epítopo de células T CD8+ (TPTENFTL) identificado na seqüência da proteína SAG1. Os animais vacinados foram desafiados com uma cepa cistogênica de T. gondii, para avaliação da mortalidade e da carga parasitária cerebral. Apenas grupos imunizados com AdSAG1 apresentaram sobrevivência e redução no número de cistos cerebrais em níveis significativos. Em experimentos de vacinação de animais deficientes em células T CD8+ com AdSAG1 ficou demonstrado que a ativação de células T CD8+ produtoras de IFN- específicas contra SAG1 é um dos mecanismos de proteção induzidos por aquele rAd. Da mesma forma, por meio da vacinação de animais deficientes em MyD88 e IL-12, identificamos mecanismos de resposta imune inata ativados por AdSAG1 in vivo, os quais estão envolvidos na diferenciação de linfócitos T anti-SAG1 em células produtoras de IFN- e contribuem para a imunogenicidade e capacidade protetora do AdSAG1. Para melhorar o nível de proteção obtido com o protocolo de imunização homólogo (duas doses de rAd), foram construídos vírus vaccinia Ankara modificados recombinantes (rMVA) codificando os antígenos SAG1 ou SAG2 para serem utilizados como dose de reforço após primo-imunização com rAd, num protocolo heterólogo de imunização. Novamente, foi observada proteção apenas na imunização com vetores virais codificando SAG1, sendo que houve tendência no aumento da sobrevivência dos animais vacinados de acordo com o protocolo heterólogo (AdSAG1 + MVASAG1) em comparação com aqueles que receberam a imunização homóloga (duas doses de AdSAG1). Quanto à carga de parasitas, foi observada diferença significativa entre os protocolos de imunização, com o heterólogo proporcionando maior redução no número de cistos cerebrais. Esses resultados indicam que a utilização de vetores virais recombinantes é uma abordagem viável para o desenvolvimento de protocolos de imunização contra o parasita T. gondii