Implicação das sortases de Lactobacillus casei na inibição da internalização de Staphylococcus aureus em células epiteliais mamárias bovinas

• Autor(a) principal: Renata de Faria Silva
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUOS-APMP2D
• topic: Sortases; Mastite; Probiótico mamário; Staphylococcus aureus; Genética

Staphylococcus aureus é um dos principais agentes causadores da mastite, uma inflamação na glândula mamária. O tratamento da doença baseia-se principalmente em antibióticos. No entanto, os mesmos não são completamente eficazes e seu uso massivo contribui para o risco do surgimento e propagação de linhagens resistentes. Devido a esse risco há uma forte demanda social por uma agricultura mais sustentável, a fim de minimizar o seu impacto sobre o ambiente. Esse fato tem estimulado o desenvolvimento de estratégias alternativas para o tratamento ou prevenção da mastite. Neste contexto, a utilização de bactérias lácticas (BL) como probióticos mamários poderia ser eficaz. As BL são boas candidatas em razão dos efeitos benéficos já descritos em vários contextos. Algumas BL são capazes de interferir com o ciclo infeccioso de agentes patogênicos através de vários mecanismos, entre os quais: inibição direta do crescimento de agentes patogênicos, competição pela colonização de tecidos ou através da modulação da resposta imune inata. Em um estudo anterior, nosso grupo mostrou que a linhagem Lactobacillus casei BL23 foi capaz de reduzir a internalização de S. aureus em células epiteliais mamárias bovinas (CEMb). No entanto, o mecanismo desse antagonismo ainda premanece desconhecido. As propriedades de superfície de BL23 provavelmente estão implicadas e nós levantamos a hipótese da participação das sortases nessa inibição. Essas enzimas são responsáveis pelo ancoramento das proteínas na parede celular bacteriana. Nós utilizamos quatro mutantes sortases (srtA1, srtA2, srtC1 e srtC2) e um duplo mutante srtA1-srtA2 de BL23 para testar o envolvimento dessas enzimas e seus substratos na inibição da internalização de S. aureus em CEMb. Em relação à linhagem BL23 selvagem, todos os mutantes mostraram uma reduzida capacidade de inibir a internalização de S. aureus em CEMb. Com destaque para o mutante srtA2, no qual a capacidade inibitória foi completamente abolida. Além disso, experiências preliminares demonstraram a capacidade de BL23 modular a resposta imune em CEMb, com um perfil anti-inflamatório. Os nossos resultados apontam para alguns potenciais mecanismos utilizados por L. casei BL23 para exercer os seus efeitos benéficos no contexto da mastite. Esses fatores serão objeto de outros estudos para melhor caracterizar o efeito probiótico exercido por L. casei BL23.