Estudo das comunidades microbianas associadas às infecções endodônticas de dentes decíduos sintomáticos e assintomáticos pelas técnicas do Multiple-Displacement Amplification e Checkerboard DNA-DNA Hybridization

• Autor(a) principal: Warley Luciano Fonseca Tavares
• Data de Publicação: 2008
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUOS-9K2GUG
• topic: Bactérias; Dentes decíduos; (checkerboard); Infecção endodôntica; Multiple Displacement Amplification (MDA); Hibridização DNA-DNA; Canal radicular Tratamento; Bactérias Identificação; Cavidade pulpar/microbiologia; Dentes decíduos; Endodontia Microbiologia

O Mulltiple Displacement Amplification (MDA) tem sido utilizado para amplificação uniforme do genoma de espécies bacterianas em diferentes amostras da cavidade oral. O MDA é particularmente útil em pequenas amostras, visto que o mesmo gera uma quantidade de amostra de DNA abundante para a análise microbiana. O objetivo do presente estudo foi avaliar a microbiota de infecções endodônticas de dentes decíduos. Um total de 35 crianças, de 4 a 10 anos de idade, apresentando dentes com raízes intactas ou menos que 2/3 de rizólise foram envolvidas no estudo. Quarenta amostras foram coletadas e amplificadas pela técnica do MDA. As amostras amplificadas foram analisadas pela hibridização DNA-DNA (Checkerboard) para taxas de 83 espécies bacterianas. Foram computadas as porcentagens de dentes colonizados por cada uma das espécies em diferentes limiares nas amostras amplificadas. Os níveis das espécies bacterianas encontradas em diferentes condições clínicas foram analisados. A significância das diferenças entre as proporções de cada espécie foram determinadas para amostras de canais radiculares de dentes com ou sem câmara pulpar exposta à cavidade oral, fístula, edema, e dor. A significância das diferenças para cada espécie nos diferentes cenários clínicos foi analisada pelo teste Kruskall-Wallis. A quantidade de DNA (± DP) nas amostras antes da amplificação era 5.2 (± 4.7) ng. Após o MDA, as amostras continham, em média, 6.05 (± 2.3) ìg de DNA. Oitenta das 83 sondas de DNA hibridizaram com uma ou mais amostras. As espécies bacterianas mais prevalentes em níveis > 104 células bacterianas foram Actinomyces naeslundii 1 e Prevotella intermedia, ambas presentes em 93.8% dos dentes analisados. O número médio de espécies (± DPM) detectadas por dente no nível de > 104 foi 20.19 (± 3.27). As espécies mais comumente encontradas neste nível foram Actinomyces naeslundii 1 e Prevotella intermédia. Quando a média de sondas de DNA x 105 (± DPM) foi analisada, as espécies mais abundantes foram A. naeslundii 1 (17.07±3.17), Prevotella nigrescens (1.12 ± 0.55) e P. intermedia (1.01 ± 0.30). Eikenella corrodens, Haemophilus aphrophilus, e Helicobacter pylori não foram detectados em nenhuma das amostras. Em relação à análise da microbiota associada a diferentes sinais e sintomas clínicos, diferenças estatisticamente significantes foram detectadas em algumas situações. Vinte e sete amostras foram estatisticamente significantes ao serem encontradas em maiores contagens em dentes abertos. A. naeslundii 1, Veillonella parvula, Gemella morbillorum. Streptococcus oralis, Aggregatibacter actinomycetemcomitans e Neisseria mucosa foram estatisticamente significantemente encontradas em maior número em dentes com exposição da câmara pulpar à cavidade oral. P. intermedia, Neisseria mucosa, Streptococcus anginosus, Selenomonas noxia e Streptococcus sanguinis foram detectados em contagens médias mais altas em dentes sem fístula. Não houve diferenças estatisticamente significantes na microbiota associada à presença ou ausência de edema. Dentes com dor apresentaram contagens elevadas de Prevotella nigrescens e Prevotella oris. A microbiota associada a canais radiculares de dentes decíduos demonstra ser mais complexa do que antes imaginado. Em conclusão, os resultados sugerem que espécies selecionadas estão associadas com os sinais e sintomas clínicos detectados em infecções endodônticas de dentes decíduos.