A expressão do gene de resposta precoce ao crescimento (EGR-1) após infecção pelo vírus Vaccinia.

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Patrícia Nogueira da Gama Silva
Data de Publicação: 2000
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/42452
Resumo: Outra Agência
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spelling Cláudio Antônio Bonjardimhttp://lattes.cnpq.br/9624031110564127http://lattes.cnpq.br/8463617169990618Patrícia Nogueira da Gama Silva2022-06-13T14:46:22Z2022-06-13T14:46:22Z2000-12-14http://hdl.handle.net/1843/42452Outra AgênciaCom a finalidade de maximizar os recursos para a sua replicação, muitos vírus durante os momentos iniciais da infecção podem redirecionar o metabolismo celular através da interação de proteínas virais com proteínas celulares induzindo células quiescentes a entrarem em proliferação. Assim, processos como estimulação mitogêmica celular, inibição da apoptose e indução de diferenciação celulares são estratégias comumente utilizadas por diversos vírus. O Vírus Vaccínia (VV) é o protótipo de família poxviridae, seu genoma é constituído de DNA dupla fita linear, potencialmente capaz de codificar aproximadamente 200 polipeptídeos. Para melhor compreensão dos eventos que ocorrem precocemente durante a infecção pelo VV, nós analisamos o papel do gene de resposta precoce ao crescimento (EGR-1). A expressão de EGR-1 em resposta a infecção pelo VV foi observada após 1 hora de infecção viral e permanece elevada até 9 horas pós infecção. Também analisamos a participação do VGF (fator de crescimento do VV), na expressão do gene EGR-1, e observamos que a expressão deste gene foi independente da presença de VGF. A expressão do gene EGR-1 foi dependente da multiplicidade de infecção, sendo evidente com a menor m.o.i. 0,01 e máxima nas multiplicidades 0,1 e 1,0. Uma vez que a expressão de EGR-1, foi totalmente anulada quando as células foram infectadas com o VV previamente inativado com U.V. e que o inibidor de síntese proteica, cicloheximida, foi capaz de inibir a expressão de EGR-1 de maneira dose dependente, podemos sugerir que para a indução de EGR-1 pelo VV é necessário síntese de proteínas virais e/ou celulares. Foram investigados também o efeito de diferentes inibidores de proteínaquinases, na indução da expressão do gene EGR-1 pelo VV. Os resultados demonstram que o inibidor H7, foi capaz de inibir de maneira dose dependente a expressão de EGR-1 em resposta à infecção pelo VV. O inibidor de MEK PD 98059, foi capaz de inibir significantemente a expressão de EGR-1 pelo VV, o mesmo não foi observado quando utilizamos os inibidores H89, AG-126, isto é, inibidores de PKA e ERK 1 e 2 respectivamente. Entretanto o inibidor de PKC (Ro 318220) aparentemente elevou o acúmulo de EGR-1. A regulação da expressão do gene EGR-1 é exercida através de diferentes elementos regulatórios existentes na porção 5' dentre eles dois AP-1, quatro sítios SP-1, dois elementos de resposta ao cAMP (CRE) e 6 CarG boxes ou SRE. Desta forma, verificamos a participação de alguns destes elementos regulatórios através da análise das interações DNA/Proteína (EMSA), utilizando-se oligonucleotídeos referentes às sequências AP-1 e SRE do gene em resposta a infecção pelo VV e este estudo evidenciou a formação de complexos DNA/proteína tanto com a sequência de AP-1 quanto de SRE. A infecção com o VV induz a atividade de ligação proteica ao elemento SRE 120 minutos após a infecção, aumentando gradativamente até 270 minutos pós infecção. No entanto, a ligação proteica à sequência AP-1 foi observada somente após 3-4 horas de infecção. Os ativadores transcricionais que se ligam à AP-1 e SRE foram também analisados utilizando-se anticorpos policlonais e verificamos a participação da proteína FOS no complexo formado no sítio AP-1 e da proteína SRF no complexo formado no sítio SRE. A eventual relevância desses resultados na replicação do VV será discutida.porUniversidade Federal de Minas GeraisPrograma de Pós-Graduação em MicrobiologiaUFMGBrasilICB - DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIAhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/pt/info:eu-repo/semantics/openAccessMicrobiologiaVírus VacciniaGenes PrecocesMicrobiologiaA expressão do gene de resposta precoce ao crescimento (EGR-1) após infecção pelo vírus Vaccinia.info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisreponame:Repositório Institucional da UFMGinstname:Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)instacron:UFMGORIGINALTese mestrado completa.pdfTese mestrado completa.pdfapplication/pdf678748https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/42452/1/Tese%20mestrado%20completa.pdfe9958326604c28db79920d4d3f871ba2MD51CC-LICENSElicense_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; charset=utf-8811https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/42452/2/license_rdfcfd6801dba008cb6adbd9838b81582abMD52LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-82118https://repositorio.ufmg.br/bitstream/1843/42452/3/license.txtcda590c95a0b51b4d15f60c9642ca272MD531843/424522022-06-13 11:46:22.769oai:repositorio.ufmg.br:1843/42452TElDRU7Dh0EgREUgRElTVFJJQlVJw4fDg08gTsODTy1FWENMVVNJVkEgRE8gUkVQT1NJVMOTUklPIElOU1RJVFVDSU9OQUwgREEgVUZNRwoKQ29tIGEgYXByZXNlbnRhw6fDo28gZGVzdGEgbGljZW7Dp2EsIHZvY8OqIChvIGF1dG9yIChlcykgb3UgbyB0aXR1bGFyIGRvcyBkaXJlaXRvcyBkZSBhdXRvcikgY29uY2VkZSBhbyBSZXBvc2l0w7NyaW8gSW5zdGl0dWNpb25hbCBkYSBVRk1HIChSSS1VRk1HKSBvIGRpcmVpdG8gbsOjbyBleGNsdXNpdm8gZSBpcnJldm9nw6F2ZWwgZGUgcmVwcm9kdXppciBlL291IGRpc3RyaWJ1aXIgYSBzdWEgcHVibGljYcOnw6NvIChpbmNsdWluZG8gbyByZXN1bW8pIHBvciB0b2RvIG8gbXVuZG8gbm8gZm9ybWF0byBpbXByZXNzbyBlIGVsZXRyw7RuaWNvIGUgZW0gcXVhbHF1ZXIgbWVpbywgaW5jbHVpbmRvIG9zIGZvcm1hdG9zIMOhdWRpbyBvdSB2w61kZW8uCgpWb2PDqiBkZWNsYXJhIHF1ZSBjb25oZWNlIGEgcG9sw610aWNhIGRlIGNvcHlyaWdodCBkYSBlZGl0b3JhIGRvIHNldSBkb2N1bWVudG8gZSBxdWUgY29uaGVjZSBlIGFjZWl0YSBhcyBEaXJldHJpemVzIGRvIFJJLVVGTUcuCgpWb2PDqiBjb25jb3JkYSBxdWUgbyBSZXBvc2l0w7NyaW8gSW5zdGl0dWNpb25hbCBkYSBVRk1HIHBvZGUsIHNlbSBhbHRlcmFyIG8gY29udGXDumRvLCB0cmFuc3BvciBhIHN1YSBwdWJsaWNhw6fDo28gcGFyYSBxdWFscXVlciBtZWlvIG91IGZvcm1hdG8gcGFyYSBmaW5zIGRlIHByZXNlcnZhw6fDo28uCgpWb2PDqiB0YW1iw6ltIGNvbmNvcmRhIHF1ZSBvIFJlcG9zaXTDs3JpbyBJbnN0aXR1Y2lvbmFsIGRhIFVGTUcgcG9kZSBtYW50ZXIgbWFpcyBkZSB1bWEgY8OzcGlhIGRlIHN1YSBwdWJsaWNhw6fDo28gcGFyYSBmaW5zIGRlIHNlZ3VyYW7Dp2EsIGJhY2stdXAgZSBwcmVzZXJ2YcOnw6NvLgoKVm9jw6ogZGVjbGFyYSBxdWUgYSBzdWEgcHVibGljYcOnw6NvIMOpIG9yaWdpbmFsIGUgcXVlIHZvY8OqIHRlbSBvIHBvZGVyIGRlIGNvbmNlZGVyIG9zIGRpcmVpdG9zIGNvbnRpZG9zIG5lc3RhIGxpY2Vuw6dhLiBWb2PDqiB0YW1iw6ltIGRlY2xhcmEgcXVlIG8gZGVww7NzaXRvIGRlIHN1YSBwdWJsaWNhw6fDo28gbsOjbywgcXVlIHNlamEgZGUgc2V1IGNvbmhlY2ltZW50bywgaW5mcmluZ2UgZGlyZWl0b3MgYXV0b3JhaXMgZGUgbmluZ3XDqW0uCgpDYXNvIGEgc3VhIHB1YmxpY2HDp8OjbyBjb250ZW5oYSBtYXRlcmlhbCBxdWUgdm9jw6ogbsOjbyBwb3NzdWkgYSB0aXR1bGFyaWRhZGUgZG9zIGRpcmVpdG9zIGF1dG9yYWlzLCB2b2PDqiBkZWNsYXJhIHF1ZSBvYnRldmUgYSBwZXJtaXNzw6NvIGlycmVzdHJpdGEgZG8gZGV0ZW50b3IgZG9zIGRpcmVpdG9zIGF1dG9yYWlzIHBhcmEgY29uY2VkZXIgYW8gUmVwb3NpdMOzcmlvIEluc3RpdHVjaW9uYWwgZGEgVUZNRyBvcyBkaXJlaXRvcyBhcHJlc2VudGFkb3MgbmVzdGEgbGljZW7Dp2EsIGUgcXVlIGVzc2UgbWF0ZXJpYWwgZGUgcHJvcHJpZWRhZGUgZGUgdGVyY2Vpcm9zIGVzdMOhIGNsYXJhbWVudGUgaWRlbnRpZmljYWRvIGUgcmVjb25oZWNpZG8gbm8gdGV4dG8gb3Ugbm8gY29udGXDumRvIGRhIHB1YmxpY2HDp8OjbyBvcmEgZGVwb3NpdGFkYS4KCkNBU08gQSBQVUJMSUNBw4fDg08gT1JBIERFUE9TSVRBREEgVEVOSEEgU0lETyBSRVNVTFRBRE8gREUgVU0gUEFUUk9Dw41OSU8gT1UgQVBPSU8gREUgVU1BIEFHw4pOQ0lBIERFIEZPTUVOVE8gT1UgT1VUUk8gT1JHQU5JU01PLCBWT0PDiiBERUNMQVJBIFFVRSBSRVNQRUlUT1UgVE9ET1MgRSBRVUFJU1FVRVIgRElSRUlUT1MgREUgUkVWSVPDg08gQ09NTyBUQU1Cw4lNIEFTIERFTUFJUyBPQlJJR0HDh8OVRVMgRVhJR0lEQVMgUE9SIENPTlRSQVRPIE9VIEFDT1JETy4KCk8gUmVwb3NpdMOzcmlvIEluc3RpdHVjaW9uYWwgZGEgVUZNRyBzZSBjb21wcm9tZXRlIGEgaWRlbnRpZmljYXIgY2xhcmFtZW50ZSBvIHNldSBub21lKHMpIG91IG8ocykgbm9tZXMocykgZG8ocykgZGV0ZW50b3IoZXMpIGRvcyBkaXJlaXRvcyBhdXRvcmFpcyBkYSBwdWJsaWNhw6fDo28sIGUgbsOjbyBmYXLDoSBxdWFscXVlciBhbHRlcmHDp8OjbywgYWzDqW0gZGFxdWVsYXMgY29uY2VkaWRhcyBwb3IgZXN0YSBsaWNlbsOnYS4KRepositório de PublicaçõesPUBhttps://repositorio.ufmg.br/oaiopendoar:2022-06-13T14:46:22Repositório Institucional da UFMG - Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)false
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