Impacto da inativação do gene slpB nos efeitos terapêuticos de Propionibacterium freudenreichii CIRM-BIA 129 em modelo murino de mucosite induzida por 5-Fluorouracil

• Autor(a) principal: Sara Heloísa da Silva
• Data de Publicação: 2020
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/35431
• topic: Propionibacteria; Probióticos; Imunomodulação; Proteína da camada S; Mucosite; Genética; Mucosite; Propionibacteriaceae; Probióticos; Imunomodulação; Proteínas de membrana

Propionibacterium freudenreichii CIRM-BIA 129 (P. freudenreichii selvagem, WT) é uma bactéria Gram-positiva usanda na maturação de queijo, que atualmente teve seu potencial probiótico investigado. Em estudos anteriores o consumo dessa bactéria provou exercer efeitos imunomoduladores em modelo murino de colite induzida por agente químico. Parte dos efeitos imunomodulatórios dessa linhagem depende das proteínas da camada S (Slp) à quais podem estar envolvidas na persistência no intestino, adesão às células e muco do hospedeiro ou imunomodulação. Precisamente, a inativação do gene para a proteina SlpB na linhagem P. freudenreichii WT ressultou na linhagem mutante ΔslpB que teve sua capacidade de adesão às células epiteliais in vitro reduzida, em comparação a linhagem parental. Contudo, o efeito imunomodulador da proteína SlpB da linhagem P. Freudenreichii WT não está claro. Dessa forma, fica evidente elucidar o papel anti-inflamatório dessa proteína in vitro e in vivo. Em um ensaio in vitro, a linhagem selvagem de P. freudenreichii reduziu a expressão de citocinas IL-8 (p <0,0001) e TNF-α (p <0,0001) em células HT-29 estimuladas por Lipopolissacarídeo (LPS). Em contrapartida, a linhagem mutante P. freudenreichii ΔslpB, absente da proteína SlpB, não foi capaz de reduzir a expressão dessas citocinas. Posteriormente, ambas as linhagens foram investigadas in vivo em um modelo de mucosite induzida por 5-fluorouracil (5-FU) em camundongos BALB/c. A mucosite é um efeito colateral comum da quimioterapia com 5-FU, caracterizada por lesão nas mucosas, inflamação, diarréia e perda de peso. A linhagem selvagem WT evitou a perda de peso, reduziu a inflamação e, consequentemente, os escores histopatológicos. Além disso, regulou a expressão de marcadores envolvidos no processo inflamatório, incluindo os genes Claudin-1 (cld1, p <0,0005) e IL-17a (Il17a, p <0,0001), bem como os genes IL-12 (p <0,0001) e IL-1β (p <0,05) níveis de citocinas. A linhagem mutante apresentou efeito contrário relativo à expressão do gene cld1 e nos níveis de IL-12. Este trabalho enfatiza a importância do SlpB na capacidade de P. freudenreichii de reduzir a inflamação em um modelo de mucosite. Ele abre perspectivas para o desenvolvimento de produtos probióticos para diminuir os efeitos colaterais da quimioterapia usando bactérias GRAS com propriedades imunomoduladoras de proteínas de superfície.