Influência da diversidade fenotípica de Cryptococcus gattii e C. neoformans na progressão da critptococose em modelo murino

• Autor(a) principal: Gustavo José Cota de Freitas
• Data de Publicação: 2018
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/42360
• topic: Criptococose; C. gattii; C. neoformans; Virulência; Diversidade fenotípica; Modelo murino; Microbiologia; Criptococose; Cryptococcus neoformans; Cryptococcus gattii; Virulência

Cryptococcus gatti e C. neorformans são as principais espécies do gênero Cryptococcus que apresentam relevância médica e veterinária. Esses microrganismos são ubíquos, e no contexto ambiental e do hospedeiro, enfrentam diversas pressões, tais como temperatura, pH, osmolaridade, baixa disponibilidade de nutrientes, hipóxia, fagocitose por amebas de vida livre, resposta imune do hospedeiro, entre outros. Considerando essa premissa, este estudo avaliou, para cinco linhagens de C. gattii e cinco de C. neoformans, in vitro e in vivo, a variação nos atributos relacionados à virulência e patogenicidade (susceptibilidade a antifúngicos, espessura da cápsula polissacarídica, tamanho da célula, pseudofilamentação, melanização, tolerância à temperatura, atividade das enzimas uréase e lacase) e demonstrou, em modelo murino de infecção, como esses fatores podem influenciar na virulência. Os dados obtidos demonstraram que a morfologia e o crescimento de Cryptococcus são extremamente variáveis conforme as condições de cultivo (meio e temperatura) e que nem sempre, alterações observadas in vitro, ocorrem in vivo. Nós vimos que o cultivo de C. gattii e C. neoformans em meios nutricionalmente pobres, como o Meio mínimo líquido (MML) e Meio mínimo líquido suplementado com Soro fetal bovino (MML + SFB10%), causa redução significativa (p<0,05) do diâmetro celular e aumento (p<0,05) da razão superfície volume (S/V) e espessura capsular em relação ao meio rico Sabouraud dextrose líquido (SDL). Essa variação morfológica ocorre para que a célula consiga otimizar o seu metabolismo e aumentar o seu fitness reprodutivo. Para C. gattii, a linhagem WM179 foi a que apresentou maior espessura capsular no MML, assim como, para as linhagens WM628 e WM626 de C. neoformans. Em seguida nós investigamos a virulência em modelo murino de infecção. Contudo, o aumento da cápsula in vitro não foi determinante para a virulência, uma vez que nas análises de letalidade a linhagem WM179 foi pouco virulenta e apresentou carga fúngica reduzida no pulmão e não detectável no cérebro após 10 dias de infecção. Imediatamente após a infecção, há uma redução significativa do corpo celular, tanto para C. gattii quanto para C. neoformans, acreditamos que esse fator pode favorecer a passagem na barreira hematoencefálica e o acesso ao SNC. Em seguida, foi observada uma relação direta entre aumento da cápsula polissacarídica no pulmão e lavado broncoalveoloar ao longo da infecção com a virulência das cepas de C. neoformans, mas não de C. gattii. Conclui-se que a virulência de C. neoformans e C. gattii está associada à diversidade fenotípica desse microrganismo, principalmente para C. neoformans, em que variações morfológicas in vivo foram capazes de predizer a virulência de cada linhagem.