Análise da expressão de marcadores da transição epitélio mesênquima e suas modificações pós-traducionais (PTMs) em lesões endometrióticas

• Autor(a) principal: Camila Pereira Almeida
• Data de Publicação: 2023
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/59935; https://orcid.org/0000-0002-4972-9826
• topic: Endometriose; Transição Epitelial-Mesenquimal; Imuno-Histoquímica; Espectrometria de Massas; Proteoma; Caderinas; Patologia; Endometriose; Transição Epitelial-Mesenquimal; Imuno- Histoquímica; Espectrometria de Massas; Proteoma; Caderinas; Beta Catenina

A Transição Epitélio-Mesênquima (TEM) é um potencial mecanismo envolvido no desenvolvimento da endometriose devido a alterações em moléculas de adesão celular e vias que podem levar a uma maior capacidade de migração e invasão do endométrio ectópico. Modificações pós-traducionais (PTMs, do inglês), como glicosilação e fosforilação, são cruciais na regulação da atividade de marcadores da TEM, e até o momento não há dados sobre o perfil dessas modificações em lesões endometrióticas. Portanto, com o objetivo de avaliar a expressão e as modificações (PTM) das proteínas envolvidas na TEM, o presente estudo foi dividido em uma análise retrospectiva das variações dos marcadores de TEM em lesões endometrióticas de diferentes estruturas pélvicas por meio da avaliação da expressão gênica por RT-qPCR e proteica por imunohistoquímica; assim como uma análise baseada em espectrometria de massa do proteoma total e perfil de PTMs na endometriose peritoneal. No primeiro estudo, observaram-se dois padrões histológicos nas lesões endometrióticas examinadas: um padrão glandular bem diferenciado e um padrão glandular indiferenciado, ambos coexistindo nas mesmas amostras. Não houve diferença na expressão de RNAm de E- caderina entre as amostras controles e as de lesões endometrióticas. No entanto, houve uma regulação negativa da expressão gênica de N-caderina e Snail, e uma regulação positiva da expressão gênica de ZEB1 nas lesões endometrióticas. A análise imunohistoquímica revelou uma maior frequência de baixa expressão de E-caderina, associada a uma maior frequência de alta expressão de N-caderina e β-catenina membranar na endometriose. Todos os grupos apresentaram baixa expressão de β-catenina nuclear. Vimentina foi positiva em todas as amostras, com uma expressão discretamente aumentada nas lesões endometrióticas. Esses dados corroboram a hipótese de que as células epiteliais endometrióticas demonstram um fenótipo parcial de TEM, expressando marcadores tanto epiteliais quanto mesenquimais. No segundo estudo, nossos resultados não apresentaram diferença significativa no perfil geral de expressão dos grupos analisados. No entanto, as lesões endometrióticas apresentaram 276 regulações significativas no proteoma total, 2240 no fosfoproteoma e 481 no N-glicoproteoma contendo ácido siálico (sialioma) quando comparadas ao endométrio eutópico de pacientes com endometriose. Uma análise mais aprofundada dessas regulações revelou enriquecimento de processos biológicos no Gene Ontology (GO) e vias no KEGG para contração do citoesqueleto de actina, regulação positiva da adesão célula-substrato, interação matriz extracelular (ECM)- receptor e adesão focal no proteoma total e fosfoproteoma. E-caderina, p120-catenina e Twist 2 apresentaram sítios fosforilados com regulação negativa nas lesões endometrióticas que podem levar a um aumento da adesão celular. Proteínas ligantes de actina, como actinina, filamina A e vinculina, apresentaram sítios fosforilados com regulação positiva que poderiam perturbar o citoesqueleto celular e diminuir a adesão celular. Esse equilíbrio entre o aumento e a diminuição da adesão celular nas lesões endometrióticas fornece importantes percepções sobre as mudanças celulares necessárias para o desenvolvimento e estabelecimento da lesão endometriótica. Em conclusão, os achados do presente estudo destacam a importância da fosforilação e da N-glicosilação contendo ácido siálico na preservação da integridade das junções aderentes na endometriose e oferecem novos caminhos para pesquisas futuras sobre a influência de modificações pós-traducionais na regulação da transição epitélio-mesênquima para o estabelecimento da endometriose.