Condroitinase ABC e células tronco mesenquimais no tratamento de Rattus norvegicus submetidos a trauma agudo da medula espinhal

• Autor(a) principal: Carla Maria Osório Silva
• Data de Publicação: 2013
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/SMOC-9QXGAE
• topic: Células tronco mesenquimais da medula óssea; Ratos; Condroitinase; Trauma da medula espinhal; Rato como animal de laboratório; Medicamentos Administração; Células-tronco; Traumatismos da medula espinhal

A lesão da medula espinhal atinge pessoas e animais ocasionando déficits motores e sensoriais que comprometem consideravelmente a qualidade de vida e, no caso dos animais, muitas vezes, levam à eutanásia. O tratamento dessa afecção é um desafio para os pesquisadores, pois ainda não há terapia efetiva para essa complexa patologia. Nesse contexto, a utilização de células tronco surge como recurso terapêutico particularmente promissor, pois além de secretarem fatores neurotróficos, essas células podem se diferenciar em neurônios e componentes gliais, contudo essas ações parecem ser prejudicadas pela cicatriz glial formada após a lesão medular. A enzima bacteriana condroitinase ABC tem a capacidade de digerir essa cicatriz o que poderia favorecer a ação dessas células bem como a regeneração axonal. Com o objetivo de estudar o efeito da condroitinase ABC e das células tronco mesenquimais da medula óssea, em terapia única ou associada, no tratamento do trauma à medula espinhal foram utilizados 50 Rattus norvegicus divididos em cinco grupos. Os animais do grupo controle negativo (CN) foram submetidos à laminectomia, enquanto os demais sofreram adicionalmente trauma medular compressivo e foram tratados com placebo (PLA), condroitinase ABC (CDT), células tronco mesenquimais da medula óssea (CTM) ou condroitinase e células tronco associadas (CDT+CTM). A CDT, ou PLA, foram administrados via intralesional, sete dias após a laminectomia; enquanto as CTM, ou PLA, foram injetados via intravenosa, 14 dias após a laminectomia. Os animais foram avaliados quanto à capacidade motora e, 30 dias após a laminectomia, procedeu-se a eutanásia e posterior verificação das alterações histopatológicas da medula espinhal. As medulas espinhais foram avaliadas também por meio da PCR, para quantificação da expressão gênica do BDNF, NT-3, VEGF, KDR, PECAM-1 e caspase 3; e da imunoistoquímica, para detecção das células tronco injetadas (anti-GFP) e quantificação de astrócitos (anti-GFAP), neurônios (anti-NeuN) e vimentina. Não houve diferença estatística na capacidade motora dos animais submetidos ao trauma. Quanto à expressão gênica, o CTM foi superior na quantificação do BDNF e do VEGF e, não houve diferença entre os tratamentos quanto ao NT-3, KDR, PECAM-1 e caspase-3. Na avaliação imunoistoquímica, as células tronco transgênicas foram detectadas nos grupos que a receberam. A marcação dos neurônios foi maior no grupo CDT+CTM em relação ao PLA. A imunomarcação para o GFAP foi maior nos grupos PLA e CDT+CTM do que no CN. Quanto à vimentina, a imunomarcação do CN foi menor e se diferiu de todos os grupos com trauma, sendo que entre esses, o CDT obteve a menor marcação. Concluiu-se que as células tronco mesenquimais foram eficientes para promover aumento na expressão dos fatores tróficos BDNF e VEGF ocasionando neuroproteção. A condroitinase ABC se mostrou efetiva na redução da cicatriz glial, verificada pela imunomarcação da vimentina. Não se observou sinergismo da associação CDT+CTM.