Prospecção e caracterização de vírus gigantes em amostras do Rio Negro, Amazônia

• Autor(a) principal: Rafael Kroon Campos
• Data de Publicação: 2013
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/42447
• topic: Mimiviridae; Amazônia; Rio Negro; Vírus gigantes; Riqueza; Biodiversidade.; Microbiologia; Mimiviridae; Vírus Gigantes; Biodiversidade; Ecossistema Amazônico

A família Mimiviridae compreende vírus gigantes de DNA que são estudados como agentes etiológicos hipotéticos de pneumonia em humanos. Estudos metagenômicos recentes detectaram DNA de vírus dessa família em ecossistemas aquáticos naturais em alguns países do hemisfério norte, além de uma região litorânea do Chile. Até o momento, nenhum membro da família Mimiviridae havia sido descrito em território brasileiro. Embora a Amazônia seja conhecida pela grande biodiversidade, existem poucos estudos que demonstrem aprovável riqueza de vírus neste bioma. Assim, esse trabalho teve como objetivo a prospecção de vírus da família Mimiviridae e outros vírus gigantes em águas do Rio Negro, AM, Brasil. A coleta foi feita em diversos pontos do Rio Negro em região próxima a Manaus. As amostras de água foram submetidas a um processo de enriquecimento em meio de água-arroz e filtradas (em filtro de 200 nm) para retenção dos vírus no filtro. As amostras foram então inoculadas em cultivo de amebas para isolamento e paralelamente submetidas a ensaios de PCR em tempo real, para amplificação do DNA do gene da helicase dos vírus da família Mimiviridae. No presente trabalho descrevemos o isolamento e caracterização do Samba virus (SMBV), um novo vírus do gênero Mimivirus, nas águas do Rio Negro da Amazônia brasileira; bem como o isolamento e caracterização de um virófago associado, denominado Rio Negro virophage (RNV), o primeiro virófago de mimivírus isolado nas Américas. A análise do gene da helicase revelou que SMBV se agrupa filogeneticamente com os mimivírus do grupo A, incluindo representantes como mimivírus e mamavírus. O virófago foi identificado por PCR em tempo real empregando iniciadores para o gene de capsídeo, confirmando sua identidade e a analise revelou 100% de identidade com o Sputnik virus. Testes biológicos e de microscopia eletrônica revelaram características únicas de SBMV e RNV. O presente estudo abre novas perspectivas para o estudo de vírus gigantes no Brasil.