Efeito biológico da proteína pentraxina 3 sobre as características morfológicas e fisiológicas de células tumorais humanas

• Autor(a) principal: Octávio Mangabeira Sobrinho
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUBD-AE7GKT
• topic: Pentraxina 3; Ciclo celular; Citoesqueleto; Apoptose; Genética

A pentraxina 3 é uma glicoproteína de fase aguda que exerce funções essenciais na imunidade inata, controle da inflamação, deposição de matriz e na fertilidade feminina. PTX3 liga-se, com grande afinidade e especificidade, aos Fatores de Crescimento de Fibroblasto do tipo 2 e 8, inibindo a proliferação celular e angiogênese promovida por esses e, consequentemente, o crescimento de tumores de próstata e mama murinos. Foi demonstrado que outros membros da família da pentraxinas, como a proteína C Reativa e a Pentraxina Neuronal 2, induzem a apoptose e parada no ciclo celular em monócitos e células de câncer pancreático humanos, respectivamente. A hipótese deste trabalho é a de que a ação inibitória da Pentraxina 3 sobre a progressão de tumores não é apenas decorrente do seu papel como antagonista natural dos FGFs, mas também de sua capacidade de promover parada no ciclo celular e o aumento da apoptose. O nosso objetivo foi avaliar o efeito biológico da proteína PTX3 sobre a morfologia e fisiologia das células de adenocarcinoma de cólon (HCT-116) e melanoma humano (SK-MEL-37). A morfologia foi avaliada por microscopia óptica de contraste de fase e imunofluorescência. O perfil de expressão de genes pró-apoptóticos (BAX), anti-apoptótico (BCL2), reguladores do ciclo celular (MYC, CDKN1A/p21 e TP53) foi analisado por qRT-PCR e a parada no ciclo celular por citometria de fluxo. Nossos resultados mostraram que o tratamento com a proteína PTX3 exógena promoveu uma redução discreta no número de células na fase G0/G1 no tempo de 24 horas na linhagem SK-MEL-37 e de 48 horas na linhagem HCT-116. PTX3 não induziu a apoptose na concentração de 2,64 g/ml nos tempos de 12, 24 e 48 horas em nenhuma das linhagens testadas. Não foi observada modulação da expressão de BCL-2, MYC e TP53 nas linhagens SK-MEL-37 e HCT-116 após 3 horas de tratamento com rhPTX3. Foi observada uma diminuição do acúmulo de transcritos de CDKN1A no grupo HCT-116 tratado quando comparado ao controle. Esses dados reforçam os nossos achados do ensaio do ciclo celular, uma vez que PTX3 pode estar promovendo a redução do número de células na fase G0/G1 da linhagem HCT-116 através da diminuição da quantidade de transcritos de CDKN1A, regulação esta independente de TP53, uma vez que a quantidade de transcritos desse gene não sofreu alteração. Nossos dados são indicativos de que PTX3 não promove aumento da apoptose nas linhagens SK-MEL-37 e HCT-116, podendo inclusive, nesta última, agir como um promotor da proliferação celular por diminuir os níveis de CDKN1A nestas células.