Avaliação do efeito biológico da pentraxina 3 em linhagens de células tumorais humanas

• Autor(a) principal: João Paulo Silva Nunes
• Data de Publicação: 2014
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUOS-9KWJP6
• topic: Genética; Pentraxina 3 (PTX3); Neovascularização; Câncer; Genética; Inflamação

A pentraxina 3 é uma glicoproteína de fase aguda expressa em uma grande variedade de células e que desempenha uma miríade de funções em processos biológicos associados a fertilidade feminina, imunidade inata e angiogênese. PTX3 interage seletivamente e especificamente aos fatores de crescimento de fibroblastos (FGFs) impedindo a interação desses fatores com seus receptores específicos do tipo tirosina quinase (FGFR) presentes na membrana das células. O sistema FGF/FGFR desempenha papéis importantes em inúmeros processos tais como migração, diferenciação, sobrevivência e proliferação celulares, sendo um relevante agente pro-angiogênico que contribui para o desenvolvimento e progressão de uma variedade de condições fisiológicas e patológicas. No que se refere ao câncer, a angiogênese favorece a proliferação das células tumorais, invasão local e metástase hematogênica. A possibilidade de modular a angiogênese alterando o equilíbrio entre o balanço pró e anti-antiangiogênico tem, portanto, grande potencial terapêutico. Neste sentido, são relevantes as pesquisas buscando a identificação e caracterização funcional de moléculas, como PTX3, que é um antagonista natural do sistema FGF/FGFR. O objetivo deste estudo foi caracterizar a expressão de PTX3 em linhagens humanas derivadas de sarcoma (HT 1080, SAOS 2), cólon (HCT 116, CACO 2 e SW 480) e melanoma (SK-MEL 37 e SK-MEL 188) bem como avaliar o seu efeito sobre a proliferação celular e perfil de expressão de genes relacionados à resposta inflamatória e angiogênese nestas células. A expressão gênica foi avaliada por RT-PCR e a proliferação celular analisada pelo método MTT e por contagem de células coradas pelo Azul de Tripan. Os aspectos relacionados à morfologia foram investigados por microscopia de contraste de fase e por imunofluorescência utilizando faloidina-rodamina conjugada com TRITC para identificação da estrutura de actina-F nas células. As linhagens tumorais HT 1080, HCT 116, SK-MEL 37 e SK-MEL 188 apresentaram expressão basal tanto de FGF 2 quanto de todos os receptores para FGF (FGFR 1-4) investigados. Nenhuma das linhagens apresentou expressão basal de FGF8. Níveis basais de PTX3 foram detectados nas células HT 1080, HCT 116, SW 480 e SK-MEL 188. Resultados preliminares indicaram que PTX3 parece interferir negativamente na proliferação da linhagem de fibrosarcoma humano HT 1080. Os resultados obtidos através da análise, por imunofluorescência, sugerem que PTX3 promove alterações no citoesqueleto das células HT 1080 e HCT 116. Nas primeiras, uma aparente diminuição da abundância de filopódios foi detectada, e nas últimas, parece haver uma diminuição no número de filamentos transcelulares. Esses resultados preliminares suscitam a necessidade de aprofundamento dos estudos buscando a elucidação do papel de PTX3 nos mecanismos relacionados à migração e à proliferação celular dependentes de FGF em células tumorais humanas bem como a avaliação do potencial terapêutico de PTX3 como agente anti-angiogênico.