Caracterização de antígenos componentes de complexos ribonucleoprotéicos de Trypanosoma cruzi contendo seqüências com repetições de aminoácidos

• Autor(a) principal: Fabiano Sviatopolk-mirsky Pais
• Data de Publicação: 2008
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/CMFC-7R6NU6
• topic: aminoácidos; Trypanosoma cruzi; Genetica Expressão; Bioquímica; Tripanossoma cruzi; Sequência de aminoácidos

O Trypanosoma cruzi expressa diversos antígenos contendo seqüências com aminoácidos repetitivos. Neste trabalho foram caracterizados os antígenos TcRpL7a e TcRBP28 que contém repetições de aminoácidos semelhantes e apresentam similaridade com a proteína ribossômica L7a de eucariotos e com proteínas de ligação a RNA de T. brucei respectivamente. Ensaios de Western blot usando a proteína TcRpL7a completa e truncada indicaram que a resposta humoral dos pacientes é exclusiva contra a região repetitiva. Uma análise das seqüências de TcRpL7a de seis cepas diferentes do parasito indicaram que o número de módulos repetitivos é maior em cepas pertencentes à linhagem II de T. cruzi. 73% de um painel de 59 pacientes chagásicos apresentaram reatividade contra TcRpL7a, 71% contra TcRBP28 e 80% contra uma mistura dos dois antígenos. Um peptídeo sintético correspondente a uma parte da região repetitiva de TcRpL7a apresentou 46% de reatividade com os soros. Anticorpos gerados em camundongos identificaram as proteínas nativas presentes em níveis similares em todas as formas do ciclo de vida do parasito. Análises de frações subcelulares indicaram que TcRBP28 está presente no citoplasma e que TcRpL7a co-precipita com a fração de polissomos. A fusão com GFP confirmou a localização citoplasmática de TcRBP28 e mostrou um acúmulo da proteína GFP::TcRpL7a no núcleo da célula onde ocorre a biogênese do ribossomo. Camundongos imunizados com TcRpL7a::his desenvolveram anticorpos anti-IgG1/2a e apresentaram maior número de células secretoras de IFN-g. A capacidade de TcRpL7a de conferir proteção está sendo avaliada no presente momento.