Estudo in vitro e in vivo do efeito probiótico de Weissella paramesenteroides WpK4 no tratamento da infecção causada por Rotavírus

• Autor(a) principal: Cesar da Silva Santana Moura
• Data de Publicação: 2018
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/64557
• topic: Probióticos; Rotavírus; Weissella; Genética; Probióticos; Weissella; Rotavírus

Diarreia severa causada por gastroenterite, ou inflamação da mucosa intestinal, é ainda um grande problema global, sendo observada em países desenvolvidos e países em desenvolvimento. É uma das doenças mais comuns do mundo, afetando pessoas de todas as faixas etárias, contudo, tem frequência maior durante os primeiros anos de vida, e é a segunda maior causa de mortalidade nos primeiros anos de vida. Os vírus estão principalmente associados à gastroenterite aguda, dentre os quais se destaca o Rotavírus. A gastroenterite induzida por RV não é tratada com antibióticos ou drogas. O Rotavírus apresenta uma grande diversidade de linhagens e as vacinas atualmente disponíveis no mercado não abrangem toda essa diversidade. Assim, várias linhagens não cobertas pela vacinação contribuem para a reemergência da doença. Nas últimas décadas, a modulação da microbiota intestinal tem sido avaliada, entre as abordagens, está o uso de probióticos. A grande vantagem da terapia com probióticos é a ausência de efeitos secundários, como a seleção de bactérias resistentes quando antibióticos são usados. Neste contexto, probióticos para modular a microbiota intestinal e controlar a diarreia podem ser uma alternativa eficaz para o tratamento de gastroenterite aguda. Weissella paramesenteroides WpK4 mostrou ação probiótica frente a infecção por Salmonella Typhimurium em modelo experimental murino, assim estudos envolvendo outros enteropatógenos se tornam relevantes para melhor entendimento do caráter protetor da linhagem. Neste sentido, o presente trabalho buscou avaliar o efeito probiótico da linhagem WpK4 frente a infecção causada pelo Rotavírus SA11 in vitro, em células epiteliais intestinais da linhagem HT-29, e in vivo, em modelo experimental murino. A adesão e invasão de WpK4 foi avaliada em ensaio de co-cultivo em três linhagens celulares, MA104, HT-29 e Caco-2, usando uma ROI de 100:1 (WpK4:célula) com 1 h de contato. A quantidade de bactérias aderidas (internalizadas) variou de 4,3 a 5,9 log UFC/mL (2,6-4,0 log UFC/mL). A infecção de células HT-29 por Rotavírus SA11 pré-ativado (106 FFU/mL) foi avaliada: 1 hora antes da adição da bactéria (108 UFC); simultaneamente com a bactéria; 30 min depois da adição da bactéria; e após uma incubação da bactéria e vírus pré-ativado por 1 hora a 37°C. Houve a redução significativa da infecção nos tempos de 24, 48 e 72 h para todos grupos com exceção do grupo onde pré-incubação do vírus e bactéria não promoveu nenhuma ação direta desta sobre o vírus que permanece tão infectivo como o controle. Estudos recentes demonstraram a importância da microbiota intestinal da progenitora influenciando no desenvolvimento do sistema imune da prole. Com o objetivo de avaliar se WpK4 induziria resistência à infecção pelo RVA via modulação do sistema imune, administrou-se diariamente a bactéria Weissella paramesenteroides na água da fêmea progenitora durante as duas semanas antes do nascimento da prole com continuidade até o 15º dia de vida da prole. No 9º dia de vida da prole, a mesma foi desafiada com RVSA11 (104 UFF) e observada duas vezes ao dia, durante sete dias pós-infecção. Houve uma frequência maior de diarreia e três óbitos no grupo controle de vírus e significativamente menos diarreia, sem nenhum óbito, no grupo de fêmeas prenhes pré-tratado com WpK4. Os dados realçam o efeito probiótico protetor de WpK4 em infecções de células de mamíferos e camundongos por Rotavírus.