Papel da angiotensina -(1-7) na migração de células mononucleares

• Autor(a) principal: Isabella Zaidan Moreira
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/33939
• topic: Sistema renina-angiotensina; Angiotensina-(1-7); Resolução da resposta inflamatória; Migração celular

A resolução da inflamação é um processo altamente regulado e ativo, caracterizado por alguns eventos chave, como a apoptose de neutrófilos seguido de sua remoção por macrófagos - processo chamado eferocitose. A migração não flogística de macrófagos contribui sobremaneira para o processo de clearance e consequente resolução da inflamação. Recentemente foi demonstrado que a Angiotensina-(1-7), um metabólito do sistema Renina-Angiotensina, apresenta os efeitos pró-resolutivos de indução da apoptose de neutrófilos e remoção dos corpos apoptóticos por eferocitose. No presente estudo, investigamos o papel da Ang-(1-7) na indução da migração de células mononucleares humanas (monócitos) e murinas (macrófagos RAW 264.7 e macrófagos derivados da medula óssea- BMDMs) e o envolvimento da via MEK/ERK e dos receptores Mas e CCR2 neste processo, por meio de estudos in vitro e in vivo. Ang-(1-7) induziu a migração de monócitos humanos e macrófagos murinos em placas de transwell. Utilizando-se antagonistas farmacológicos seletivos para os receptores CCR2 (RS504393) e Mas (A779) na linhagem de células RAW, bem como BMDMs de animais deficientes em CCR2, observou-se que migração induzida por Ang-(1-7) foi dependente dos receptores Mas e CCR2. A inibição da via MEK/ERK, importante para migração de células mononucleres, utilizando dois diferentes inibidores (Selumetinibe e U0126), impediu a quimiotaxia de macrófagos murinos induzida por Ang-(1-7). Em camundongos BALB/c a injeção intra-articular e intrapleural de Ang-(1-7) induziu um influxo de células mononucleares para as respectivas cavidades, associado ao aumento dos níveis de CCL2. Os leucócitos recrutados para a cavidade pleural após a injeção de Ang-(1-7) foram principalmente monócitos Ly6C+/F4/80-, os quais foram caracterizados fenotipicamente por citometria de fluxo. De acordo com os dados obtidos in vitro, experimentos conduzidos in vivo mostram que o pré-tratamento com antagonistas seletivos dos receptores CCR2 (RS504393) e Mas (A779) e da via MER/ERK (U0126), diminuíram a migração de células mononucleares para a pleura dos camundongos. Avaliamos também o efeito da inibição do receptor Mas (A779) na resolução da pleurisia induzida por LPS e observamos que o a injeção de A779 durante o curso da inflamação preveniu a resolução que ocorre espontaneamente no tempo de 48h neste modelo experimental, caracterizando assim um comprometimento do processo de resolução. Finalmente, a participação do receptor Mas foi também avaliada utilizando-se animais WT e MasR-/-. Nossos resultados mostram que a pleurisia foi exacerbada nos animais MasR-/- (marcada por maior recrutamento de neutrófilos no pico da inflamação – 8 h), reforçando a participação do eixo Ang-(1-7)/MasR nesse modelo experimental. Em conjunto, os resultados mostram que a Ang-(1-7) é capaz de recrutar células mononucleares de maneira dependente dos receptores Mas e CCR2 e da via MEK/ERK1/2. Somando-se às já demonstradas propriedades indutoras de apoptose e de eferocitose da Ang-(1-7), foi mostrado aqui o efeito indutor do recrutamento de células mononucleares, o qual pode contribuir para as propriedades pró-resolutivas deste peptídeo.