Avaliação do perfil de citocinas e quimiocinas em pacientes com esclerose sistêmica: correlação com manifestações clínicas e com resposta ao tratamento

• Autor(a) principal: DANTAS, Andréa Tavares
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFPE
• Texto Completo: https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/25783
• topic: Escleroderma sistêmico - Tratamento; Escleroderma sistêmico - Fisiopatologia; Citocinas; Quimicionas

A esclerose sistêmica (ES) é uma doença multissistêmica do tecido conjuntivo, de etiologia desconhecida, caracterizada essencialmente por fibrose progressiva da pele e órgãos internos. Os mecanismos fisiopatogênicos envolvem alterações vasculares e desregulação autoimune, com participação de múltiplas citocinas. Atualmente, as poucas opções de tratamento para a doença, sobretudo para as manifestações inflamatórias e fibróticas, apresentam eficácia limitada. Sendo assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar o perfil de citocinas e quimiocinas produzidas por pacientes com ES e avaliar, in vitro, a resposta ao tratamento com metilprednisolona (MP) e com um novo derivado tiazolidínico LPSF/CR-35. Foram avaliados 67 pacientes com diagnóstico de ES e 64 voluntários saudáveis, pareados por sexo e por idade. Para avaliação da resposta in vitro, foi realizada cultura de células mononucleares do sangue periférico (PBMC). A quantificação de citocinas e quimiocinas no soro e no sobrenadante de culturas foi realizada através de cytometric bead array (CBA) e enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). Em comparação com controles saudáveis, pacientes com ES apresentaram níveis séricos aumentados de IFN-γ, TGF-β, CCL2/MCP-1, CCL5/RANTES, CXCL9/MIG, CXCL10/IP-10, os quais foram associados à presença de manifestações clínicas específicas. Descrevemos também, aumento dos níveis séricos de IL-35 e sua associação com a presença de fibrose pulmonar, assim como elevação dos níveis de IL-29/IFN-λ1 e sua correlação com níveis de IFN-λ em pacientes com ES. No intuito de melhor caracterizar a associação entre citocinas e manifestações clínicas, foram mensurados os níveis de citocinas e quimiocinas no sobrenadante das culturas de PBMC não estimuladas e/ou submetidas ao estímulo com anti-CD3/CD28. Observou-se associação entre produção de IL-10 e a extensão do envolvimento cutâneo, IL-2 e dismotilidade esofageana, IL-2 e IL-4 e fibrose pulmonar e IL-4 e IL-10 e a presença de úlceras digitais. Com relação às quimiocinas, foi detectado aumento do nível sérico de CCL5/RANTES em pacientes com fibrose pulmonar. No sobrenadante de cultura de PBMC, verificou-se maior concentração de CCL5/RANTES e de CXCL8/IL-8 em pacientes com úlceras digitais e maior produção de CXCL9/MIG e CXCL10/IP-10 em pacientes com doença precoce. Com o objetivo de verificar a resposta in vitro ao tratamento com corticosteroides, as condições de cultura estimuladas com anti-CD3/CD28 foram tratadas com MP 100μM e, após 48 horas, foi observada significativa redução dos níveis de CCL2/MCP-1, CCL5/RANTES e CXCL8/IL-8 em pacientes com ES. Nesses mesmos pacientes, as citocinas IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-17A, TNF e IFN- não sofreram modulação após o tratamento com MP. Por fim, foi avaliada a resposta in vitro ao tratamento com o LPSF/CR-35. O composto inibiu significativamente a produção de IL-4, IL-10, IL-17A, CCL2/MCP-1 e CXCL8/IL-8 e aumentou a de TNF em pacientes com ES. Dessa forma, o presente estudo demonstrou que pacientes com ES apresentam um perfil diferente de produção de citocinas e quimiocinas em comparação com indivíduos saudáveis e esse achado pode ajudar na melhor caracterização dos diversos fenótipos de pacientes. O tratamento da doença permanece um desafio e a avaliação dos efeitos in vitro de novas ou de estabelecidas moléculas fornecem subsídios para o futuro desenvolvimento de ensaios clínicos.