Caracterização fenotípica e sequenciamento do genoma de Leptospira kirschneri isolada de caso clínico humano

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Cunha, Carlos Eduardo Pouey da
Data de Publicação: 2014
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPel - Guaiaca
Texto Completo: http://repositorio.ufpel.edu.br/handle/prefix/3729
Resumo: A leptospirose é uma zoonose negligenciada difundida mundialmente com mais de 800.000 casos em humanos por ano. A doença é causada por espiroquetas patogênicas do gênero Leptospira, classificadas em 10 espécies e mais de 260 sorovares, agrupados em mais de 30 sorogrupos. As principais espécies responsáveis por casos de leptospirose humana são L. interrogans, L. borgpetersenii e L. kirschneri. No Brasil, onde os climas tropical e subtropical favorecem a disseminação da doença, a maioria dos casos é causada por L. interrogans sorogrupo Icterohaemorrhagiae. Apesar de Pelotas apresentar um clima temperado, a taxa de infecções por Leptospira (10 casos por 100 mil habitantes) é superior a regiões com climas tropical e subtropical (3.5 casos por 100 mil habitantes). Trabalhos de vigilância em leptospirose desempenham papel fundamental no combate à doença identificado espécies e sorovares endêmicos a determinada região. Este trabalho descreve o isolamento e caracterização de uma cepa de Leptospira de uma paciente da zona rural de Pelotas que relatou contato com coleções hídricas, bovinos, caninos e roedores, e apresentou sintomas clássicos da fase aguda da doença. O isolado foi caracterizado como L. kirschneri sorogrupo Pomona sorovar Mozdok, conforme determinado por multilocus sequence typing (MLST). O genoma do isolado possui 3.398 sequencias codificadoras, 39 tRNAs, 1 região codificadora de rRNA e conteúdo G+C de 34,6%. O cromossomo I tem 3.738.643 pares de base, e o segundo, 335.634, totalizando 4,07 Mb. Imunofluorescência indireta mostrou a expressão dos fatores de virulência LipL32, LigA e LigB. O isolado foi capaz de causar danos severos aos tecidos renal, hepático e pulmonar, como revelado por histopatologia e a presença de leptospiras nesses tecidos confirmada pela técnica de imprint. Este é o primeiro relato de isolamento de L. kirschneri sorovar Mozdok de caso clínico humano no Hemisfério Sul, de acordo com a literatura disponível. Os resultados aqui apresentados são de grande importância epidemiológica, bem como para o desenvolvimento de novas vacinas e testes rápidos de diagnóstico.
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spelling 2017-10-23T11:07:43Z2017-10-23T11:07:43Z2014-10-24CUNHA, Carlos Eduardo Pouey da. Caracterização fenotípica e sequenciamento do genoma de Leptospira kirschneri isolada de caso clínico humano. 2014. 55f. Dissertação (Mestrado) - Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. Universidade Federal de Pelotas, Pelotas.http://repositorio.ufpel.edu.br/handle/prefix/3729A leptospirose é uma zoonose negligenciada difundida mundialmente com mais de 800.000 casos em humanos por ano. A doença é causada por espiroquetas patogênicas do gênero Leptospira, classificadas em 10 espécies e mais de 260 sorovares, agrupados em mais de 30 sorogrupos. As principais espécies responsáveis por casos de leptospirose humana são L. interrogans, L. borgpetersenii e L. kirschneri. No Brasil, onde os climas tropical e subtropical favorecem a disseminação da doença, a maioria dos casos é causada por L. interrogans sorogrupo Icterohaemorrhagiae. Apesar de Pelotas apresentar um clima temperado, a taxa de infecções por Leptospira (10 casos por 100 mil habitantes) é superior a regiões com climas tropical e subtropical (3.5 casos por 100 mil habitantes). Trabalhos de vigilância em leptospirose desempenham papel fundamental no combate à doença identificado espécies e sorovares endêmicos a determinada região. Este trabalho descreve o isolamento e caracterização de uma cepa de Leptospira de uma paciente da zona rural de Pelotas que relatou contato com coleções hídricas, bovinos, caninos e roedores, e apresentou sintomas clássicos da fase aguda da doença. O isolado foi caracterizado como L. kirschneri sorogrupo Pomona sorovar Mozdok, conforme determinado por multilocus sequence typing (MLST). O genoma do isolado possui 3.398 sequencias codificadoras, 39 tRNAs, 1 região codificadora de rRNA e conteúdo G+C de 34,6%. O cromossomo I tem 3.738.643 pares de base, e o segundo, 335.634, totalizando 4,07 Mb. 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L. interrogans serogroup Icterohaemorrhagiae causes the majority of human leptospirosis cases in Brazil, where the tropical and subtropical climates favour the spread of the disease. Even though the climate in Pelotas is temperate, Leptospira infection rates (10 cases per 100 thousand inhabitants) are higher than other regions with tropical and subtropical climates (3.5 cases per 100 thousand inhabitants). Leptospirosis surveillance studies play a vital role against the disease through the identification of endemic species and sorovars to a given region. This work describes the characterization of a Leptospira strain isolated from an inhabitant of the rural area of Pelotas. The patient reported contact with water, cattle, dogs and rodents and presented classical symptomatology for leptospirosis. Multilocus sequence typing (MLST) determined the isolate to be a L. kirschneri serogroup Pomona serovar Mozdok. The genome of the isolate includes of 3,398 coding sequences, 39 tRNAs, 1 rRNA coding region and 34.6% G+C content. Chromosome I has 3,738,643 base pairs, and chromosome II has 335,634 base pairs, totalizing 4.07 Mb. Indirect immunofluorescence showed the expression of LigA and LigB virulence factors as well as the LipL32 protein. The isolate was capable of causing severe renal, hepatic and lung damage, as revealed by histopathological analysis and the presence of leptospiras in these tissues was confirmed by the imprint technique. This is the first report of isolation of L. kirschneri serovar Mozdok from a human patient in the Southern Hemisphere, according to the literature. Results presented herein are important for epidemiologic studies, as well as for the development of new vaccines and rapid diagnosis tests.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESporUniversidade Federal de PelotasPrograma de Pós-Graduação em BiotecnologiaUFPelBrasilCentro de Desenvolvimento TecnológicoCNPQ::OUTROSBiotecnologiaIsolamentoLeptospiraLeptospiroseVirulênciaIsolationLeptospiraLeptospirosisVirulenceCaracterização fenotípica e sequenciamento do genoma de Leptospira kirschneri isolada de caso clínico humanoPhenotypic characterization and genome sequencing of Leptospira interrogans isolated from a human case of leptospirosisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesishttp://lattes.cnpq.br/8041648706755768http://lattes.cnpq.br/4649853685495071McBride, Alan John Alexanderhttp://lattes.cnpq.br/2992146566426154Dellagostin, Odir AntônioCunha, Carlos Eduardo Pouey dainfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFPel - Guaiacainstname:Universidade Federal de Pelotas (UFPEL)instacron:UFPELTEXTdissertacao_carlos_eduardo_pouey_da_cunha (2).pdf.txtdissertacao_carlos_eduardo_pouey_da_cunha (2).pdf.txtExtracted texttext/plain124369http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/3729/6/dissertacao_carlos_eduardo_pouey_da_cunha%20%282%29.pdf.txt294ea752a91869e9a5854bdde9688bbbMD56open accessTHUMBNAILdissertacao_carlos_eduardo_pouey_da_cunha (2).pdf.jpgdissertacao_carlos_eduardo_pouey_da_cunha (2).pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1325http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/3729/7/dissertacao_carlos_eduardo_pouey_da_cunha%20%282%29.pdf.jpgf777b8a1ef561c94b1055c9da9fc8686MD57open accessORIGINALdissertacao_carlos_eduardo_pouey_da_cunha (2).pdfdissertacao_carlos_eduardo_pouey_da_cunha (2).pdfapplication/pdf934243http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/3729/1/dissertacao_carlos_eduardo_pouey_da_cunha%20%282%29.pdf07247a5a64f709717d8bc06370d25dc7MD51open accessCC-LICENSElicense_urllicense_urltext/plain; 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