Purificação e propriedades da gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase de músculo de Anas sp (pato)
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Data de Publicação: | 1985 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
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Texto Completo: | https://hdl.handle.net/1884/64699 |
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Barbosa, Valma MartinsNakano, Momoyo SatoUniversidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Ciências (Bioquímica)2019-12-10T17:34:17Z2019-12-10T17:34:17Z1985https://hdl.handle.net/1884/64699Orientadora: Dra. Momoyo Sato NakanoDissertação (mestrado) -Universidade Federal do Paraná, Curso de Pós-Graduação em BioquímicaInclui referências: p. 50-57Resumo: A gliceraldeido-3-fosfato desidrogenase (EC 1.2.1.12) de musculo de Anas sp (pato) foi purificada pelo método de Cori et a l (15), com algumas modificações. A enzima foi demonstrada ser pura por eletroforese em gel de poliacrilamida na presença e ausência de SDS e por eletroforese de zona em fitas de poliacetato de celulose. O peso molecular foi estimado em 140.000 para a enzima nativa e 36.000 para os monômeros. O pH ótimo encontrado foi de 8,2. Os valores de Km foram determinados para o gliceraldeido-3-fosfato e para o NAD sendo em torno de 240 yM e 80 yM, respectivamente. Foi demonstrado que o NADH é um inibidor competitivo em relação ao NAD, sendo o Ki de 17 yM. A adição de metais [2.10-3M] como Mg++ , Mn++ e Ca++ não alteraram significativamente a atividade de GPDH, enquanto Hg++, Cu++ e Zn++ inibiram totalmente a enzima. A titulação de grupos-SH com Nbs2 indicou 12,7 grupos-SH por mol de enzima mas apenas 4 são essencialmente reativos por tetrâmero de enzima. Dos reagentes sulfidrilas testados, o p-hidroxi-mercuribenzoato e o p-cloromercuribenzoato demonstraram ser potentes inibidores, mas a inibição foi totalmente revertida com a adição subsequente de excesso de 2-mercaptoetanol. A validade dos dados cinéticos foi analisada através de programas em linguagem BASIC.57 f. : il., grafs., tabs.application/pdfDisponível em formato digitalBioquímicaPurificação e propriedades da gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase de músculo de Anas sp (pato)info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALD - VALMA MARTINS BARBOSA.pdfapplication/pdf2278650https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/64699/1/D%20-%20VALMA%20MARTINS%20BARBOSA.pdf28854b5e908fff8e219cde2140be28faMD51open access1884/646992019-12-10 14:34:17.723open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/64699Repositório de PublicaçõesPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestopendoar:3082019-12-10T17:34:17Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false |
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