Nocaute de proteínas positivamente reguladas nas fases iniciais da metaciclogênese de Trypanosoma cruzi provoca a diminuição da capacidade proliferativa e de diferenciação do parasita

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Santana, Sibelle Sell
Data de Publicação: 2014
Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFPR
Texto Completo: https://hdl.handle.net/1884/35697
Resumo: Orientadora: Lyris Martins Franco de Godoy
id UFPR_a27aa2e65628921f10b64ade82ae4cb9
oai_identifier_str oai:acervodigital.ufpr.br:1884/35697
network_acronym_str UFPR
network_name_str Repositório Institucional da UFPR
repository_id_str 308
spelling Santana, Sibelle SellMendonça, Márcia Helena, 1960-Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Curso de Graduação em Ciências BiológicasGodoy, Lyris Martins Franco de2022-09-15T18:23:52Z2022-09-15T18:23:52Z2014https://hdl.handle.net/1884/35697Orientadora: Lyris Martins Franco de GodoyCoorientadora: Márcia Helena MendonçaMonografia (Bacharelado) - Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Curso de Graduação em Ciências BiológicasResumo : A Doença de Chagas, causada pelo protozoário flagelado Trypanosoma cruzi, ocorre na América Central e do Sul. Estima-se que 16 a 18 milhões de pessoas estão acometidas por esta patologia, sendo responsável por 21 mil de mortes a cada ano. Até o presente momento não há vacina ou medicamento eficiente para a sua fase crônica. O T. cruzi possui um ciclo de vida complexo, com um hospedeiro invertebrado e um hospedeiro mamífero, incluindo o homem. É na porção final do tubo digestivo do inseto que ocorre a metaciclogênese, com a diferenciação do T. cruzi de uma forma replicativa e não-infectiva (epimastigota) para uma forma infectiva e não-replicativa (tripomastigota metacíclico). Tal processo envolve alterações na expressão de diferentes genes associados com a aquisição de infectividade e virulência pelo parasita. O presente trabalho objetivou, inicialmente, a construção de cassetes de nocaute gênico, obtenção de parasitas nocaute e realização de ensaios funcionais preliminares (viabilidade celular, capacidade de proliferação e diferenciação) para quatro proteínas diferencialmente expressas durante a metaciclogênese de T. cruzi, além da pesquisa em bancos de dados e do uso de ferramentas bioinformáticas para o levantamento de domínios estruturais e informações funcionais disponíveis para as mesmas. Duas proteínas, anotadas como hipotéticas conservadas, não possuem nenhuma indicação funcional; outra tem função putativa de diidrolipoamida desidrogenase; e a última proteína, apesar de anotada como hipotética conservada, possui domínios de ligação e reconhecimento de RNA eucariótico. Análises bioinformáticas indicaram que os genes codificadores das proteínas estudadas seriam de cópia única no genoma, tornando-as passíveis de depleção por nocaute gênico. Para todas as proteínas estudadas, foram construídos cassetes de nocaute gênico para os dois alelos (quatro cassetes contendo NEO e quatro cassetes contendo HIGRO). Foram obtidos parasitas nocaute simples viáveis para as quatro proteínas. Entretanto, em função do tempo viável para execução do projeto, as demais etapas do trabalho foram direcionadas para apenas duas proteínas. Para esses dois nocautes simples foram realizados ensaios funcionais preliminares, os quais apontaram redução na capacidade proliferativa e de diferenciação e; obtidos parasitas duplos transfectantes, os quais também se apresentaram viáveis. Objetivando isolar populações clonais para estudos mais aprofundados, realizou-se o Cell Sorting em placas de 96 poços. Para uma das proteínas foram obtidas 61 colônias, enquanto para a segunda foram obtidas 72 colônias. Experimentos iniciais para confirmação do duplo nocaute dos genes de interesse demonstraram que, para a primeira proteína, apesar de confirmada a inserção dos cassetes de nocaute para os dois alelos, houve a amplificação da CDS do gene de interesse e assim, não se verificou a obtenção de nocaute duplo. Já para a segunda proteína foram observadas cinco colônias sem amplificação da CDS do gene de interesse e, assim, acredita-se que houve a obtenção de parasitas duplo nocaute. Em síntese, o presente trabalho resultou na produção de cassetes para nocaute gênico de quatro proteínas possivelmente envolvidas no processo de metaciclogênese de T. cruzi, bem como de cepas nocaute do parasita para duas delas, as quais apresentaram diminuição na capacidade de proliferação e de diferenciação. Essas cepas são de grande importância para a caracterização funcional das proteínas.1 recurso online : PDF.application/pdfExigências do sistema: Adobe Acrobat ReaderTrypanosoma cruziProteínasNocaute de proteínas positivamente reguladas nas fases iniciais da metaciclogênese de Trypanosoma cruzi provoca a diminuição da capacidade proliferativa e de diferenciação do parasitainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALMONOGRAFIA SIBELLE SELL SANTANA.pdfapplication/pdf3455156https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/35697/1/MONOGRAFIA%20SIBELLE%20SELL%20SANTANA.pdf4829ff4daeaa13c9f4ae652c14977e0eMD51open accessTEXTMONOGRAFIA SIBELLE SELL SANTANA.pdf.txtExtracted Texttext/plain138232https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/35697/2/MONOGRAFIA%20SIBELLE%20SELL%20SANTANA.pdf.txteed24a4c6750f25abfece938f85e5edcMD52open accessTHUMBNAILMONOGRAFIA SIBELLE SELL SANTANA.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1266https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/35697/3/MONOGRAFIA%20SIBELLE%20SELL%20SANTANA.pdf.jpgd77d5f20d208365d6afbe8d995165aacMD53open access1884/356972022-09-15 15:23:52.317open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/35697Repositório de PublicaçõesPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestopendoar:3082022-09-15T18:23:52Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false
dc.title.pt_BR.fl_str_mv Nocaute de proteínas positivamente reguladas nas fases iniciais da metaciclogênese de Trypanosoma cruzi provoca a diminuição da capacidade proliferativa e de diferenciação do parasita
title Nocaute de proteínas positivamente reguladas nas fases iniciais da metaciclogênese de Trypanosoma cruzi provoca a diminuição da capacidade proliferativa e de diferenciação do parasita
spellingShingle Nocaute de proteínas positivamente reguladas nas fases iniciais da metaciclogênese de Trypanosoma cruzi provoca a diminuição da capacidade proliferativa e de diferenciação do parasita
Santana, Sibelle Sell
Trypanosoma cruzi
Proteínas
title_short Nocaute de proteínas positivamente reguladas nas fases iniciais da metaciclogênese de Trypanosoma cruzi provoca a diminuição da capacidade proliferativa e de diferenciação do parasita
title_full Nocaute de proteínas positivamente reguladas nas fases iniciais da metaciclogênese de Trypanosoma cruzi provoca a diminuição da capacidade proliferativa e de diferenciação do parasita
title_fullStr Nocaute de proteínas positivamente reguladas nas fases iniciais da metaciclogênese de Trypanosoma cruzi provoca a diminuição da capacidade proliferativa e de diferenciação do parasita
title_full_unstemmed Nocaute de proteínas positivamente reguladas nas fases iniciais da metaciclogênese de Trypanosoma cruzi provoca a diminuição da capacidade proliferativa e de diferenciação do parasita
title_sort Nocaute de proteínas positivamente reguladas nas fases iniciais da metaciclogênese de Trypanosoma cruzi provoca a diminuição da capacidade proliferativa e de diferenciação do parasita
author Santana, Sibelle Sell
author_facet Santana, Sibelle Sell
author_role author
dc.contributor.other.pt_BR.fl_str_mv Mendonça, Márcia Helena, 1960-
Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Curso de Graduação em Ciências Biológicas
dc.contributor.author.fl_str_mv Santana, Sibelle Sell
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv Godoy, Lyris Martins Franco de
contributor_str_mv Godoy, Lyris Martins Franco de
dc.subject.por.fl_str_mv Trypanosoma cruzi
Proteínas
topic Trypanosoma cruzi
Proteínas
description Orientadora: Lyris Martins Franco de Godoy
publishDate 2014
dc.date.issued.fl_str_mv 2014
dc.date.accessioned.fl_str_mv 2022-09-15T18:23:52Z
dc.date.available.fl_str_mv 2022-09-15T18:23:52Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/bachelorThesis
format bachelorThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv https://hdl.handle.net/1884/35697
url https://hdl.handle.net/1884/35697
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.relation.requires.pt_BR.fl_str_mv Exigências do sistema: Adobe Acrobat Reader
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv 1 recurso online : PDF.
application/pdf
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da UFPR
instname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)
instacron:UFPR
instname_str Universidade Federal do Paraná (UFPR)
instacron_str UFPR
institution UFPR
reponame_str Repositório Institucional da UFPR
collection Repositório Institucional da UFPR
bitstream.url.fl_str_mv https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/35697/1/MONOGRAFIA%20SIBELLE%20SELL%20SANTANA.pdf
https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/35697/2/MONOGRAFIA%20SIBELLE%20SELL%20SANTANA.pdf.txt
https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/35697/3/MONOGRAFIA%20SIBELLE%20SELL%20SANTANA.pdf.jpg
bitstream.checksum.fl_str_mv 4829ff4daeaa13c9f4ae652c14977e0e
eed24a4c6750f25abfece938f85e5edc
d77d5f20d208365d6afbe8d995165aac
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv MD5
MD5
MD5
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)
repository.mail.fl_str_mv
_version_ 1801860357340266496

Registros relacionados