Trans-sialidase recombinante de Trypanosoma cruzi e parasitos nocautes para trans-sialidases como modelos de vacinas para doença de chagas

• Autor(a) principal: Nailma Silva Aprigio dos Santos
• Data de Publicação: 2020
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/59936
• topic: Trans-sialidase; Trypanosoma cruzi; Bioquímica e imunologia; Doença de Chagas; Trypanosoma cruzi; Neuraminidase

As trans-sialidases (TS) são proteínas de superfície codificadas por uma família multigênica com mais de 1400 cópias presentes no genoma do parasito Trypanosoma cruzi. Os membros dessa família foram classificados em oito grupos, sendo os membros do grupo I, alvos do nosso estudo, aqueles que incluem as trans-sialidases com atividade enzimática e repetições de 12 aminoácidos na porção C-terminal da proteína, denominadas SAPA (Shed Acute Phase Antigen). A função das TS é transferir ácido siálico de glicoconjugados do hospedeiro para proteínas do tipo mucinas também presentes na superfície do parasito. Essa atividade pode estar relacionada com a virulência do parasito, pois estudos indicam que estaria envolvida com a invasão da célula hospedeira e evasão do sistema imune. Foi demonstrado também que as repetições SAPA presentes na porção C-terminal de algumas TS, além de direcionar a resposta imune humoral contra essa região da proteína, é capaz de aumentar a meia vida da enzima no sangue. Proteínas da família das transsialidases são largamente exploradas em estudos de vacina para a doença de Chagas, mostrando serem promissoras como antígenos vacinais. No nosso estudo, testamos um membro da família das trans-sialidases que possui o sítio ativo e 19 repetições SAPA, em ensaios de imunização utilizando versões recombinantes dessa proteína com e sem repetições SAPA. Após imunização de camundongos com cada proteína e desafio com uma cepa virulenta do parasito foi a parasitemia nos animais foi avaliada. A maior redução na parasitemia foi observada nos animais imunizados com a proteína que não contém as repetições SAPA. Paralelamente, foi testada uma segunda estratégia de vacina para a doença de Chagas, utilizando parasitos nocautes para os genes das TS ativas gerados por meio da tecnologia CRISPR-Cas9. Além de demonstrar a ausência de infectividade pelos parasitos nocautes, a imunização de camundongos com esses parasitos foi capaz de conferir 100% de proteção contra o desafio por uma cepa virulenta do T. cruzi. Assim, além do estudo com a proteína TS recombinante, uma formulação contendo parasitos atenuados vivos mostrou-se promissora para o desenvolvimento de uma vacina para a doença de Chagas.