Efeito do pH sobre a estabilidade da atividade antitríptica do inibidor de tripsina isolado de sementes de tamarindo nanoencapsulado

• Autor(a) principal: Silva, Eloyse Mikaelly de Souza
• Data de Publicação: 2022
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFRN
• Texto Completo: https://repositorio.ufrn.br/handle/123456789/50405
• topic: CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::NUTRICAO::BIOQUIMICA DA NUTRICAO; Inibidores de proteases; Protease inhibitors; Nanopartículas; Nanoparticles; Tamarindus; Tamarindus; Técnicas in Vitro; In vitro techniques

O inibidor de tripsina isolado das sementes de tamarindo (Tamarindus indica L.) (ITT) nanoencapsulado em quitosana e proteína isolada do soro do leite (EQPI) tem potencializado os efeitos do ITT em relação à atividade antitríptica e o pH é uma característica que pode influenciar na eficiência e na liberação da partícula. Diante disso, visando uma melhor compreensão sobre as características do EQPI e fatores que podem interferir na sua ação, este estudo teve como objetivo avaliar o efeito do pH sobre a estabilidade da atividade antitríptica do EQPI comparada ao ITT. O ITT foi extraído das sementes de tamarindo, isolado por cromatografia de afinidade Tripsina-Sepharose 4B CNBr-ativada e caracterizado quanto a atividade antitríptica, quantificação proteíca e massa molecular. As nanopartículas foram obtidas por meio da técnica de nanoprecipitação em solvente orgânico, utilizando como agentes encapsulantes a quitosana (QP) e proteína isolada do soro do leite (PI) na proporção 1:2:2 p/p e, em seguida, foram caracterizadas quanto à morfologia por meio da Microscopia eletrônica de varredura (MEV) e eficiência da incorporação das do ITT determinada pela atividade antitríptica do EQPI. Para a avaliação da influência do pH na estabilidade da atividade do inibidor encapsulado as nanopartículas e o ITT foram submetidos a diferentes condições de pH (3,0 e 7,0), simulando as condições de digestão. O comportamento do EQPI e ITT, expostos às condições de pH, foi monitorado conforme atividade antitríptica, utilizando-se como controles, sem passar pelas exposições de pH, ITT (1,4 mg/mL), EQPI (7,0 mg/mL) e ITT extraído de EQPI (ITText) (7,0 mg/mL). Como resultado, foi observado que o ITT isolado apresentou 98,56% (533,03 UI) de atividade antitríptica e massa molecular de aproximadamente 20kDa. O ITT nanoencapsulado apresentou aspecto morfológico globoso, esférico e liso, 95,57% de eficiência de encapsulação (EE) e não apresentou atividade antitríptica. Contudo, quando exposto a condições de liberação do ativo o ITText, apresentou 98,21% de atividade antitríptica. Nas condições de pH da oral, gástrica e intestinal, os percentuais de inibição de EQPI foram, respectivamente, de 0% (2 min.), 44,07% (2h) e 20,10% (2h), enquanto para ITT foram de 92,27%, 94,11% e 94,06%. Portanto, conclui-se que o ITT foi isolado e, ao ser nanoencapsulado, apresentou-se protegido o que garante uma liberação gradual em locais específicos do TGI. Considerando a estabilidade da atividade antitríptica frente ao pH 7,0 e liberação no pH 3,0, o EQPI se apresenta como uma partícula interessante para aplicação em produtos farmacêuticos, considerando as bioatividades já atribuídas ao ITT e por sua ação no trato gastrointestinal.