Aplicação do método da Reação em Cadeia da Polimerase quantitativa (qPCR) na identificação de Weissella viridescens

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Marques, Fernanda Cunha
Data de Publicação: 2017
Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFSC
Texto Completo: https://repositorio.ufsc.br/xmlui/handle/123456789/177907
Resumo: TCC (graduação) - Universidade Federal de Santa Catarina. Centro Tecnológico. Engenharia de Alimentos.
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spelling Aplicação do método da Reação em Cadeia da Polimerase quantitativa (qPCR) na identificação de Weissella viridescensBactérias ácido lácticas, Weissella viridescens, deterioração, reação em cadeia da polimerase quantitativa, microbiologia preditiva.TCC (graduação) - Universidade Federal de Santa Catarina. Centro Tecnológico. Engenharia de Alimentos.As Bactérias Ácido Lácticas (BAL) são um grupo microbiano deteriorante de produtos cárneos embalados a vácuo que podem causar o inchaço da embalagem e aparecimento de limo, dentre elas Weissella viridescens pode causar o esverdeamento na superfície do produto. Este trabalho tem como objetivo principal utilizar o método de quantitative PCR (qPCR) para identificação de Weissella viridescens em cultura pura. Ao longo desse trabalho foi desenvolvida uma metodologia para a identificação do DNA isolado de W. viridescens. Diluições seriadas do DNA foram utilizadas para amplificação por SYBR® Green qPCR e construção da curva padrão, correlacionando os valores de Ciclo threshold (Ct) versus log UFC/mL obtidos por contagem em placas. A curva padrão foi gerada com eficiência (E) de 1,12 e R2 de 0,9979. O limite de detecção (LD) correspondeu a 3,7 log UFC/mL de W. viridescens, o que corresponde a 32,5 fg de DNA e um Ct de 26,75 ± 0,5. A especificidade da reação utilizando o corante de SYBR® Green I foi comprovada pela curva de melting, através da geração de apenas um pico de temperatura de melting (Tm) com o valor de 81,4 ± 0,08 °C. Assim, foi possível identificar W. viridescens em meio de cultivo na condição isotérmica de 30 °C utilizando o método de SYBR® Green qPCR. Espera-se, com este estudo, a definição das melhores condições para quantificação da biomassa de W. viridescens, em meio de cultura. Estes resultados servirão de base para estudos futuros do grupo de microbiologia preditiva, para identificação e quantificação de W. viridescens em produtos cárneos.Florianópolis, SCAragão, Gláucia Maria Falcão deMartins, Wiaslan FigueiredoUniversidade Federal de Santa CatarinaMarques, Fernanda Cunha2017-08-01T14:35:16Z2017-08-01T14:35:16Z2017-08-01info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesis53application/pdfhttps://repositorio.ufsc.br/xmlui/handle/123456789/177907porreponame:Repositório Institucional da UFSCinstname:Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC)instacron:UFSCinfo:eu-repo/semantics/openAccess2017-08-01T14:35:16Zoai:repositorio.ufsc.br:123456789/177907Repositório InstitucionalPUBhttp://150.162.242.35/oai/requestopendoar:23732017-08-01T14:35:16Repositório Institucional da UFSC - Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC)false
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