Análise de microRNAs exossomais como potenciais biomarcadores precoces da Lesão Renal Aguda induzida por lipopolissacarídeo em ratos

• Autor(a) principal: Silva, Carolina Carvalho Serres Da [UNIFESP]
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNIFESP
• Texto Completo: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=8133044; https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/60064
• topic: Lesão Renal Aguda; Sepse; microRNAs; Lipopolissacarídeos; Exossomos; Acute Kidney Injury; Sepsis; microRNAs; Lipopolysaccharides; Exosomes

A lesão renal aguda (LRA) consiste na redução abrupta da taxa de filtração glomerular evidenciada pelo aumento de creatinina sérica e/ou redução do débito urinário, comprometendo o equilíbrio hidroeletrolítico e a depuração de escórias nitrogenadas. A causa é multifatorial, e a sepse contribui para a alta prevalência de LRA. Sabe–se que o desenvolvimento e o atraso na identificação da LRA constituem fator de risco para cronicidade. Dessa forma, sua detecção precoce é imprescindível para a tomada de medidas em momento mais oportuno. Uma vez que a creatinina sérica não constitui marcador de disfunção renal ideal, pois sua alteração é detectada tardiamente nas afecções, os microRNAs (miRs), classe de RNAs não codificantes, responsáveis pela regulação gênica, podem constituir ferramentas promissoras para uma abordagem mais precoce da LRA. Esta classe de moléculas pode ser encontrada em fluidos biológicos, no interior de vesículas, tais como, exossomos e microvesículas. Objetivo: Avaliar potenciais miRs que podem ser utilizados como biomarcadores precoces na LRA induzida por sepse. Métodos: Foram utilizados ratos machos Wistar com 12 semanas, submetidos a administração de lipopolissacarídeos (LPS), via intraperitoneal, na dose de 7,5 mg/kg. A função renal foi inicialmente avaliada pela creatinina sérica, com alteração detectada 4h após a administração da droga. Afim de avaliar se os miRs poderiam atuar como biomarcadores precoces, a coleta de amostras de sangue ocorreu antes (controle) e 2h após a administração de LPS, e, portanto, antes da elevação da creatinina. Exossomos presentes no soro foram isolados e os miRs totais extraídos para avaliação do perfil gênico pela técnica de PCR array. Possíveis alterações nos miRs foram comparadas à elevação do NGAL sérico para validação. Resultados: Entre todos os miRs avaliados, apenas o miR-181a-5p e o miR-23b-3p apresentaram expressão significantemente elevada 2 h após a administração do LPS comparada ao período controle (p<0,05), quando o nível de NGAL também apresentou aumento significante. Avaliação por bioinformática mostrou que esses miRs possuem como alvos moléculas associadas à carcinogênese e à fatores de transcrição relacionados à citocinas pró-inflamatórias Conclusão: Considerando-se que o LPS ativa fatores de transcrição, levando à produção de citocinas pró-inflamatórias, possíveis alterações prévias nos níveis séricos do miR-181a-5p poderão definir precocemente a LRA induzida por sepse.