Efeito de uma fosfolipase A2 básica isolada da peçonha de Bothropoides pauloensis (Bothrops pauloensis) sobre formas promastigota de Leishmania (Leishmania) amazonensis

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Nunes, Débora Cristina de Oliveira
Data de Publicação: 2011
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFU
Texto Completo: https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/15853
Resumo: CHAPTER 2: Leishmaniasis is a group of diseases caused by protozoa of Leishmania genus. The currently available treatment for this disease presents high toxicity and cost, parasite resistance, and difficulties of healing. In this sense, the development of new strategies for treatment of leishmaniasis is indispensable and snake venoms appear as an important natural source of pharmacologically active biomolecules. The aim of this study was assess effects of a phospholipase A2 (BnSP-7) catalytically inactive, from Bothropoides pauloensis snake venom, on Leishmania (Leishmania) amazonensis. BnSP-7 presented activity against promastigote forms of parasite, both MTT assay, with percentage of cell viability around 60% to 200μg/mL of toxin, and growth curve, inhibiting 60-70% of parasite proliferation at concentrations of 50-200 μg/mL of toxin after 72h of treatment. Ultrastructural studies in promastigotes treated with BnSP-7 revealed mitochondrial swelling, nuclear alteration, vacuolization, acidocalcisomes presence, multiflagelar aspect and blebbing effect in plasma membrane. SDS-PAGE preliminary analysis showed that toxin seems to alter the parasite protein profile. Finally, BnSP-7 interfered with infective capacity of promastigote in murine peritoneal macrophages, causing statistically significant reductions (p < 0.05) of approximately 20-30% for toxin concentrations tested (25-200 μg/mL). Culture supernatants of infected macrophages for 72h with toxin treatedparasites presented increased production of TNF-α, reduction of IL-10 and slight increase of nitric oxide. These data suggest that the BnSP-7 is an important tool for discovery of new targets in the parasite that can be exploited for development of new drugs for leishmaniasis treatment.
id UFU_266992e187c872ea02ddc3f50a8e3067
oai_identifier_str oai:repositorio.ufu.br:123456789/15853
network_acronym_str UFU
network_name_str Repositório Institucional da UFU
repository_id_str
spelling 2016-06-22T18:43:47Z2012-02-142016-06-22T18:43:47Z2011-07-26NUNES, Débora Cristina de Oliveira. Efeito de uma fosfolipase A2 básica isolada da peçonha de Bothropoides pauloensis (Bothrops pauloensis) sobre formas promastigota de Leishmania (Leishmania) amazonensis. 2011. 93 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2011.https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/15853CHAPTER 2: Leishmaniasis is a group of diseases caused by protozoa of Leishmania genus. The currently available treatment for this disease presents high toxicity and cost, parasite resistance, and difficulties of healing. In this sense, the development of new strategies for treatment of leishmaniasis is indispensable and snake venoms appear as an important natural source of pharmacologically active biomolecules. The aim of this study was assess effects of a phospholipase A2 (BnSP-7) catalytically inactive, from Bothropoides pauloensis snake venom, on Leishmania (Leishmania) amazonensis. BnSP-7 presented activity against promastigote forms of parasite, both MTT assay, with percentage of cell viability around 60% to 200μg/mL of toxin, and growth curve, inhibiting 60-70% of parasite proliferation at concentrations of 50-200 μg/mL of toxin after 72h of treatment. Ultrastructural studies in promastigotes treated with BnSP-7 revealed mitochondrial swelling, nuclear alteration, vacuolization, acidocalcisomes presence, multiflagelar aspect and blebbing effect in plasma membrane. SDS-PAGE preliminary analysis showed that toxin seems to alter the parasite protein profile. Finally, BnSP-7 interfered with infective capacity of promastigote in murine peritoneal macrophages, causing statistically significant reductions (p < 0.05) of approximately 20-30% for toxin concentrations tested (25-200 μg/mL). Culture supernatants of infected macrophages for 72h with toxin treatedparasites presented increased production of TNF-α, reduction of IL-10 and slight increase of nitric oxide. These data suggest that the BnSP-7 is an important tool for discovery of new targets in the parasite that can be exploited for development of new drugs for leishmaniasis treatment.CAPÍTULO 2: A leishmaniose é um grupo de doenças causadas por protozoários do gênero Leishmania. O tratamento disponível atualmente para esta doença apresenta alta toxicidade, elevado custo, resistência do parasito, além de dificuldades de cura. Nesse sentido, o desenvolvimento de novas estratégias de tratamento da leishmaniose torna-se indispensável e as peçonhas de serpente aparecem como importante fonte natural de biomoléculas farmacologicamente ativas. O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos de uma fosfolipase A2 (BnSP-7) cataliticamente inativa, da serpente Bothropoides pauloensis, sobre Leishmania (Leishmania) amazonensis. BnSP-7 apresentou atividade contra as formas promastigota do parasito, tanto no teste de MTT, com percentual de viabilidade celular em torno de 60% para 200μg/mL de toxina, quanto na curva de crescimento, inibindo 60-70% da proliferação do parasito nas concentrações de 50-200 μg/mL da toxina após 72 horas de tratamento. Estudos ultraestruturais em promastigotas tratados com BnSP-7 revelaram inchaço mitocondrial, alteração nuclear, vacuolização, presença de acidocalcisomas, aspecto multiflagelar e efeito de blebbing na membrana plasmática. Análises preliminares por SDS-PAGE mostraram que a toxina parece alterar o perfil protéico do parasito. Finalmente, BnSP-7 interferiu com a capacidade infectiva do promastigota em macrófagos peritoneais murinos, causando reduções estatisticamente significativas (p < 0,05) de aproximadamente 20-30% para as concentrações de toxina ensaiadas (25-200 μg/mL). Sobrenadantes de cultura de macrófagos infectados por 72 horas com parasitos tratados com a toxina apresentaram produção aumentada de TNFα, redução de IL-10 e discreto aumento de óxido nítrico. Tais dados sugerem que a BnSP-7 é uma importante ferramenta para a descoberta de novos alvos no parasito que possam ser explorados para o desenvolvimento de novas drogas para a terapêutica da leishmaniose.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível SuperiorMestre em Genética e Bioquímicaapplication/pdfporUniversidade Federal de UberlândiaPrograma de Pós-graduação em Genética e BioquímicaUFUBRCiências BiológicasFosfolipase A2 básicaBothropoides pauloensisCitotoxicidadeLeishmania (Leishmania) amazonensisSerpente peçonhentaBioquímicaSerpente peçonhenta - PeçonhaBasic phospholipase A2CytotoxicityLeishmania (Leishmania) amazonensisCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::GENETICAEfeito de uma fosfolipase A2 básica isolada da peçonha de Bothropoides pauloensis (Bothrops pauloensis) sobre formas promastigota de Leishmania (Leishmania) amazonensisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisÁvila, Veridiana de Melo Rodrigueshttp://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4720590E9Tudini, Kelly Aparecida Geraldo Yoneyamahttp://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4764391E8Souza, Maria Aparecida dehttp://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4762379E9Beletti, Marcelo Emíliohttp://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4703947D5http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4266968P8Nunes, Débora Cristina de Oliveirainfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFUinstname:Universidade Federal de Uberlândia (UFU)instacron:UFUTHUMBNAILd.pdf.jpgd.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1384https://repositorio.ufu.br/bitstream/123456789/15853/3/d.pdf.jpg7be2c2783be4ebf7b8f3a6ce40d036f5MD53ORIGINALd.pdfapplication/pdf3226666https://repositorio.ufu.br/bitstream/123456789/15853/1/d.pdfafd772a8bc094b2e2290aa9d092c81e9MD51TEXTd.pdf.txtd.pdf.txtExtracted texttext/plain148080https://repositorio.ufu.br/bitstream/123456789/15853/2/d.pdf.txt71b423cf0d5f5af3eec5cf86b68789ffMD52123456789/158532017-06-26 15:46:13.398oai:repositorio.ufu.br:123456789/15853Repositório InstitucionalONGhttp://repositorio.ufu.br/oai/requestdiinf@dirbi.ufu.bropendoar:2017-06-26T18:46:13Repositório Institucional da UFU - Universidade Federal de Uberlândia (UFU)false
dc.title.por.fl_str_mv Efeito de uma fosfolipase A2 básica isolada da peçonha de Bothropoides pauloensis (Bothrops pauloensis) sobre formas promastigota de Leishmania (Leishmania) amazonensis
title Efeito de uma fosfolipase A2 básica isolada da peçonha de Bothropoides pauloensis (Bothrops pauloensis) sobre formas promastigota de Leishmania (Leishmania) amazonensis
spellingShingle Efeito de uma fosfolipase A2 básica isolada da peçonha de Bothropoides pauloensis (Bothrops pauloensis) sobre formas promastigota de Leishmania (Leishmania) amazonensis
Nunes, Débora Cristina de Oliveira
Fosfolipase A2 básica
Bothropoides pauloensis
Citotoxicidade
Leishmania (Leishmania) amazonensis
Serpente peçonhenta
Bioquímica
Serpente peçonhenta - Peçonha
Basic phospholipase A2
Cytotoxicity
Leishmania (Leishmania) amazonensis
CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::GENETICA
title_short Efeito de uma fosfolipase A2 básica isolada da peçonha de Bothropoides pauloensis (Bothrops pauloensis) sobre formas promastigota de Leishmania (Leishmania) amazonensis
title_full Efeito de uma fosfolipase A2 básica isolada da peçonha de Bothropoides pauloensis (Bothrops pauloensis) sobre formas promastigota de Leishmania (Leishmania) amazonensis
title_fullStr Efeito de uma fosfolipase A2 básica isolada da peçonha de Bothropoides pauloensis (Bothrops pauloensis) sobre formas promastigota de Leishmania (Leishmania) amazonensis
title_full_unstemmed Efeito de uma fosfolipase A2 básica isolada da peçonha de Bothropoides pauloensis (Bothrops pauloensis) sobre formas promastigota de Leishmania (Leishmania) amazonensis
title_sort Efeito de uma fosfolipase A2 básica isolada da peçonha de Bothropoides pauloensis (Bothrops pauloensis) sobre formas promastigota de Leishmania (Leishmania) amazonensis
author Nunes, Débora Cristina de Oliveira
author_facet Nunes, Débora Cristina de Oliveira
author_role author
dc.contributor.advisor-co1.fl_str_mv Ávila, Veridiana de Melo Rodrigues
dc.contributor.advisor-co1Lattes.fl_str_mv http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4720590E9
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv Tudini, Kelly Aparecida Geraldo Yoneyama
dc.contributor.advisor1Lattes.fl_str_mv http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4764391E8
dc.contributor.referee1.fl_str_mv Souza, Maria Aparecida de
dc.contributor.referee1Lattes.fl_str_mv http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4762379E9
dc.contributor.referee2.fl_str_mv Beletti, Marcelo Emílio
dc.contributor.referee2Lattes.fl_str_mv http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4703947D5
dc.contributor.authorLattes.fl_str_mv http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4266968P8
dc.contributor.author.fl_str_mv Nunes, Débora Cristina de Oliveira
contributor_str_mv Ávila, Veridiana de Melo Rodrigues
Tudini, Kelly Aparecida Geraldo Yoneyama
Souza, Maria Aparecida de
Beletti, Marcelo Emílio
dc.subject.por.fl_str_mv Fosfolipase A2 básica
Bothropoides pauloensis
Citotoxicidade
Leishmania (Leishmania) amazonensis
Serpente peçonhenta
Bioquímica
Serpente peçonhenta - Peçonha
topic Fosfolipase A2 básica
Bothropoides pauloensis
Citotoxicidade
Leishmania (Leishmania) amazonensis
Serpente peçonhenta
Bioquímica
Serpente peçonhenta - Peçonha
Basic phospholipase A2
Cytotoxicity
Leishmania (Leishmania) amazonensis
CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::GENETICA
dc.subject.eng.fl_str_mv Basic phospholipase A2
Cytotoxicity
Leishmania (Leishmania) amazonensis
dc.subject.cnpq.fl_str_mv CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::GENETICA
description CHAPTER 2: Leishmaniasis is a group of diseases caused by protozoa of Leishmania genus. The currently available treatment for this disease presents high toxicity and cost, parasite resistance, and difficulties of healing. In this sense, the development of new strategies for treatment of leishmaniasis is indispensable and snake venoms appear as an important natural source of pharmacologically active biomolecules. The aim of this study was assess effects of a phospholipase A2 (BnSP-7) catalytically inactive, from Bothropoides pauloensis snake venom, on Leishmania (Leishmania) amazonensis. BnSP-7 presented activity against promastigote forms of parasite, both MTT assay, with percentage of cell viability around 60% to 200μg/mL of toxin, and growth curve, inhibiting 60-70% of parasite proliferation at concentrations of 50-200 μg/mL of toxin after 72h of treatment. Ultrastructural studies in promastigotes treated with BnSP-7 revealed mitochondrial swelling, nuclear alteration, vacuolization, acidocalcisomes presence, multiflagelar aspect and blebbing effect in plasma membrane. SDS-PAGE preliminary analysis showed that toxin seems to alter the parasite protein profile. Finally, BnSP-7 interfered with infective capacity of promastigote in murine peritoneal macrophages, causing statistically significant reductions (p < 0.05) of approximately 20-30% for toxin concentrations tested (25-200 μg/mL). Culture supernatants of infected macrophages for 72h with toxin treatedparasites presented increased production of TNF-α, reduction of IL-10 and slight increase of nitric oxide. These data suggest that the BnSP-7 is an important tool for discovery of new targets in the parasite that can be exploited for development of new drugs for leishmaniasis treatment.
publishDate 2011
dc.date.issued.fl_str_mv 2011-07-26
dc.date.available.fl_str_mv 2012-02-14
2016-06-22T18:43:47Z
dc.date.accessioned.fl_str_mv 2016-06-22T18:43:47Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.citation.fl_str_mv NUNES, Débora Cristina de Oliveira. Efeito de uma fosfolipase A2 básica isolada da peçonha de Bothropoides pauloensis (Bothrops pauloensis) sobre formas promastigota de Leishmania (Leishmania) amazonensis. 2011. 93 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2011.
dc.identifier.uri.fl_str_mv https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/15853
identifier_str_mv NUNES, Débora Cristina de Oliveira. Efeito de uma fosfolipase A2 básica isolada da peçonha de Bothropoides pauloensis (Bothrops pauloensis) sobre formas promastigota de Leishmania (Leishmania) amazonensis. 2011. 93 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2011.
url https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/15853
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
dc.publisher.none.fl_str_mv Universidade Federal de Uberlândia
dc.publisher.program.fl_str_mv Programa de Pós-graduação em Genética e Bioquímica
dc.publisher.initials.fl_str_mv UFU
dc.publisher.country.fl_str_mv BR
dc.publisher.department.fl_str_mv Ciências Biológicas
publisher.none.fl_str_mv Universidade Federal de Uberlândia
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da UFU
instname:Universidade Federal de Uberlândia (UFU)
instacron:UFU
instname_str Universidade Federal de Uberlândia (UFU)
instacron_str UFU
institution UFU
reponame_str Repositório Institucional da UFU
collection Repositório Institucional da UFU
bitstream.url.fl_str_mv https://repositorio.ufu.br/bitstream/123456789/15853/3/d.pdf.jpg
https://repositorio.ufu.br/bitstream/123456789/15853/1/d.pdf
https://repositorio.ufu.br/bitstream/123456789/15853/2/d.pdf.txt
bitstream.checksum.fl_str_mv 7be2c2783be4ebf7b8f3a6ce40d036f5
afd772a8bc094b2e2290aa9d092c81e9
71b423cf0d5f5af3eec5cf86b68789ff
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv MD5
MD5
MD5
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da UFU - Universidade Federal de Uberlândia (UFU)
repository.mail.fl_str_mv diinf@dirbi.ufu.br
_version_ 1802110529949401088