Otimiza??o da produ??o de amilases por Rhizopus arrhizus I 1.2.1 e hidr?lise do amido dos gr?os de milho

• Autor(a) principal: Lopes, Paulo Henrique Silva
• Data de Publicação: 2022
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFVJM
• Texto Completo: http://acervo.ufvjm.edu.br/jspui/handle/1/2997
• topic: Amilases; Fungos filamentosos; Milho; Amido; Amylases; Filamentous fungi; Corn; Starch

A hidr?lise do pol?mero de amido ? realizado pelo sistema amilol?tico, formando diferentes produtos de hidr?lise, como a glicose e a maltose. Essas enzimas s?o, principalmente, sintetizadas por microrganismos, em especial, fungos filamentosos, no entanto, ? necess?rio otimizar os processos de produ??o e uso das enzimas para tornar os processos de hidr?lise mais vi?veis. O objetivo desse trabalho foi otimizar a produ??o das amilases por Rhizopus arrhizus I 1.2.1 e caracterizar bioquimicamente as amilases, bem como realizar a hidr?lise do amido de milho para libera??o de a??cares pass?veis de fermenta??o. Realizou-se a identifica??o molecular e filogen?tica do fungo, al?m das melhores condi??es de cultivo. Os par?metros analisados foram o meio de cultivo e tempo de maior produ??o enzim?tica, fonte de nitrog?nio, sais, pH inicial do meio de cultivo, tamanho do in?culo em disco, fonte de carbono e suplementa??o com glicose, al?m da caracteriza??o das amilases brutas e a aplica??o na hidr?lise de diferentes substratos. Identificou-se que a cepa analisada pertence ? esp?cie Rhizopus arrhizus, cuja produ??o enzim?tica foi otimizada de 0,12 para 22,50 U.mL-?, com 6 dias de cultivo em meio submerso Carvalho-Peixoto, a 35?C, de forma estacion?ria, em presen?a de ureia, pH inicial 6,0, in?culo em disco de 0,5'' e casca de abacaxi acrescida de glicose. As amilases brutas apresentaram atividade ?tima aparente a 60?C e pH 6,0 (17,5 U.mL-?), com termoestabilidade por at? 240 minutos entre 50 e 55?C. Al?m de que sais contendo sulfato e pot?ssio aumentaram a a??o catal?tica em 26%. As enzimas foram capazes de hidrolisar diferentes substratos, bem como os gr?nulos de amido presentes nos gr?os de milho em temperaturas abaixo do seu ponto de gelatiniza??o, como foi observado pela presen?a de cavidades nas micrografias superficiais dos gr?nulos e pela cin?tica de hidr?lise com a libera??o de at? 0,443 mg de a??cares redutores em 24 horas e sem otimiza??o. Pelo exposto, o estudo demonstrou potencial aplicabilidade para a produ??o de amilases, uma vez que se utilizou fonte residual de carbono, fonte de nitrog?nio relativamente barata, e menor gasto de reagentes qu?micos na formula??o do meio de cultivo e in?culo. Al?m disso, as amilases produzidas demonstraram ser capazes de hidrolisar os gr?nulos de amido presentes no milho numa temperatura mais baixa que a utilizada a n?vel industrial, indicando menor gasto energ?tico na libera??o dos a??cares fermentesc?veis essenciais na produ??o do etanol de milho.