Study of sida yellow spot virus, a begomovirus with a divergent coat protein

• Autor(a) principal: Lima, Roberta Rúbia Pinto Nogueira
• Data de Publicação: 2022
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: LOCUS Repositório Institucional da UFV
• Texto Completo: https://locus.ufv.br//handle/123456789/32069; https://doi.org/10.47328/ufvbbt.2023.145
• topic: Begomovírus; Geminivírus; Proteínas; Vírus de plantas; Fitopatologia

Vírus do gênero Begomovirus (família Geminiviridae) são considerados um dos patógenos de plantas mais relevantes devido às severas perdas causadas em cultivos economicamente importantes. Begomovirus são transmitidos pela mosca branca Bemisia tabaci de forma persistente-circulativa, e a única proteína viral necessária para aquisição e transmissão pelo inseto vetor é proteína capsidial (CP). A CP é responsável pela especificidade pelo vetor e controla o transporte das partículas virais através do intestino da mosca branca, protegendo o vírus de degradação por enzimas, através de sua interação com a proteína GroEL produzida por bactérias endossimbióticas. Embora a CP seja a proteína mais conservada dos begomovírus, recentemente foi descrito um begomovírus bipartido com uma CP altamente divergente, denominado Sida yellow spot virus (SiYSV), infectando a planta não-cultivada Sida acuta (Malvaceae). Os objetivos desse trabalho foram determinar se o SiYSV é capaz de formar partículas geminadas, e realizar a caracterização biológica e molecular do SiYSV. Para o primeiro objetivo, a estrutura 3D da CP do SiYSV foi predita usando o AlphaFold e comparada, pelo mTM-align, com outras CP´s típicas de begomovírus. Além disso, cortes ultrafinos de plantas infectadas foram observados ao microscópio eletrônico de transmissão para detecção de partículas virais. Embora muito diferentes em sequência, a CP do SiYSV assume uma conformação 3D similar a de outros begomovírus. No entanto, partículas não foram observadas ao MET. Para o segundo objetivo, a gama de hospedeiros do SiYSV foi determinada e um ensaio de transmissão por mosca branca foi realizado. B. tabaci MEAM1 não transmitiu o SiYSV, e a interação entre a CP e a GroEL não foi observada por BiFC. Além disso, a localização subcelular das proteínas codificadas pelo SiYSV foi observada ao microscópio confocal e sua capacidade de suprimir o silenciamento de RNA foi analisada. Os resultados indicam que essas proteínas tiveram o mesmo padrão de localização esperado para begomovírus típicos, mas não foi observada nenhuma atividade de supressão de silenciamento. Juntos, esses resultados indicam que as proteínas codificadas pelo SiYSV podem atuar como as dos demais begomovírus, portanto a possibilidade de que o SiYSV forme um capsídeo não pode ser descartada mesmo que partículas ainda não tenham sido observadas. Ainda, a incapacidade deB. tabaci transmitir o SiYSV pode não estar relacionada a sua impossibilidade em formar partículas, mas sim a falta de interação entre a CP e a GroEL. Palavras-chave: Geminivírus. Proteína capsidial. Bemisia tabaci.