Identificação de efetores de Hemileia vastatrix que suprimem a imunidade ativada por padrões moleculares conservados de patógenos em Nicotiana benthamiana

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Rezende, Danielle
Data de Publicação: 2016
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: LOCUS Repositório Institucional da UFV
Texto Completo: https://locus.ufv.br//handle/123456789/26784
Resumo: Durante a interação com as plantas hospedeiras, os fungos causadores de ferrugens secretam e translocam diversas proteínas efetoras para o citoplasma das células vegetais, onde atuam suprimindo as respostas de defesa e promovendo o parasitismo. Em estudos prévios foram identificados genes candidatos a efetores em Hemileia vastatrix (HvECs) que codificam proteínas secretadas com funções desconhecidas. Visando entender o papel dessas proteínas secretadas na patogênese da ferrugem do cafeeiro, o presente trabalho teve como objetivo o estudo funcional de 54 candidatos a efetores do isolado monopostular de H. vastatrix HV-01 (raça II), avaliando-se a sua capacidade de suprimir a imunidade ativada por padrões moleculares conservados (PAMPs) da bactéria não patogênica Pseudomonas fluorescens em Nicotiana benthamiana. Essa resposta de imunidade, denominada PTI (PAMP-Triggered Imunnity), é a primeira linha de defesa induzida que as plantas utilizam para resistir ao ataque de patógenos. As sequências dos 54 genes que codificam as potenciais proteínas efetoras foram clonadas individualmente no vetor de expressão pEDV6 (Effector Delivery Vector) e os plasmídeos recombinantes foram transferidos para P. fluorescens EtHAn (Effector to Host Analyser) (Pf EtHan), que possui um sistema de secreção tipo III (SST3) capaz de translocar as proteínas codificadas pelos genes candidatos para o citoplasma de N. benthamiana. Desesseis proteínas efetoras apresentaram capacidade de suprimir PTI com alta reprodutibilidade em diferentes experimentos de co-infiltração de Pf EtHAn com a bactéria patogênica P. syringae pv. tomato DC3000 em N. benthamiana. A supressão de PTI por um gene candidato (HvEC_064) foi confirmada analisando-se o crescimento populacional de Pst DC3000 e morte celular nos tecidos infiltrados onde ocorreu, ou não, a supressão de PTI e ativação de imunidade desencadeada pelo reconhecimento de efetores dessa bactéria. Pode-se postular, com base nesses estudos, que os efetores de H. vastatrix com atividade supressora de PTI em N. benthamiana são prováveis efetores citoplasmáticos. Esses efetores serão priorizados em estudos futuros visando a identificação de genes de avirulência desse fungo e dos seus alvos nas células do cafeeiro.
id UFV_b3ae80f8a827573e21ff17c6625a26f4
oai_identifier_str oai:locus.ufv.br:123456789/26784
network_acronym_str UFV
network_name_str LOCUS Repositório Institucional da UFV
repository_id_str 2145
spelling Identificação de efetores de Hemileia vastatrix que suprimem a imunidade ativada por padrões moleculares conservados de patógenos em Nicotiana benthamianaIdentification of effectors of Hemileia vastatrix that suppress the immunity activated by conserved molecular patterns of pathogens in Nicotiana benthamianaHemileia vastatrixFerrugem-do-cafeeiroEfetores semelhantes a ativadores de transiçãoPadrões moleculares associados a patógenosFitopatologiaDurante a interação com as plantas hospedeiras, os fungos causadores de ferrugens secretam e translocam diversas proteínas efetoras para o citoplasma das células vegetais, onde atuam suprimindo as respostas de defesa e promovendo o parasitismo. Em estudos prévios foram identificados genes candidatos a efetores em Hemileia vastatrix (HvECs) que codificam proteínas secretadas com funções desconhecidas. Visando entender o papel dessas proteínas secretadas na patogênese da ferrugem do cafeeiro, o presente trabalho teve como objetivo o estudo funcional de 54 candidatos a efetores do isolado monopostular de H. vastatrix HV-01 (raça II), avaliando-se a sua capacidade de suprimir a imunidade ativada por padrões moleculares conservados (PAMPs) da bactéria não patogênica Pseudomonas fluorescens em Nicotiana benthamiana. Essa resposta de imunidade, denominada PTI (PAMP-Triggered Imunnity), é a primeira linha de defesa induzida que as plantas utilizam para resistir ao ataque de patógenos. As sequências dos 54 genes que codificam as potenciais proteínas efetoras foram clonadas individualmente no vetor de expressão pEDV6 (Effector Delivery Vector) e os plasmídeos recombinantes foram transferidos para P. fluorescens EtHAn (Effector to Host Analyser) (Pf EtHan), que possui um sistema de secreção tipo III (SST3) capaz de translocar as proteínas codificadas pelos genes candidatos para o citoplasma de N. benthamiana. Desesseis proteínas efetoras apresentaram capacidade de suprimir PTI com alta reprodutibilidade em diferentes experimentos de co-infiltração de Pf EtHAn com a bactéria patogênica P. syringae pv. tomato DC3000 em N. benthamiana. A supressão de PTI por um gene candidato (HvEC_064) foi confirmada analisando-se o crescimento populacional de Pst DC3000 e morte celular nos tecidos infiltrados onde ocorreu, ou não, a supressão de PTI e ativação de imunidade desencadeada pelo reconhecimento de efetores dessa bactéria. Pode-se postular, com base nesses estudos, que os efetores de H. vastatrix com atividade supressora de PTI em N. benthamiana são prováveis efetores citoplasmáticos. Esses efetores serão priorizados em estudos futuros visando a identificação de genes de avirulência desse fungo e dos seus alvos nas células do cafeeiro.During the interaction with host plants, rust fungi secrete and translocate several effector proteins into the cytoplasm of plant cells to suppress defence responses and promote parasitism. Previous studies have identified genes in Hemileia vastatrix that encode effectors with unknown functions. In order to understand the role of these effectors in the pathogenesis of coffee rust, this study aimed the functional analysis of 54 candidate effectors from the monopustular isolate of Hemileia vastatrix HV 01 (race II), by evaluating their ability to suppress Pathogen Associated Molecular Patterns (PAMPs) responses triggered by the nonpathogenic bacteria Pseudomonas fluorescens in Nicotiana benthamiana. This immune response, known as PTI (PAMP-Triggered Immunity), is the first line of induced defenses used by plants to resist pathogen attack. Gene sequences encoding the 54 putative effectors were individually cloned into pEDV6 (Effector Delivery Vector) vector. The recombinant plasmids were transferred to P. fluorescens EtHAn (Effector to Host Analyser) (Pf EtHan), which has a type III secretion system (T3SS) able to translocate the proteins encoded by the candidate genes into the cytoplasm of N. benthamiana. Sixteen candidate effector genes suppressed PTI with high reproducibility in different co-infiltration experiments of Pf EtHAn with the pathogenic bacterium P. syringae pv. tomato DC3000 in N. benthamiana. The suppression of PTI by a candidate gene (HvEC_064) was confirmed by analysing Pst DC3000 population growth and cell death in the infiltrated tissues where PTI was suppressed. The effectors of H. vastatrix with suppressive activity of PTI identified are likely cytoplasmic effectors. These effectors will be further investigated in future studies aimed to identify avirulence genes of this fungus and its targets in coffee plant cells.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível SuperiorUniversidade Federal de ViçosaBrommonschenkel, Sérgio Herminiohttp://lattes.cnpq.br/7071470908453753Rezende, Danielle2019-08-30T14:39:58Z2019-08-30T14:39:58Z2016-09-23info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfREZENDE, Danielle Identificação de efetores de Hemileia vastatrix que suprimem a imunidade ativada por padrões moleculares conservados de patógenos em Nicotiana benthamiana. 2016. 38 f. Dissertação (Mestrado em Fitopatologia) - Universidade Federal de Viçosa, Viçosa. 2016.https://locus.ufv.br//handle/123456789/26784porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:LOCUS Repositório Institucional da UFVinstname:Universidade Federal de Viçosa (UFV)instacron:UFV2024-07-12T08:02:01Zoai:locus.ufv.br:123456789/26784Repositório InstitucionalPUBhttps://www.locus.ufv.br/oai/requestfabiojreis@ufv.bropendoar:21452024-07-12T08:02:01LOCUS Repositório Institucional da UFV - Universidade Federal de Viçosa (UFV)false
dc.title.none.fl_str_mv Identificação de efetores de Hemileia vastatrix que suprimem a imunidade ativada por padrões moleculares conservados de patógenos em Nicotiana benthamiana
Identification of effectors of Hemileia vastatrix that suppress the immunity activated by conserved molecular patterns of pathogens in Nicotiana benthamiana
title Identificação de efetores de Hemileia vastatrix que suprimem a imunidade ativada por padrões moleculares conservados de patógenos em Nicotiana benthamiana
spellingShingle Identificação de efetores de Hemileia vastatrix que suprimem a imunidade ativada por padrões moleculares conservados de patógenos em Nicotiana benthamiana
Rezende, Danielle
Hemileia vastatrix
Ferrugem-do-cafeeiro
Efetores semelhantes a ativadores de transição
Padrões moleculares associados a patógenos
Fitopatologia
title_short Identificação de efetores de Hemileia vastatrix que suprimem a imunidade ativada por padrões moleculares conservados de patógenos em Nicotiana benthamiana
title_full Identificação de efetores de Hemileia vastatrix que suprimem a imunidade ativada por padrões moleculares conservados de patógenos em Nicotiana benthamiana
title_fullStr Identificação de efetores de Hemileia vastatrix que suprimem a imunidade ativada por padrões moleculares conservados de patógenos em Nicotiana benthamiana
title_full_unstemmed Identificação de efetores de Hemileia vastatrix que suprimem a imunidade ativada por padrões moleculares conservados de patógenos em Nicotiana benthamiana
title_sort Identificação de efetores de Hemileia vastatrix que suprimem a imunidade ativada por padrões moleculares conservados de patógenos em Nicotiana benthamiana
author Rezende, Danielle
author_facet Rezende, Danielle
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Brommonschenkel, Sérgio Herminio
http://lattes.cnpq.br/7071470908453753
dc.contributor.author.fl_str_mv Rezende, Danielle
dc.subject.por.fl_str_mv Hemileia vastatrix
Ferrugem-do-cafeeiro
Efetores semelhantes a ativadores de transição
Padrões moleculares associados a patógenos
Fitopatologia
topic Hemileia vastatrix
Ferrugem-do-cafeeiro
Efetores semelhantes a ativadores de transição
Padrões moleculares associados a patógenos
Fitopatologia
description Durante a interação com as plantas hospedeiras, os fungos causadores de ferrugens secretam e translocam diversas proteínas efetoras para o citoplasma das células vegetais, onde atuam suprimindo as respostas de defesa e promovendo o parasitismo. Em estudos prévios foram identificados genes candidatos a efetores em Hemileia vastatrix (HvECs) que codificam proteínas secretadas com funções desconhecidas. Visando entender o papel dessas proteínas secretadas na patogênese da ferrugem do cafeeiro, o presente trabalho teve como objetivo o estudo funcional de 54 candidatos a efetores do isolado monopostular de H. vastatrix HV-01 (raça II), avaliando-se a sua capacidade de suprimir a imunidade ativada por padrões moleculares conservados (PAMPs) da bactéria não patogênica Pseudomonas fluorescens em Nicotiana benthamiana. Essa resposta de imunidade, denominada PTI (PAMP-Triggered Imunnity), é a primeira linha de defesa induzida que as plantas utilizam para resistir ao ataque de patógenos. As sequências dos 54 genes que codificam as potenciais proteínas efetoras foram clonadas individualmente no vetor de expressão pEDV6 (Effector Delivery Vector) e os plasmídeos recombinantes foram transferidos para P. fluorescens EtHAn (Effector to Host Analyser) (Pf EtHan), que possui um sistema de secreção tipo III (SST3) capaz de translocar as proteínas codificadas pelos genes candidatos para o citoplasma de N. benthamiana. Desesseis proteínas efetoras apresentaram capacidade de suprimir PTI com alta reprodutibilidade em diferentes experimentos de co-infiltração de Pf EtHAn com a bactéria patogênica P. syringae pv. tomato DC3000 em N. benthamiana. A supressão de PTI por um gene candidato (HvEC_064) foi confirmada analisando-se o crescimento populacional de Pst DC3000 e morte celular nos tecidos infiltrados onde ocorreu, ou não, a supressão de PTI e ativação de imunidade desencadeada pelo reconhecimento de efetores dessa bactéria. Pode-se postular, com base nesses estudos, que os efetores de H. vastatrix com atividade supressora de PTI em N. benthamiana são prováveis efetores citoplasmáticos. Esses efetores serão priorizados em estudos futuros visando a identificação de genes de avirulência desse fungo e dos seus alvos nas células do cafeeiro.
publishDate 2016
dc.date.none.fl_str_mv 2016-09-23
2019-08-30T14:39:58Z
2019-08-30T14:39:58Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv REZENDE, Danielle Identificação de efetores de Hemileia vastatrix que suprimem a imunidade ativada por padrões moleculares conservados de patógenos em Nicotiana benthamiana. 2016. 38 f. Dissertação (Mestrado em Fitopatologia) - Universidade Federal de Viçosa, Viçosa. 2016.
https://locus.ufv.br//handle/123456789/26784
identifier_str_mv REZENDE, Danielle Identificação de efetores de Hemileia vastatrix que suprimem a imunidade ativada por padrões moleculares conservados de patógenos em Nicotiana benthamiana. 2016. 38 f. Dissertação (Mestrado em Fitopatologia) - Universidade Federal de Viçosa, Viçosa. 2016.
url https://locus.ufv.br//handle/123456789/26784
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
dc.publisher.none.fl_str_mv Universidade Federal de Viçosa
publisher.none.fl_str_mv Universidade Federal de Viçosa
dc.source.none.fl_str_mv reponame:LOCUS Repositório Institucional da UFV
instname:Universidade Federal de Viçosa (UFV)
instacron:UFV
instname_str Universidade Federal de Viçosa (UFV)
instacron_str UFV
institution UFV
reponame_str LOCUS Repositório Institucional da UFV
collection LOCUS Repositório Institucional da UFV
repository.name.fl_str_mv LOCUS Repositório Institucional da UFV - Universidade Federal de Viçosa (UFV)
repository.mail.fl_str_mv fabiojreis@ufv.br
_version_ 1822610684056174592