Clonagem, expressão e caracterização de uma flavina monooxigenase de Coffea arabica

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Cesarino, Igor, 1984-
Data de Publicação: 2009
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1608925
Resumo: Orientador: Paulo Mazzafera
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spelling Clonagem, expressão e caracterização de uma flavina monooxigenase de Coffea arabicaCloning, expression and characterization of flavin-containing monooxygenese from Coffea arabicaCoffea arabicaFlavina monooxigenaseCaracterização funcionalCoffea arabicaFlavin-containing monooxygenaseFunctional characterizationOrientador: Paulo MazzaferaDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de BiologiaResumo: Uma grande quantidade de genes que codificam flavina monooxigenases (Flavin containing monooxygenases - FMOs) é encontrada em genomas vegetais, embora poucas funções biológicas tenham sido relacionadas com esse grupo de enzimas em plantas. Um importante papel desempenhado por FMOs é a conversão de triptamina em N-hidroxil niptamina, reação catalisada pelas proteínas YUCCA de Arabidopsis thaliana e que constitui o passo limitante da via de síntese de auxina a partir de triptofano. Proteínas similares às YUCCA foram descobertas e caracterizadas em outras espécies vegetais, como OsYUCCA em arroz. FLOOZY em petúnia, ToFZY em tomate e SPIl em milho, todas comprovadamente envolvidas na produção do hormônio citado. Análises da proteína recombinante CaFM08 de Coffea arabica revelou características similares às YUCCA, sugerindo que esta proteína de café é a primeira YUCCA-like descrita para esta espécie e, inclusive, para a família Rubiaceae. CaFM08 apresenta os mesmos motivos protéicos conservados entre FMOs vegetais, e particularmente entre proteínas YUCCA-like. O padrão de expressão espacial do gene que codifica CaFM08 indica possível relação com o desenvolvimento de raízes, folhas e flores de café. Apesar de grandes semelhanças com as proteínas YUCCA, a atividade de N-hidroxilação da triptamina não foi comprovada para CaFM08 recombinante in vitro. Uma análise minuciosa a respeito da funcionalidade de CaFM08 produzida em E. coli deve ser feita antes de descartar a participação desta proteína na síntese de auxina.Abstract: A large number of genes coding flavin-containing monooxygenases (FMOs) is found in plant genomes, although only few biological functions have been related with these enzymes in plants. An important role for FMOs is the conversion of tryptamine in N-hydroxyl triptamine, catalyzed by the YUCCA protein family in Arabidopsis thaliana. These proteins perform "the rate-limiting step in tryptophan-dependent auxin biosynthesis. Similar YUCCA proteins were discovered and characterized in other plant species, like OsYUCCA in rice, FLOOZY in petunia, ToFZY in tomato and SPIl in maize. All of them are shown to be involved in auxin synthesis. Analysis of the recombinant CaFM08 from Colfea Arabica showed features similar to YUCCA proteins, suggesting that CaFM08 is the first described YUCCA-like protein from coffee and, indeed, from the entire Rubiaceae family. CaFM08 has the same conserved motifs found in other plant FMOs and particulary conserved in YUCCA like proteins. The spatial expression pattern from the CaFM08 coding gene suggests a probable role in the development of roots, leaves and flowers. Although very similar to YUCCA proteins, the CaFM08-mediated convertion of tryptamine in N-hydroxyl tryptamine has not been confirmed in vitro. A further analysis of CaFM08 functionality should address the relation of CaFM08 to auxin production.MestradoMestre em Biologia Vegetal[s.n.]Mazzafera, Paulo, 1961-Dornelas, Marcelo CarnierKobarg, JörgUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de BiologiaPrograma de Pós-Graduação em Biologia VegetalUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASCesarino, Igor, 1984-2009info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf56 f. : il.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1608925CESARINO, Igor. Clonagem, expressão e caracterização de uma flavina monooxigenase de Coffea arabica. 2009. 56 f. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1608925. Acesso em: 2 set. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/438994porreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2017-02-18T05:27:15Zoai::438994Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2017-02-18T05:27:15Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false
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