Efeitos do paclitaxel, cisplatina e inibidores da enzima ácido graxo sintase na expressão de marcadores associados às celulas-tronco do câncer e isolamento de subpopulações em linhagens celulares de carcinoma de células escamosas oral

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Cuadra Zelaya, Florence Juana Maria, 1977-
Data de Publicação: 2019
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1642019
Resumo: Orientador: Edgard Graner
id UNICAMP-30_9ad2c2f670c532c8aab5890154414f9b
oai_identifier_str oai::1166901
network_acronym_str UNICAMP-30
network_name_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
repository_id_str
spelling Efeitos do paclitaxel, cisplatina e inibidores da enzima ácido graxo sintase na expressão de marcadores associados às celulas-tronco do câncer e isolamento de subpopulações em linhagens celulares de carcinoma de células escamosas oralEffects of paclitaxel, cysplatin and fatty acid synthase inhibitors on expression of markers associated with cancer stem cells and isolation of subpopulations in oral squamous cell carcinoma cell linesCélulas-tronco neoplásicasCitometria de fluxoCarcinoma de células escamosas oralReceptores de hialuronatosMolécula de adesão da célula epitelialNeoplastic stem cellsFlow cytometryOral squamous cell carcinomaHyaluronan receptorsEpithelial cell adhesion moleculeOrientador: Edgard GranerTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de PiracicabaResumo: Recentes evidências indicam que as células tronco do câncer (CTC) tenham papel importante nas recorrências loco-regionais e metástases à distância de diversas neoplasias malignas, incluindo o carcinoma de células escamosas oral (CCEO). Uma caractéristica importante das CTC consiste na resistência a agentes quimioterápicos, que pode contribuir para a permanência de células residuais após o tratamento. A enzima ácido graxo sintase (FASN) tem sido descrita como uma oncoproteina metabólica, tendo sua expressão aumentada em neoplasias malignas originárias de diferentes tecidos. Sua expressão está também aumentada no CCEO e estudos in vivo mostraram que sua inibição com orlistat (ORL) diminui o volume de tumores ortotópicos de língua e reduz o número de metástases cervicais. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a imunoexpressão de marcadores de superfície associados a CTC (CD44, CD326, CD133 e CD271) nas linhagens celulares derivadas de CCEO SCC-9 ZsG e LN-1A tratadas com paclitaxel (PTX), cisplatina (CIS) e com os inibidores de FASN ORL e TVB-3166, bem como isolar suas subpopulações por meio da imunoexpressão de CD44 e CD326. Para isto, as células foram tratadas com CIS, ORL e TVB-3166 em suas respectivas IC50 e com PTX a 1 µM e 50 µM. Os estudos de citometria de fluxo revelaram os fenótipos CD44+/CD326+ e CD44-/CD326+ em ambas as linhagens tratadas ou não com as drogas estudadas. PTX diminuiu a expressão de CD44+ e a população CD44+/CD326+ e aumentou a população CD44-/CD326+ nas duas linhagens celulares. CIS aumentou a expressão de CD44 e CD326 nas células SCC-9 ZsG e LN-1A. De modo geral, ORL e TVB-3166 não modificaram significativamente os fenótipos celulares, a não ser pela diminuição da expressão de CD44 na população com baixa expressão desta proteína e da expressão de CD326 na linhagem LN-1A. Para o isolamento de subpopulações, células SCC-9 ZsG e LN-1A foram marcadas com anticorpos contra CD44 e CD326 e, por meio de citometria de fluxo, subpopulações identificadas, separadas e avaliadas quanto a morfologia e expressão de proteínas de transição epitélio-mesenquimal (TEM), por meio de western blotting. Foram isolados seis fenótipos a partir da linhagem SCC-9 ZsG, dos quais destacam-se CD44Low/CD326+ e CD44-/CD326+, com características epiteliais e alta produção de e-caderina, e CD44+/CD326- e CD44+/CD326Low, com alta produção de slug, vimentina e n-caderina. A partir da linhagem LN-1A foram isolados 7 fenótipos, com destaque para CD44Low/CD326+ e CD44-/CD326+, de aspecto epitelial e produtores de e-caderina e CD44+/CD326- e CD44+/CD326Low, com alta expressão de slug, vimentina e n-caderina. Células CD44High/CD326-, com aspecto mesenquimal e alta produção de vimentina, n-caderina e slug, foram isoladas somente da linhagem LN-1A. Estes resultados mostram que PTX e CIS modificam o padrão de expressão de CD44 e CD326 nas células SCC-9 ZsG e LN-1A e que subpopulações com maior expressão de CD44 e ausência ou baixa expressão de CD326 apresentam características mesenquimais associadas a TEM, enquanto células com maior expressão a CD326 e com ausência ou baixa expressão de CD44 têm características epiteliaisAbstract: Recent evidences indicate that cancer stem cells (CSC) have a central role in tumor recurrence and metastasis in several types of human malignancies, including oral squamous cell carcinoma (OSCC). An important feature of CSC is the resistance to chemotherapy, which may contribute the presence of residual cancer cells following the treatment. Fatty acid synthase (FASN) has been described as a metabolic oncoprotein overexpressed in malignancies derived from several tissues. Its expression is increased in OSCC and in vivo studies have shown that its inhibition with orlistat (ORL) decreases the volume of tongue orthotopic tumors as well as the number of cervical lymph node metastases. The aim of the present study is to evaluate the immunoexpression of CSC surface markers (CD44, CD326, CD133, and CD271) in the OSCC cell lines SCC-9 ZsG and LN-1A treated with paclitaxel (PTX), cisplatin (CIS), as well as the FASN inhibitors ORL and TVB-3166. Also, this study aims to isolate subpopulations according to the expression of CD44 and CD326 from the same cell lines. Cells were treated CIS, ORL and TVB-3166 in their respective IC50 and with PTX at 1 µM and 50 µM. Flow cytometry experiments showed that CD44+/CD326- and CD44-/CD326+ populations are present in both cell lines treated or not with the studied drugs. PTX decreases CD44+ expression and the size of CD44+/CD326+ population as well as increases CD44-/CD326+ population in both cell lines. In contrast, CIS increases the expression of CD44 and CD326 in SCC-9 ZsG and LN-1A cells. ORL and TVB-3166 did not significantly modified cell phenotypes except by a decrease of CD44 expression in cells with low expression of this marker and of CD326 in LN-1A cells. Cell sorting was performed after labeling of SCC-9 ZsG and LN-1A cells with antibodies against CD44 and CD326 and each phenotype had the morphology and production of epithelial-mesenchymal transition (EMT) markers were evaluated. Six different phenotypes were isolated from SCC-9 ZsG cells, with emphasis to CD44Low/CD326+ and CD44-/CD326+, with epithelial aspect and high producers of e-cadherin, and CD44+/CD326- and CD44+/CD326Low with high expression of slug, vimentin and n-cadherin. From LN-1A cells seven phenotypes were isolated, with emphasis to CD44Low/CD326+ and CD44-/CD326+ with epithelial morphology and high e-cadherin production as well as CD44+/CD326- and CD44+/CD326Low with high expression of slug, vimentin and n-cadherin. A group of cells CD44High/CD326- with mesenchymal phenotype and high producers of vimentin, n-cadherin and slug was found in LN-1A cells only. Taken together our results show that PTX and CIS change CD44 e CD326 pattern of expression in SCC-9 ZsG and LN-1A cells and that subpopulations with high CD44 expression and absent or low CD326 expression have mesenchymal characteristics associated with EMT whereas subpopulations with high CD326 expression and absent or low CD44 expression have epithelial characteristicsDoutoradoPatologiaDoutora em EstomatopatologiaCNPQ141536/2017-9[s.n.]Graner, Edgard, 1968-Bastos, Débora CampanellaOliveira, Carine Ervolino deAlmeida, Luciana Yamamoto deDourado, Mauricio da RochaUniversidade Estadual de Campinas. Faculdade de Odontologia de PiracicabaPrograma de Pós-Graduação em EstomatopatologiaUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASCuadra Zelaya, Florence Juana Maria, 1977-20192019-11-27T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdf1 recurso online (107 p.) : il., digital, arquivo PDF.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1642019CUADRA ZELAYA, Florence Juana Maria. Efeitos do paclitaxel, cisplatina e inibidores da enzima ácido graxo sintase na expressão de marcadores associados às celulas-tronco do câncer e isolamento de subpopulações em linhagens celulares de carcinoma de células escamosas oral. 2019. 1 recurso online (107 p.) Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba, Piracicaba, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1642019. Acesso em: 15 mai. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/1166901Requisitos do sistema: Software para leitura de arquivo em PDFporreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2021-09-21T13:59:59Zoai::1166901Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2021-09-21T13:59:59Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false
dc.title.none.fl_str_mv Efeitos do paclitaxel, cisplatina e inibidores da enzima ácido graxo sintase na expressão de marcadores associados às celulas-tronco do câncer e isolamento de subpopulações em linhagens celulares de carcinoma de células escamosas oral
Effects of paclitaxel, cysplatin and fatty acid synthase inhibitors on expression of markers associated with cancer stem cells and isolation of subpopulations in oral squamous cell carcinoma cell lines
title Efeitos do paclitaxel, cisplatina e inibidores da enzima ácido graxo sintase na expressão de marcadores associados às celulas-tronco do câncer e isolamento de subpopulações em linhagens celulares de carcinoma de células escamosas oral
spellingShingle Efeitos do paclitaxel, cisplatina e inibidores da enzima ácido graxo sintase na expressão de marcadores associados às celulas-tronco do câncer e isolamento de subpopulações em linhagens celulares de carcinoma de células escamosas oral
Cuadra Zelaya, Florence Juana Maria, 1977-
Células-tronco neoplásicas
Citometria de fluxo
Carcinoma de células escamosas oral
Receptores de hialuronatos
Molécula de adesão da célula epitelial
Neoplastic stem cells
Flow cytometry
Oral squamous cell carcinoma
Hyaluronan receptors
Epithelial cell adhesion molecule
title_short Efeitos do paclitaxel, cisplatina e inibidores da enzima ácido graxo sintase na expressão de marcadores associados às celulas-tronco do câncer e isolamento de subpopulações em linhagens celulares de carcinoma de células escamosas oral
title_full Efeitos do paclitaxel, cisplatina e inibidores da enzima ácido graxo sintase na expressão de marcadores associados às celulas-tronco do câncer e isolamento de subpopulações em linhagens celulares de carcinoma de células escamosas oral
title_fullStr Efeitos do paclitaxel, cisplatina e inibidores da enzima ácido graxo sintase na expressão de marcadores associados às celulas-tronco do câncer e isolamento de subpopulações em linhagens celulares de carcinoma de células escamosas oral
title_full_unstemmed Efeitos do paclitaxel, cisplatina e inibidores da enzima ácido graxo sintase na expressão de marcadores associados às celulas-tronco do câncer e isolamento de subpopulações em linhagens celulares de carcinoma de células escamosas oral
title_sort Efeitos do paclitaxel, cisplatina e inibidores da enzima ácido graxo sintase na expressão de marcadores associados às celulas-tronco do câncer e isolamento de subpopulações em linhagens celulares de carcinoma de células escamosas oral
author Cuadra Zelaya, Florence Juana Maria, 1977-
author_facet Cuadra Zelaya, Florence Juana Maria, 1977-
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Graner, Edgard, 1968-
Bastos, Débora Campanella
Oliveira, Carine Ervolino de
Almeida, Luciana Yamamoto de
Dourado, Mauricio da Rocha
Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Odontologia de Piracicaba
Programa de Pós-Graduação em Estomatopatologia
UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS
dc.contributor.author.fl_str_mv Cuadra Zelaya, Florence Juana Maria, 1977-
dc.subject.por.fl_str_mv Células-tronco neoplásicas
Citometria de fluxo
Carcinoma de células escamosas oral
Receptores de hialuronatos
Molécula de adesão da célula epitelial
Neoplastic stem cells
Flow cytometry
Oral squamous cell carcinoma
Hyaluronan receptors
Epithelial cell adhesion molecule
topic Células-tronco neoplásicas
Citometria de fluxo
Carcinoma de células escamosas oral
Receptores de hialuronatos
Molécula de adesão da célula epitelial
Neoplastic stem cells
Flow cytometry
Oral squamous cell carcinoma
Hyaluronan receptors
Epithelial cell adhesion molecule
description Orientador: Edgard Graner
publishDate 2019
dc.date.none.fl_str_mv 2019
2019-11-27T00:00:00Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
format doctoralThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv https://hdl.handle.net/20.500.12733/1642019
CUADRA ZELAYA, Florence Juana Maria. Efeitos do paclitaxel, cisplatina e inibidores da enzima ácido graxo sintase na expressão de marcadores associados às celulas-tronco do câncer e isolamento de subpopulações em linhagens celulares de carcinoma de células escamosas oral. 2019. 1 recurso online (107 p.) Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba, Piracicaba, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1642019. Acesso em: 15 mai. 2024.
url https://hdl.handle.net/20.500.12733/1642019
identifier_str_mv CUADRA ZELAYA, Florence Juana Maria. Efeitos do paclitaxel, cisplatina e inibidores da enzima ácido graxo sintase na expressão de marcadores associados às celulas-tronco do câncer e isolamento de subpopulações em linhagens celulares de carcinoma de células escamosas oral. 2019. 1 recurso online (107 p.) Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba, Piracicaba, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1642019. Acesso em: 15 mai. 2024.
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.relation.none.fl_str_mv https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/1166901
Requisitos do sistema: Software para leitura de arquivo em PDF
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
1 recurso online (107 p.) : il., digital, arquivo PDF.
dc.publisher.none.fl_str_mv [s.n.]
publisher.none.fl_str_mv [s.n.]
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
instacron:UNICAMP
instname_str Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
instacron_str UNICAMP
institution UNICAMP
reponame_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
collection Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
repository.name.fl_str_mv Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
repository.mail.fl_str_mv sbubd@unicamp.br
_version_ 1799138563992846336

Registros relacionados