Desenvolvimento e validação de método analítico por CLAE-DAD para avaliação de extratos padronizados de Mikania glomerata com atividade antimicrobiana frente a bactérias cariogênicas

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Moreira, Monique Rodrigues
Data de Publicação: 2017
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da Universidade Cruzeiro do Sul
Texto Completo: https://repositorio.cruzeirodosul.edu.br/handle/123456789/924
Resumo: Mikania glomerata pertence à família Asteraceae e no Brasil é popularmente conhecido como ―Guaco‖. Em termos fitoquímicos, esta planta é caracterizada pela presença de vários diterpenos do tipo caurano em sua composição, sendo o ácido ent-caurenóico (AC) seu metabólito majoritário. Inicialmente, o presente trabalho descreve a obtenção de um extrato padronizado de Mikania glomerata enriquecido em AC. Este extrato apresentou valores de CIM entre 6,25 e 12,50 μg/mL enquanto AC apresentou valores de CIM entre 6,25 e 50,00 μg/mL frente ao painel de bactérias bucais testado. O extrato padronizado e o AC necessitaram 6 horas para exercer seu efeito bactericida ao S. mutans. Estes resultados denotam o potencial de Mikania glomerata na busca de novos princípios ativos anticariogênicos, principalmente com relação ao extrato devido apresentar menor valor de CIM do que o AC possivelmente pelo efeito de sinergismo entre os constituintes do extrato. Neste trabalho descreve-se ainda o desenvolvimento e validação de método analítico por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE-DAD) para determinação do teor de AC em no extrato padronizado. Os estudos analíticos permitiram estabelecer um método confiável para determinar o teor de AC no extrato padronizado, atendendo às crescentes demandas por qualidade e segurança em produtos fitofarmacêuticos. Os ensaios de citotoxicidade e genotoxicidade afirmaram a segurança do uso do extrato padronizado. Finalmente, é descrito ainda a utilização de Design experimental para a obtenção de novos extratos a base de Mikania glomerata que dispensem a utilização de etapas cromatográficas. Palavras-chave: Mikania glomerata, antimicrobiana, validação, otimização.
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spelling 2020-08-26T14:39:26Z2020-08-26T14:39:26Z2017-04-10MOREIRA, Monique Rodrigues. Desenvolvimento e validação de método analítico por CLAE-DAD para avaliação de extratos padronizados de Mikania glomerata com atividade antimicrobiana frente a bactérias cariogênicas. Franca, SP, 2017. 126 f. Tese (Doutorado) - Universidade de Franca. 2017.https://repositorio.cruzeirodosul.edu.br/handle/123456789/924Mikania glomerata pertence à família Asteraceae e no Brasil é popularmente conhecido como ―Guaco‖. Em termos fitoquímicos, esta planta é caracterizada pela presença de vários diterpenos do tipo caurano em sua composição, sendo o ácido ent-caurenóico (AC) seu metabólito majoritário. Inicialmente, o presente trabalho descreve a obtenção de um extrato padronizado de Mikania glomerata enriquecido em AC. Este extrato apresentou valores de CIM entre 6,25 e 12,50 μg/mL enquanto AC apresentou valores de CIM entre 6,25 e 50,00 μg/mL frente ao painel de bactérias bucais testado. O extrato padronizado e o AC necessitaram 6 horas para exercer seu efeito bactericida ao S. mutans. Estes resultados denotam o potencial de Mikania glomerata na busca de novos princípios ativos anticariogênicos, principalmente com relação ao extrato devido apresentar menor valor de CIM do que o AC possivelmente pelo efeito de sinergismo entre os constituintes do extrato. Neste trabalho descreve-se ainda o desenvolvimento e validação de método analítico por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE-DAD) para determinação do teor de AC em no extrato padronizado. Os estudos analíticos permitiram estabelecer um método confiável para determinar o teor de AC no extrato padronizado, atendendo às crescentes demandas por qualidade e segurança em produtos fitofarmacêuticos. Os ensaios de citotoxicidade e genotoxicidade afirmaram a segurança do uso do extrato padronizado. Finalmente, é descrito ainda a utilização de Design experimental para a obtenção de novos extratos a base de Mikania glomerata que dispensem a utilização de etapas cromatográficas. Palavras-chave: Mikania glomerata, antimicrobiana, validação, otimização.Mikania glomerata belongs to Asteraceae family, in Brazil is commonly named as ―Guaco‖. This plant can be chemically characterized by the presence of several kauran diterpenes in your composition, and ent-kaurenoic acid has been pointed out as its major constituent. Ent-caurenoic enriched Mikania glomerate extract (standardized extract) presented MIC values between 6.25 and 12.50 μg/mL and its main metabolite (ent-kaurenoic acid) showed MIC values between 6.25 and 50.00 μg/mL. Standardized extract and ent-kaurenoic acid required 6 hours to exert their bactericidal effect. The results describe here in denote the potential of Mikania glomerata as a source of new anticareogenic active principles. This work also describes development and validation of analytical method by high performance liquid chromatography (HPLC-DAD) to determine ent-kaurenoic acid content in standardized extract. Analytical studies allowed establish a reliable method to determine ent-kaurenoic acid content in standardized extract, meeting increasing demands for quality and safety in plant derived products. In addition, cytotoxicity and genotoxicity assays stated the safety standardized extract use. Finally, it is also described the use of experimental design to obtain extracts of Mikania glomerata without the utilization of chromatographic steps. Key-words: Mikania glomerata, antimicrobial, validation, optimizationporUniversidade de FrancaPrograma de Doutorado em CiênciasUNIFRANBrasilPós-GraduaçãoCNPQ::CIENCIAS EXATAS E DA TERRA::QUIMICAMikania glomerataAntimicrobianaValidaçãoOtimizaçãoDesenvolvimento e validação de método analítico por CLAE-DAD para avaliação de extratos padronizados de Mikania glomerata com atividade antimicrobiana frente a bactérias cariogênicasDevelopment and validation of an analytical method by HPLC-DAD for evaluation of standardized extracts of Mikania glomerata with antimicrobial activity against cariogenic bacteriainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisVeneziani, Rodrigo Cassio Sola7198067266796866http://lattes.cnpq.br/7198067266796866Gregório, Luiz Elídio8267826459967218http://lattes.cnpq.br/8267826459967218Miranda, Carlos Eduardo Saraiva0927997367756054http://lattes.cnpq.br/0927997367756054Heleno, Vladimir Constantino Gomes8691255594471749http://lattes.cnpq.br/8691255594471749Silva, Márcio Luís Andrade e3379459480976790http://lattes.cnpq.br/33794594809767906425189849405317http://lattes.cnpq.br/6425189849405317Moreira, Monique Rodriguesinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da Universidade Cruzeiro do Sulinstname:Universidade Cruzeiro do Sul (UNICSUL)instacron:UNICSULORIGINALMonique Rodrigues Moreira.pdfMonique Rodrigues Moreira.pdfapplication/pdf3936460http://dev.siteworks.com.br:8080/jspui/bitstream/123456789/924/1/Monique%20Rodrigues%20Moreira.pdf1e9d9402d5330822911821573a960262MD51LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81748http://dev.siteworks.com.br:8080/jspui/bitstream/123456789/924/2/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD52123456789/9242020-08-26 11:41:46.934oai:repositorio.cruzeirodosul.edu.br: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Repositório InstitucionalPRIhttps://repositorio.cruzeirodosul.edu.br/oai/requestmary.pela@unicid.edu.bropendoar:2020-08-26T14:41:46Repositório Institucional da Universidade Cruzeiro do Sul - Universidade Cruzeiro do Sul (UNICSUL)false
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