Avaliação da fração vascular estromal da porção anterior do corpo adiposo de Bichat após associação com plasma pobre em plaqueta autólogo como meio de transporte
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Data de Publicação: | 2019 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da Universidade Cruzeiro do Sul |
Texto Completo: | https://repositorio.cruzeirodosul.edu.br/handle/123456789/2288 |
Resumo: | As células-tronco apresentam várias características, como por exemplo o potencial de diferenciação e a capacidade de adesão ao plástico, o que permite o seu cultivo em garrafas ou placas. Atualmente, muitos trabalhos científicos são realizados com células-tronco adultas, do tipo mesenquimais (CTM), devido ao fato destas possuírem inúmeras aplicabilidades, e serem facilmente encontradas em tecidos do corpo, como no tecido adiposo. Existem procedimentos cirúrgicos que visam a remoção do tecido adiposo, sendo este normalmente descartado. Na face, pode-se citar a bichectomia, uma técnica cirúrgica na qual a parte anterior da bola de Bichat ou corpo adiposo de Bichat (paCAB) é removida e descartada. Sabe-se que a paCAB contém vários tipos celulares, sendo esta porção celular denominada de fração vascular estromal (FVE). Pensando na aplicação clínica da FVE, um meio de manutenção e transporte das células até sua entrega no local desejado pode ser um meio fluido e autólogo, como o plasma pobre em plaquetas (PPP). O presente trabalho teve como objetivo avaliar as células que compõe a FVE e verificar se esta fração após imersão em PPP permanece viável por um período de até 48 horas. Assim, a partir de 3 pacientes submetidos à bichectomia por razões de saúde, as amostras de paCAB coletadas, ao invés de descartadas, foram submetidas separadamente a um protocolo de obtenção de FVE. A FVE foi dividida em alíquotas em seringa e em placas de cultivo, nos tempos 0, 24 e 48 horas. Caracterização e viabilidade celular foram realizadas em citômetro de fluxo. Por imunofenotipagem, foram detectadas: células endoteliais, células T, células-tronco hematopoiéticas e CTM. Paralelamente, o protocolo de Dominici também confirmou a existência das CTM na amostra. A viabilidade celular no PPP manteve-se em 70%, valor considerado aceitável pela Sociedade Internacional de Terapia Celular. Logo, tomando-se todos os cuidados de biossegurança necessários, o PPP autólogo pode ser considerado um meio eficiente para aplicação clínica da FVE. |
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Pensando na aplicação clínica da FVE, um meio de manutenção e transporte das células até sua entrega no local desejado pode ser um meio fluido e autólogo, como o plasma pobre em plaquetas (PPP). O presente trabalho teve como objetivo avaliar as células que compõe a FVE e verificar se esta fração após imersão em PPP permanece viável por um período de até 48 horas. Assim, a partir de 3 pacientes submetidos à bichectomia por razões de saúde, as amostras de paCAB coletadas, ao invés de descartadas, foram submetidas separadamente a um protocolo de obtenção de FVE. A FVE foi dividida em alíquotas em seringa e em placas de cultivo, nos tempos 0, 24 e 48 horas. Caracterização e viabilidade celular foram realizadas em citômetro de fluxo. Por imunofenotipagem, foram detectadas: células endoteliais, células T, células-tronco hematopoiéticas e CTM. Paralelamente, o protocolo de Dominici também confirmou a existência das CTM na amostra. A viabilidade celular no PPP manteve-se em 70%, valor considerado aceitável pela Sociedade Internacional de Terapia Celular. Logo, tomando-se todos os cuidados de biossegurança necessários, o PPP autólogo pode ser considerado um meio eficiente para aplicação clínica da FVE.Stem cells have several characteristics, such as cellular differentiation and the capacity of adhering to plastic, which allows its cultivation in bottles or cell culture plates. Research is usually conducted utilizing mesenchymal stem cell, due to its multiple applications and for being easily found in adipose tissue. Several procedures extract adipose tissue from the body, which is then usually thrown away. One of them is buccal fat extraction, a commonly practiced plastic surgery procedure, that extracts and disposes of Bichat's fat pad. It contains several different cell types, that together are called stromal vascular fraction (SVF). For a clinical application of the SVF, a maintenance and transportation medium to deliver cells to its designated location can be a fluid and autologous one, such as the platelet poor plasma. This work's objective is to assess the cells that compose the stromal vascular fraction (SVF) and verify their viability after being immersed in platelet poor plasma for up to 48 hours. The Bichat's fat pad of 3 patients submitted to buccal fat extraction were collected and separately submitted to a SVF obtainment protocol. The SVF was divided into parts in syringes and culture plates, at 0, 24 and 48 hour marks. Cellular viability and characterization were evaluated utilizing a flow cytometer. Through immunophenotyping, the following were detected: endothelial cells, T cells, hematopoietic stem cell and mesenchymal stem cells. The Dominici protocol also confirmed the existence of mesenchymal stem cells in the sample. Cellular viability in the platelet poor plasma remained at 70%, a value considered acceptable by the International Society for Cellular Therapy (ISCT). Therefore, while abiding by biosafety measures, the autologous platelet poor plasma can be considered an efficient medium for the clinical application of SVFporUniversidade PositivoPrograma de Pós-Graduação em Biotecnologia IndustrialUPBrasilPós-GraduaçãoCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOLOGIA GERALBiotecnologia industrialCélulas-troncoMedicina regenerativaTecido adiposoAvaliação da fração vascular estromal da porção anterior do corpo adiposo de Bichat após associação com plasma pobre em plaqueta autólogo como meio de transporteinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisZielak, João Césarhttp://lattes.cnpq.br/5991949730989569Gabardo, Marilisa Carneiro leãohttp://lattes.cnpq.br/7466005651619817http://lattes.cnpq.br/0093201523456347Lisboa, Desyree Ghezziinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da Universidade Cruzeiro do Sulinstname:Universidade Cruzeiro do Sul (UNICSUL)instacron:UNICSULORIGINALDesyree Lisboa.pdfDesyree Lisboa.pdfDissertaçãoapplication/pdf1640187http://dev.siteworks.com.br:8080/jspui/bitstream/123456789/2288/1/Desyree%20Lisboa.pdf2bbc9acfc1bf5d84c7ef72b3708f9292MD51LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81748http://dev.siteworks.com.br:8080/jspui/bitstream/123456789/2288/2/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD52123456789/22882021-05-28 12:18:53.514oai:repositorio.cruzeirodosul.edu.br: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Repositório InstitucionalPRIhttps://repositorio.cruzeirodosul.edu.br/oai/requestmary.pela@unicid.edu.bropendoar:2021-05-28T15:18:53Repositório Institucional da Universidade Cruzeiro do Sul - Universidade Cruzeiro do Sul (UNICSUL)false |
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