Estudo da interação da proteína NS1 do vírus sincicial respiratório humano (hRSV) com flavonoides por espectroscopia de fluorescência e dinâmica molecular

• Autor(a) principal: Lourenço, Isabella Otenio de
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNESP
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/11449/181847
• topic: hRSV; Proteína NS1; Flavonol; Espectroscopia de fluorescência; Docking molecular; Dicroísmo circular; Dinâmica molecular; NS1 protein; Fluorescence spectroscopy; Molecular docking; Circular dichroism; Molecular dynamics

As infecções causadas pelo vírus sincicial respiratório humano (hRSV) podem provocar sintomas leves e indistinguíveis de resfriados comuns em adultos e crianças saudáveis, mas também é uma das principais causas de infecções agudas do trato respiratório inferior, como pneumonia e bronquiolite, em recém nascidos prematuros, crianças de até dois anos e idosos. A infecção por hRSV não garante proteção contra contaminações subsequentes, e o desenvolvimento de terapias antivirais efetivas ou vacina preventiva ainda não estão disponíveis. Neste sentido, faz-se necessária a busca por alvos proteicos importantes para o combate da infecção viral e de potenciais inibidores destas proteínas. A proteína Não-Estrutural 1 (NS1) é de suma importância para o sucesso da replicação viral, capaz de reduzir a resposta imunológica, em particular a resposta do interferon do tipo I, e prevenir a apoptose celular, sendo um possível alvo de tratamento contra a infecção por hRSV. Mediante a isto, o estudo sobre a interação da NS1 com ligantes para o seu bloqueio pode possibilitar o entendimento dos mecanismos de inibição, nos quais os flavonoides têm sido descritos como sendo supressores eficazes. Além disso, essas moléculas são potenciais fármacos pelo seu baixo custo de obtenção e poucos efeitos adversos. O objetivo deste estudo foi investigar a interação entre a proteína NS1 do hRSV com alguns flavonoides utilizando espectroscopia de fluorescência e docking molecular. A NS1 foi expressa, purificada e quantificada por espectroscopia de UV/VIS e dicroísmo circular. A flexibilidade estrutural foi verificada por dinâmica molecular. A análise da interação proteína/ligante foi realizada por espectroscopia de fluorescência. A interação da NS1 com os flavonoides estudados teve maior contribuição devido a interações hidrofóbicas. Os resultados sugerem que a interação depende das estruturas dos flavonoides e da posição de suas hidroxilas. Entretanto, a ordem de grandeza de ligação foi moderada (104 M-1) para todas as moléculas estudadas, com isso o flavonoide poderia interagir com a NS1 impedindo, momentaneamente, a proteína de bloquear as vias do IFN-α, e logo desassociarem para que o flavonoide possa ser complexado por outras proteínas NS1.