Diagnóstico molecular de infecções fúngicas negligenciadas: criptococose e pitiose

• Autor(a) principal: Vasconcelos, Artur Bibiano de
• Data de Publicação: 2023
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNESP
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/11449/243160
• topic: Nordeste brasileiro; PRP8 gene; Cryptococcus; Criptococose; Pitiose; Biologia molecular; Reação em cadeia da polimerase multiplex

As infecções fúngicas têm se expandido em todo o mundo e devido a dificuldades no diagnóstico e tratamento, tem acarretado grave ameaça a saúde de animais e humanos. A Organização Mundial da Saúde destacou recentemente o Complexo de espécies de Cryptococcus como agentes críticos de ameaça a saúde pública devido a expansão da infecção e resistência antifúngica. Nesse contexto, destaca-se a importância do diagnóstico rápido e preciso a fim de se estabelecer melhores opções de tratamento e consequente melhora no prognóstico. Da mesma forma a pitiose é uma doença endêmica no Brasil, porém, com informações epidemiológicas simples, como notificação de casos e possíveis área de risco, inexistentes, principalmente na região do Nordeste Brasileiro. Neste trabalho determinamos técnicas moleculares para detecção diferencial no diagnóstico da criptococose e pitiose. No capítulo 1 padronizamos a técnica de Multiplex-PCR a partir do gene PRP8 para diferenciação das espécies do complexo Cryptococcus. Nossa metodologia padronizada possibilitou diferenciar pelo padrão de bandas em eletroforese, resultantes de uma única reação de PCR, as espécies C. neoformans var. neoformans, C. neoformans var. grubii e C. gatti. No Capítulo 2 testamos a sensibilidade da técnica de Nested-PCR no diagnóstico de casos suspeitos de pitiose na região Nordeste do Brasil. Do total de casos suspeitos para pitiose recebidos, 80% foram positivos por Nested-PCR, enquanto apenas 20% foi positivo para cultivo microbiológico. Nossos resultados representam os primeiros registros de pitiose em diferentes estados nordestinos, além de obtermos o primeiro isolado clínico do Maranhão. Nos dois capítulos desse trabalho abordamos as técnicas de biologia molecular como promissoras no diagnóstico diferencial tanto da criptococose quanto da pitiose e o quanto essas ferramentas podem contribuir para melhora no prognóstico de animais afetados, bem como para fornecer dados epidemiológicos para melhor compreensão da distribuição dessas doenças.