Desenvolvimento de sistema de detecção e quantificação de Salmonella spp. por meio de número mais provável (NMP) associado a técnica de amplificação isotérmica mediada por loop (LAMP) em carcaças de frango.

• Autor(a) principal: Laurindo, Amanda Louise
• Data de Publicação: 2022
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNESP
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/11449/236375
• topic: Amplificação isotérmica; Controle microbiológico; NMP-LAMP; Isothermal amplification; Microbiological control

O Brasil ocupa hoje posição de destaque no cenário avícola como o segundo maior produtor e o maior exportador de carne de frango do mundo. No mercado interno, a carne de frango é preferência entre os brasileiros, seja por seu valor nutricional ou por seu preço mais acessível. Entretanto os números de casos de doenças de transmissão hídrica e alimentar – DTHA ainda são elevados. No Brasil, Salmonella spp. é um dos principais agentes envolvidos e a carne de frango e os ovos são os principais veículos. Atualmente os métodos de diagnóstico comumente utilizados para detecção e quantificação da Salmonella ssp. são onerosos, demorados ou de alta complexidade de execução. Desta maneira, este trabalho teve por objetivo o desenvolvimento de um sistema rápido, prático e de baixo custo para detecção e quantificação de Salmonella spp em carne de frango, unindo as técnicas de Número Mais Provável e Amplificação Isotérmica Mediada por Alças (NMP-LAMP). Os objetivos específicos deste trabalho foram comparar dois métodos de extração de DNA (fervura e beads magnéticas), testar dois protocolos para reações de LAMP (“in house” e kit colorimétrico) e por fim, comparar o NMP convencional e NMP associado à técnica de LAMP, no qual alíquotas foram retiradas nas etapas de pré enriquecimento e enriquecimento seletivo, a fim de realizar extração e, em seguida, a técnica de LAMP. Os resultados das extrações de DNA obtiveram valores de Cq semelhantes. Já os protocolos de LAMP apresentaram resultados idênticos. Por fim o NMP-LAMP apresentou bons resultados quando comparado ao NMP convencional, já que não houve diferença estatista entre as técnicas, demostrando que a união é promissora e sugerindo que é possível diminuir o tempo para obtenção de resultados. Entretanto os relatos acerca da união das técnicas ainda são escassos na literatura. Quanto aos custos, o maior valor da técnica de LAMP pode ser compensado pelo menor tempo na obtenção de resultados.