Papel da Gasdermina-D no controle da infecção por Toxoplasma gondii em macrófagos

• Autor(a) principal: Bottino, Luiza Zainotti Miguel Fahur
• Data de Publicação: 2022
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
• Texto Completo: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42133/tde-06052022-154710/
• topic: Gasdermin-D; Gasdermina-D; inflamassomas; inflammasomes; piroptose; pyroptosis; Toxoplasma gondii; Toxoplasma gondii 31

Os inflamassomas são plataformas multiproteicas ativadoras de caspase-1, a qual é responsável pelo processamento das citocinas IL-1 &#946 e IL-18 e indução da piroptose. A piroptose é uma morte celular inflamatória extremamente relevante no contexto do controle de infecções por patógenos intracelulares. No entanto, apenas recentemente os mecanismos moleculares envolvidos na regulação desse processo foram desvendados, os quais incluem a clivagem da Gasdermina-D (GSDMD) pelas caspases-1 e -11, alçando essa proteína como mediadora essencial da piroptose desencadeada pelos inflamassomas canônicos e não canônicos. Uma vez que o papel da GSDMD no controle da infecção por protozoários ainda não foi completamente elucidado, o objetivo desse trabalho é avaliar a capacidade do parasita Toxoplasma gondii de induzir a clivagem da GSDMD e verificar a influência desse processo na ativação da resposta inflamatória e seu impacto no controle da infecção por macrófagos. Como esperado, macrófagos deficientes para GSDMD se mostraram mais resistentes à morte celular em resposta a um agonista clássico dos inflamassomas. Nossos dados mostram que o T. gondii foi capaz de induzir a clivagem da GSDMD e a secreção de IL-1 &#946 em macrófagos selvagens. Surpreendentemente, os macrófagos GSDMD-/- apresentaram um maior controle da replicação do parasita, efeito não correlacionado à secreção de citocinas inflamatórias. Por outro lado, uma maior produção de NO nos macrófagos GSDMD-/- regulada a nível transcricional figura como um mecanismo-chave no controle do T. gondii nessas células. Juntos, nossos dados sugerem um papel não-convencional para GSDMD na limitação da produção de NO, o que traz grandes impactos ao longo do curso da infecção pelo T. gondii . De importância, a molécula GSDMD parece atuar de maneira contexto-dependente uma vez que dados preliminares mostram que macrófagos GSDMD-/- apresentam níveis reduzidos de NO em resposta ao Trypanosoma cruzi e são mais suscetíveis à replicação por esse protozoário. Nossos dados demonstram que a GSDMD participa do controle de infecções causadas por protozoários por um mecanismo que envolve a regulação de enzimas microbicidas e ilustram a complexidade das interações entre as vias moleculares induzidas pelos inflamassomas na relação patógeno-hospedeiro.