Desenvolvimento de novas estratégias de diagnóstico sorológico para tipagem da infecção prévia pelo vírus Dengue.

• Autor(a) principal: Pereira, Samuel Santos
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
• Texto Completo: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-13122021-133231/
• topic: Dengue virus; Diagnóstico sorológico; ELISA; ELISA; Non structural protein 1 (NS1); Proteína Não Estrutural 1 (NS1); Serological diagnostic; Vírus Dengue

A dengue é a arbovirose de maior impacto na saúde pública mundial. A doença é causada pelo vírus Dengue (DENV), o qual compreende quatro sorotipos antigenicamente distintos do vírus, como consequência a infecção por um deles não implica em proteção contra os sorotipos heterólogos. O diagnóstico clínico diferencial da dengue é difícil, por isso o diagnóstico laboratorial aparece como uma importante ferramenta para a confirmação dos casos suspeitos. Os testes sorológicos na plataforma de ELISA são amplamente utilizados na confirmação laboratorial da dengue, pois são sensíveis e de custo acessível. No entanto, apresentam especificidade comprometida, particularmente, em regiões onde circulam outras arboviroses. Nesse sentido, o objetivo desta proposta foi desenvolver estratégias de diagnóstico sorológico específico da dengue na plataforma de ELISA utilizando proteínas recombinantes baseadas em um fragmento da NS1 (nomeadas &#916NS1 dos DENVs 1-4). Os antígenos foram obtidos após expressão em sistema procarioto utilizando linhagens de Escherichia coli e purificados por cromatografia de afinidade. As proteínas recombinantes purificadas foram reconhecidas por soros de animais infectados pelos DENVs, sugerindo que as mesmas conservam epítopos conformacionais. As &#916NS1 dos DENVs 1-4 foram utilizadas em combinação como antígenos de fase sólida e permitiram a detecção de anticorpos gerados em animais infectados com os DENVs, sem a interferência de anticorpos gerados após infecção pelo ZIKV. Além disso, as &#916NS1 dos DENVs 1, 2 e 4 apresentaram maior reatividade com o soro do DENV homólogo. Os resultados obtidos são relevantes ao apresentarem novos imunobiológicos com antigenicidade, imunogenicidade preservadas e contribuem para o desenvolvimento de novas estratégias de diagnóstico sorológico específico para dengue.