Compostos majoritários presentes em óleos essenciais: caracterização antimicrobiana, toxicológica e antioxidante

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Cruz, Lorena Clara
Data de Publicação: 2021
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UTFPR (da Universidade Tecnológica Federal do Paraná (RIUT))
Texto Completo: http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/27775
Resumo: A cada ano diversos óleos essenciais e extratos de plantas são relatados na literatura por apresentarem atividade antimicrobiana, anti-inflamatória, antioxidante, antimutagênica e até mesmo anticarcinogênica, sendo esse potencial de ação atribuído principalmente aos seus compostos majoritários. Diante desse contexto, o presente trabalho objetivou avaliar os compostos majoritários carvacrol, cinamaldeído e alfa-felandreno quanto ao potencial efeito antimicrobiano, antioxidante in vivo e in vitro, citotóxico e o perfil de toxicidade em ensaios in vivo. A pesquisa foi realizada nos laboratórios de pesquisa da Universidade Tecnológica Federal do Paraná, campus Toledo e os compostos em avaliação foram obtidos pela SigmaAldrich Brasil. O efeito antimicrobiano foi avaliado através dos ensaios de Disco-difusão, microdiluição em caldo para determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Spot test para determinar a Concentração Bactericida e Fungicida Mínima (CBM/CFM) frente aos microrganismos de interesse clínico. Determinou-se o potencial antioxidante por meio do teste in vivo utilizando linhagens mutantes de Saccharomyces cerevisiae e testes in vitro pelas técnicas de captura de radicais livres (DPPH e ABTS) e poder redutor via FRAP. A toxicidade dos compostos foi avaliada pelo teste de letalidade utilizando larvas de Artemia salina e a citotoxicidade avaliada utilizando linhagens de fibroblasto L929 e células Vero. O composto que apresentou melhor atividade antimicrobiana sobre as linhagens testadas foi o carvacrol, com valores entre 0,02 e 1,82 mg.mL-1, seguido do cinamaldeído com valores entre 0,20 e 0,98 mg.mL-1, já o composto alfa-felandreno não apresentou potencial antimicrobiano nas concentrações testadas. Todos os compostos apresentaram potencial antioxidante ao menos em um dos testes in vitro, sendo a melhor atividade antioxidante também apresentada pelo carvacrol, que se destacou nos três ensaios, principalmente pelo método ABTS, com valor de 8404,54 µmol ET/g de composto. Na avaliação da atividade antioxidante in vivo as concentrações entre 1 e 32 µg.mL-1 não foram o suficiente para constatar potencial antioxidante dos compostos, sendo que concentrações acima dessa faixa se mostraram com efeito inibitório frente a linhagem utilizada. O teste de letalidade em Artemias, indicou que todos os compostos apresentaram 100% de letalidade, ou seja, nas concentrações testadas entre 0,06 e 1 mg.mL-1 os compostos apresentaram efeito extremamente tóxico sobre os organismos. O teste de citotoxicidade demonstrou que os compostos carvacrol e cinamaldeído são citotóxicos frente as linhagens celulares utilizadas. De acordo com os resultados, os compostos carvacrol e cinamaldeído apresentaram excelente potencial antimicrobiano frente a nove microrganismos de interesse clínico, além de um ótimo potencial antioxidante, sendo que o mesmo não foi observado com o alfafelandreno. O teste de letalidade e citotoxicidade trazem certa limitação na aplicação dos compostos como fitoterápicos ou em alimentos, devido a toxicidade que os mesmos apresentam.
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A pesquisa foi realizada nos laboratórios de pesquisa da Universidade Tecnológica Federal do Paraná, campus Toledo e os compostos em avaliação foram obtidos pela SigmaAldrich Brasil. O efeito antimicrobiano foi avaliado através dos ensaios de Disco-difusão, microdiluição em caldo para determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Spot test para determinar a Concentração Bactericida e Fungicida Mínima (CBM/CFM) frente aos microrganismos de interesse clínico. Determinou-se o potencial antioxidante por meio do teste in vivo utilizando linhagens mutantes de Saccharomyces cerevisiae e testes in vitro pelas técnicas de captura de radicais livres (DPPH e ABTS) e poder redutor via FRAP. A toxicidade dos compostos foi avaliada pelo teste de letalidade utilizando larvas de Artemia salina e a citotoxicidade avaliada utilizando linhagens de fibroblasto L929 e células Vero. O composto que apresentou melhor atividade antimicrobiana sobre as linhagens testadas foi o carvacrol, com valores entre 0,02 e 1,82 mg.mL-1, seguido do cinamaldeído com valores entre 0,20 e 0,98 mg.mL-1, já o composto alfa-felandreno não apresentou potencial antimicrobiano nas concentrações testadas. Todos os compostos apresentaram potencial antioxidante ao menos em um dos testes in vitro, sendo a melhor atividade antioxidante também apresentada pelo carvacrol, que se destacou nos três ensaios, principalmente pelo método ABTS, com valor de 8404,54 µmol ET/g de composto. Na avaliação da atividade antioxidante in vivo as concentrações entre 1 e 32 µg.mL-1 não foram o suficiente para constatar potencial antioxidante dos compostos, sendo que concentrações acima dessa faixa se mostraram com efeito inibitório frente a linhagem utilizada. O teste de letalidade em Artemias, indicou que todos os compostos apresentaram 100% de letalidade, ou seja, nas concentrações testadas entre 0,06 e 1 mg.mL-1 os compostos apresentaram efeito extremamente tóxico sobre os organismos. O teste de citotoxicidade demonstrou que os compostos carvacrol e cinamaldeído são citotóxicos frente as linhagens celulares utilizadas. De acordo com os resultados, os compostos carvacrol e cinamaldeído apresentaram excelente potencial antimicrobiano frente a nove microrganismos de interesse clínico, além de um ótimo potencial antioxidante, sendo que o mesmo não foi observado com o alfafelandreno. O teste de letalidade e citotoxicidade trazem certa limitação na aplicação dos compostos como fitoterápicos ou em alimentos, devido a toxicidade que os mesmos apresentam.Each year, several essential oils and plant extracts are reported in the literature for presenting antimicrobial, anti-inflammatory, antioxidant, antimutagenic and even anticarcinogenic activities, and this action potential is mainly attributed to their major compounds. In this context, the present work aimed to evaluate the major compounds carvacrol, cinnamaldehyde and alpha-phellandrene regarding their potential antimicrobial, antioxidant in vivo and in vitro, cytotoxic effects and the toxicity profile in in vivo assays. The research was carried out in the research laboratories of the Universidade Tecnológica Federal do Paraná, Toledo campus and the compounds under evaluation were obtained by Sigma-Aldrich Brazil. The antimicrobial effect was evaluated through the Disco-diffusion tests, microdilution in broth to determine the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Spot test to determine the Minimum Bactericidal and Fungicidal Concentration (CBM/CFM) against microorganisms of clinical interest. The antioxidant potential was determined through the in vivo test using mutant strains of Saccharomyces cerevisiae and in vitro tests using free radical scavenging techniques (DPPH and ABTS) and reducing power via FRAP. The toxicity of the compounds was evaluated by the lethality test using brine shrimp larvae and the cytotoxicity evaluated using fibroblast L929 strains and Vero cells. The compound that showed the best antimicrobial activity on the strains tested was carvacrol, with values between 0.02 and 1.82 mg.mL-1, followed by cinnamaldehyde with values between 0.20 and 0.98 mg.mL-1, whereas the compound alpha-phellandrene did not show antimicrobial potential at the concentrations tested. All compounds showed antioxidant potential in at least one of the in vitro tests, with the best antioxidant activity also being presented by carvacrol, which stood out in the three tests, mainly by the ABTS method, with a value of 8404.54 µmol ET/g of compound. In the evaluation of in vivo antioxidant activity, concentrations between 1 and 32 µg.mL-1 were not enough to verify the antioxidant potential of the compounds, and concentrations above this range showed an inhibitory effect against the strain used. The lethality test in Artemias indicated that all compounds showed 100% lethality, that is, in the tested concentrations between 0.06 and 1 mg.mL-1, the compounds showed an extremely toxic effect on the organisms. The cytotoxicity test showed that the compounds carvacrol and cinnamaldehyde are cytotoxic against the cell lines used. According to the results, the compounds carvacrol and cinnamaldehyde showed excellent antimicrobial potential against nine microorganisms of clinical interest, in addition to a great antioxidant potential, which was not observed with alpha-phelandrene. The lethality and cytotoxicity test bring some limitation in the application of compounds as herbal medicines or in foods, due to their toxicity.Conselho Nacional do Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)porUniversidade Tecnológica Federal do ParanáDois VizinhosPonta GrossaPrograma de Pós-Graduação em BiotecnologiaUTFPRBrasilhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/info:eu-repo/semantics/openAccessCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICASBiotecnologiaEssências e óleos essenciaisMicro-organismosTestes de toxicidadeSaccharomyces cerevisiaeEssences and essential oilsMicroorganismsToxicity testingCompostos majoritários presentes em óleos essenciais: caracterização antimicrobiana, toxicológica e antioxidanteMajor compounds present in essential oils: antimicrobial, toxicological and antioxidant characterizationinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisPonta GrossaBusso, Cleversonhttps://orcid.org/0000-0001-9331-5850http://lattes.cnpq.br/5986131313813011Ghisi, Nédia de Castilhoshttps://orcid.org/0000-0001-7616-1618http://lattes.cnpq.br/4542801151720873Busso, Cleversonhttps://orcid.org/0000-0001-9331-5850http://lattes.cnpq.br/5986131313813011Mocelin, Natália Ketrin Almeida de Oliveirahttps://orcid.org/0000-0002-3944-0439http://lattes.cnpq.br/6038741913250469Montanher, Paula Fernandeshttps://orcid.org/0000-0003-0069-4957http://lattes.cnpq.br/7565400427188557https://orcid.org/0000-0002-8772-5893http://lattes.cnpq.br/0300954335877707Cruz, Lorena Clarareponame:Repositório Institucional da UTFPR (da Universidade Tecnológica Federal do Paraná (RIUT))instname:Universidade Tecnológica Federal do Paraná (UTFPR)instacron:UTFPRCC-LICENSElicense_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; charset=utf-8805http://repositorio.utfpr.edu.br:8080/jspui/bitstream/1/27775/2/license_rdf4460e5956bc1d1639be9ae6146a50347MD52LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81290http://repositorio.utfpr.edu.br:8080/jspui/bitstream/1/27775/3/license.txtb9d82215ab23456fa2d8b49c5df1b95bMD53ORIGINALcompostosmajoritariosoleosessenciais.pdfapplication/pdf1513173http://repositorio.utfpr.edu.br:8080/jspui/bitstream/1/27775/1/compostosmajoritariosoleosessenciais.pdf37406570c6c0c984eb3d1e7995c9b25eMD51TEXTcompostosmajoritariosoleosessenciais.pdf.txtcompostosmajoritariosoleosessenciais.pdf.txtExtracted texttext/plain143253http://repositorio.utfpr.edu.br:8080/jspui/bitstream/1/27775/4/compostosmajoritariosoleosessenciais.pdf.txtcb05a89c819392119c67a1e9cbc424c6MD54THUMBNAILcompostosmajoritariosoleosessenciais.pdf.jpgcompostosmajoritariosoleosessenciais.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1320http://repositorio.utfpr.edu.br:8080/jspui/bitstream/1/27775/5/compostosmajoritariosoleosessenciais.pdf.jpg25a008c38e5fcd3475a7df53da7c8d6cMD551/277752022-04-01 03:07:27.122oai:repositorio.utfpr.edu.br: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ório de PublicaçõesPUBhttp://repositorio.utfpr.edu.br:8080/oai/requestopendoar:2022-04-01T06:07:27Repositório Institucional da UTFPR (da Universidade Tecnológica Federal do Paraná (RIUT)) - Universidade Tecnológica Federal do Paraná (UTFPR)false
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