Estudo do efeito e mecanismo de ação da Epigalocatequina-3-galato em Leishmania braziliensis
Autor(a) principal: | |
---|---|
Data de Publicação: | 2013 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) |
Texto Completo: | https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/36052 |
Resumo: | A leishmaniose é uma doença causada por espécies de protozoários parasitos do gênero Leishmania. É endêmica em mais de 98 países e 350 milhões de pessoas vivem em local de risco da infecção, sendo o parasito da espécie Leishmania braziliensis o maior responsável pela doença no Brasil. Compostos naturais apresentam significante atividade antiprotozoários, sem elevada toxicidade. A epigalocatequina-3-galato (EGCG), principal catequina do chá verde, é um flavonóide que apresenta propriedades farmacológicas, como atividades antiinflamatórias, microbicida e atividades tripanosomicidas. No presente estudo, demonstramos o mecanismo de ação da EGCG em promastigotas e amastigotas de L. braziliensis, e a sua atividade in vivo. A EGCG inibiu a proliferação de promastigotas do parasito de maneira dose dependente apresentando uma inibição de 69,6% em 72 horas com a concentração de 500\03BCM, com IC50 de 278,5\03BCM. Alterações nos níveis de produção de espécies reativas de oxigênio (ERO) foram observadas em promastigotas de L. braziliensis tratadas com concentrações crescentes de EGCG Esta produção foi prevenida pela pré-incubação com catalase e PEG-catalase. EGCG também causou disfunção mitocondrial, gerando uma perda no potencial de membrana mitocondrial (\0394\03C8m), quantificado por Rodamina 123 e JC-1, além de causar uma diminuição da atividade da tripanotiona redutase, enzima responsável no balaço redox do parasito. Observamos também que, em amastigotas, EGCG causou uma inibição de 73% e 77,7% no índice de infecção na concentração de 12\03BCM em 24 e 72 horas respectivamente, apresentando um IC50 de 4,4\03BCM e 3,5\03BCM no tempo de 24 e 72 horas respectivamente. Assim como em promastigotas, EGCG foi capaz de gerar produção de ERO em amastigotas, que foi prevenida com catalase e PEG-catalase. No estudo do efeito em camundongos BALB/c infectados com L. braziliensis observamos uma diferença significativa do tamanho da lesão do grupo tratado com EGCG comparado ao grupo controle, o qual recebeu PBS (veículo do composto utilizado). Ensaios de toxicidade revelaram que o composto não causou danos renais ou hepáticos, demonstrando a sua eficácia e segurança. |
id |
CRUZ_493ffa8ebe37002113c879af4f48eb03 |
---|---|
oai_identifier_str |
oai:www.arca.fiocruz.br:icict/36052 |
network_acronym_str |
CRUZ |
network_name_str |
Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) |
repository_id_str |
2135 |
spelling |
Inácio Filho, Job DomingosAmaral, Elmo Eduardo de Almeida2019-10-01T18:24:39Z2019-10-01T18:24:39Z2013INÁCIO FILHO, Job Domingos. Estudo do efeito e mecanismo de ação da Epigalocatequina-3-galato em Leishmania braziliensis. 2013. 69 f. Dissertação (Mestrado em Biologia Celular e Molecular)-Instituto Oswaldo Cruz, Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, 2013.https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/36052A leishmaniose é uma doença causada por espécies de protozoários parasitos do gênero Leishmania. É endêmica em mais de 98 países e 350 milhões de pessoas vivem em local de risco da infecção, sendo o parasito da espécie Leishmania braziliensis o maior responsável pela doença no Brasil. Compostos naturais apresentam significante atividade antiprotozoários, sem elevada toxicidade. A epigalocatequina-3-galato (EGCG), principal catequina do chá verde, é um flavonóide que apresenta propriedades farmacológicas, como atividades antiinflamatórias, microbicida e atividades tripanosomicidas. No presente estudo, demonstramos o mecanismo de ação da EGCG em promastigotas e amastigotas de L. braziliensis, e a sua atividade in vivo. A EGCG inibiu a proliferação de promastigotas do parasito de maneira dose dependente apresentando uma inibição de 69,6% em 72 horas com a concentração de 500\03BCM, com IC50 de 278,5\03BCM. Alterações nos níveis de produção de espécies reativas de oxigênio (ERO) foram observadas em promastigotas de L. braziliensis tratadas com concentrações crescentes de EGCG Esta produção foi prevenida pela pré-incubação com catalase e PEG-catalase. EGCG também causou disfunção mitocondrial, gerando uma perda no potencial de membrana mitocondrial (\0394\03C8m), quantificado por Rodamina 123 e JC-1, além de causar uma diminuição da atividade da tripanotiona redutase, enzima responsável no balaço redox do parasito. Observamos também que, em amastigotas, EGCG causou uma inibição de 73% e 77,7% no índice de infecção na concentração de 12\03BCM em 24 e 72 horas respectivamente, apresentando um IC50 de 4,4\03BCM e 3,5\03BCM no tempo de 24 e 72 horas respectivamente. Assim como em promastigotas, EGCG foi capaz de gerar produção de ERO em amastigotas, que foi prevenida com catalase e PEG-catalase. No estudo do efeito em camundongos BALB/c infectados com L. braziliensis observamos uma diferença significativa do tamanho da lesão do grupo tratado com EGCG comparado ao grupo controle, o qual recebeu PBS (veículo do composto utilizado). Ensaios de toxicidade revelaram que o composto não causou danos renais ou hepáticos, demonstrando a sua eficácia e segurança.Leishmaniasis is a disease caused by protozoan species of the genus Leishmania. It is endemic in more than 98 countries and 350 million people live in a risk of infection, the parasite of species Leishmania braziliensis is the most responsible for disease in Brazil. Currently, natural compounds have significant antiprotozoal activity without high toxicity. The epigallocatechin-3-gallate (EGCG), the major catechin in green tea, is a flavonoid that has pharmacological properties such as anti-inflammatory, microbicidal and trypanocidal activities. In the present study, we demonstrated the mechanism of action of EGCG in promastigotes and amastigotes of L. braziliensis, and its activity in vivo. EGCG inhibits the proliferation of the parasite promastigote in a dose dependent manner showing an inhibition of 69,6% in 72 hours with a concentration of 500μM, with IC50 of 278,5µM. Changes in the levels of production of reactive oxygen species (ROS) were observed in promastigotes of L. braziliensis treated with increasing concentrations of EGCG. This production was reversed by pre-incubation with catalase and PEG-catalase. EGCG also caused mitochondrial dysfunction, causing a loss in mitochondrial membrane potential (Δψm), measured using rhodamine 123 and JC-1, in addition EGCG caused a decrease in activity of trypanothione reductase, the enzyme responsible for the balance redox in parasite. We also note that, in amastigotes EGCG caused an inhibition of 73,04% and 77,71% at the index of infection at a concentration of 12μM in 24 and 72 hours respectively, showing an IC50 of 4,45µM and 3,5µM at 24 and 72 hours respectively. As in promastigote, EGCG caused ROS production in amastigotes, which were reversed with catalase and PEG-catalase. In the study of the effect in BALB/c mice infected with L. braziliensis was observed a significant difference in lesion size in the group treated with EGCG compared to the control group, which received PBS (vehicle compound used). Toxicity tests have shown that the compound did not cause kidney or liver damage, demonstrating its efficacy and safety.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.porTratamento farmacológicoLeishmania BrasiliensisLeishmanioseEspécies reativas de oxigênioCháCatequinaEstudo do efeito e mecanismo de ação da Epigalocatequina-3-galato em Leishmania braziliensisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis2013Instituto Oswaldo CruzFundação Oswaldo CruzRio de JaneiroPrograma de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecularinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)instname:Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)instacron:FIOCRUZLICENSElicense.txttext/plain1748https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/36052/1/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD51ORIGINALjob_inacio_ioc_mest_2013.pdfapplication/pdf1500758https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/36052/2/job_inacio_ioc_mest_2013.pdf166b8a346d250c461e145daaab364a36MD52TEXTjob_inacio_ioc_mest_2013.pdf.txtjob_inacio_ioc_mest_2013.pdf.txtExtracted texttext/plain139167https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/36052/3/job_inacio_ioc_mest_2013.pdf.txt7b9ca561ec96de88fc70e834ba19e142MD53icict/360522019-10-06 10:45:42.495oai:www.arca.fiocruz.br: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Repositório InstitucionalPUBhttps://www.arca.fiocruz.br/oai/requestrepositorio.arca@fiocruz.bropendoar:21352019-10-06T13:45:42Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) - Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)false |
dc.title.pt_BR.fl_str_mv |
Estudo do efeito e mecanismo de ação da Epigalocatequina-3-galato em Leishmania braziliensis |
title |
Estudo do efeito e mecanismo de ação da Epigalocatequina-3-galato em Leishmania braziliensis |
spellingShingle |
Estudo do efeito e mecanismo de ação da Epigalocatequina-3-galato em Leishmania braziliensis Inácio Filho, Job Domingos Tratamento farmacológico Leishmania Brasiliensis Leishmaniose Espécies reativas de oxigênio Chá Catequina |
title_short |
Estudo do efeito e mecanismo de ação da Epigalocatequina-3-galato em Leishmania braziliensis |
title_full |
Estudo do efeito e mecanismo de ação da Epigalocatequina-3-galato em Leishmania braziliensis |
title_fullStr |
Estudo do efeito e mecanismo de ação da Epigalocatequina-3-galato em Leishmania braziliensis |
title_full_unstemmed |
Estudo do efeito e mecanismo de ação da Epigalocatequina-3-galato em Leishmania braziliensis |
title_sort |
Estudo do efeito e mecanismo de ação da Epigalocatequina-3-galato em Leishmania braziliensis |
author |
Inácio Filho, Job Domingos |
author_facet |
Inácio Filho, Job Domingos |
author_role |
author |
dc.contributor.author.fl_str_mv |
Inácio Filho, Job Domingos |
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv |
Amaral, Elmo Eduardo de Almeida |
contributor_str_mv |
Amaral, Elmo Eduardo de Almeida |
dc.subject.other.pt_BR.fl_str_mv |
Tratamento farmacológico Leishmania Brasiliensis Leishmaniose Espécies reativas de oxigênio |
topic |
Tratamento farmacológico Leishmania Brasiliensis Leishmaniose Espécies reativas de oxigênio Chá Catequina |
dc.subject.decs.pt_BR.fl_str_mv |
Chá Catequina |
description |
A leishmaniose é uma doença causada por espécies de protozoários parasitos do gênero Leishmania. É endêmica em mais de 98 países e 350 milhões de pessoas vivem em local de risco da infecção, sendo o parasito da espécie Leishmania braziliensis o maior responsável pela doença no Brasil. Compostos naturais apresentam significante atividade antiprotozoários, sem elevada toxicidade. A epigalocatequina-3-galato (EGCG), principal catequina do chá verde, é um flavonóide que apresenta propriedades farmacológicas, como atividades antiinflamatórias, microbicida e atividades tripanosomicidas. No presente estudo, demonstramos o mecanismo de ação da EGCG em promastigotas e amastigotas de L. braziliensis, e a sua atividade in vivo. A EGCG inibiu a proliferação de promastigotas do parasito de maneira dose dependente apresentando uma inibição de 69,6% em 72 horas com a concentração de 500\03BCM, com IC50 de 278,5\03BCM. Alterações nos níveis de produção de espécies reativas de oxigênio (ERO) foram observadas em promastigotas de L. braziliensis tratadas com concentrações crescentes de EGCG Esta produção foi prevenida pela pré-incubação com catalase e PEG-catalase. EGCG também causou disfunção mitocondrial, gerando uma perda no potencial de membrana mitocondrial (\0394\03C8m), quantificado por Rodamina 123 e JC-1, além de causar uma diminuição da atividade da tripanotiona redutase, enzima responsável no balaço redox do parasito. Observamos também que, em amastigotas, EGCG causou uma inibição de 73% e 77,7% no índice de infecção na concentração de 12\03BCM em 24 e 72 horas respectivamente, apresentando um IC50 de 4,4\03BCM e 3,5\03BCM no tempo de 24 e 72 horas respectivamente. Assim como em promastigotas, EGCG foi capaz de gerar produção de ERO em amastigotas, que foi prevenida com catalase e PEG-catalase. No estudo do efeito em camundongos BALB/c infectados com L. braziliensis observamos uma diferença significativa do tamanho da lesão do grupo tratado com EGCG comparado ao grupo controle, o qual recebeu PBS (veículo do composto utilizado). Ensaios de toxicidade revelaram que o composto não causou danos renais ou hepáticos, demonstrando a sua eficácia e segurança. |
publishDate |
2013 |
dc.date.issued.fl_str_mv |
2013 |
dc.date.accessioned.fl_str_mv |
2019-10-01T18:24:39Z |
dc.date.available.fl_str_mv |
2019-10-01T18:24:39Z |
dc.type.status.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
dc.type.driver.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/masterThesis |
format |
masterThesis |
status_str |
publishedVersion |
dc.identifier.citation.fl_str_mv |
INÁCIO FILHO, Job Domingos. Estudo do efeito e mecanismo de ação da Epigalocatequina-3-galato em Leishmania braziliensis. 2013. 69 f. Dissertação (Mestrado em Biologia Celular e Molecular)-Instituto Oswaldo Cruz, Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, 2013. |
dc.identifier.uri.fl_str_mv |
https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/36052 |
identifier_str_mv |
INÁCIO FILHO, Job Domingos. Estudo do efeito e mecanismo de ação da Epigalocatequina-3-galato em Leishmania braziliensis. 2013. 69 f. Dissertação (Mestrado em Biologia Celular e Molecular)-Instituto Oswaldo Cruz, Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, 2013. |
url |
https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/36052 |
dc.language.iso.fl_str_mv |
por |
language |
por |
dc.rights.driver.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/openAccess |
eu_rights_str_mv |
openAccess |
dc.source.none.fl_str_mv |
reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) instname:Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ) instacron:FIOCRUZ |
instname_str |
Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ) |
instacron_str |
FIOCRUZ |
institution |
FIOCRUZ |
reponame_str |
Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) |
collection |
Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) |
bitstream.url.fl_str_mv |
https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/36052/1/license.txt https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/36052/2/job_inacio_ioc_mest_2013.pdf https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/36052/3/job_inacio_ioc_mest_2013.pdf.txt |
bitstream.checksum.fl_str_mv |
8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 166b8a346d250c461e145daaab364a36 7b9ca561ec96de88fc70e834ba19e142 |
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv |
MD5 MD5 MD5 |
repository.name.fl_str_mv |
Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) - Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ) |
repository.mail.fl_str_mv |
repositorio.arca@fiocruz.br |
_version_ |
1798324870392578048 |