Detecção e variabilidade genética de Mycobacterium leprae numa região altamente endêmica para hanseníase e avaliação de fatores associados a transmissão recente

• Autor(a) principal: Prado Palácios, Yrneh Yadamis
• Data de Publicação: 2022
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
• Texto Completo: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/55952
• topic: Hanseníase; Mycobacterium leprae; Variabilidade genética; Fatores associados a transmissão recente; Região altamente endêmica do Brasil; Mycobacterium leprae; Leprosy; Hanseníase; Mycobacterium leprae; Variação Biológica da População; Doenças Endêmicas

A hanseníase é geralmente causada pelo Mycobacterium leprae e é um problema de saúde pública no Brasil, país que relatou 20.684 novos pacientes entre 2010 e 2019. Recife, a região metropolitana do Pernambuco, é altamente endêmica para esta doença, sendo que 4,9% dos casos ocorrem em menores de 15 anos, indicando um nível considerável de transmissão. Os fatores de risco para transmissão precisam ser melhor investigados, assim métodos moleculares foram empregados para definição dos genótipos do microrganismo circulante em pacientes supostamente recém-diagnosticados de janeiro-2012 a janeiro 2017. Esfregaços cutâneos provenientes de lâminas de 709 pacientes com diagnóstico de hanseníase confirmados foram submetidos à extração de DNA e avaliados por qPCR para a região 16S e elementos repetitivos-RLEP. A carga bacteriana negativa foi observada em 204 (8,7%) pacientes, sendo 105 (14,8%) paucibacilares (IB<2) e 399 (56,3%) multibacilares (IB≥2). A reanálise dos dados dos pacientes mostrou que 75 (10,6%) tinham diagnóstico prévio de hanseníase; destes, 31 (41,3%) apresentaram recidiva/reinfecção, 40 (53,3%) tiveram falha terapêutica e quatro (5,3%) abandonaram o tratamento. A maioria dos pacientes era do sexo masculino (73,3%), entre 15-59 anos (74,3%), pardos (59,8%), com ensino fundamental II incompleto (26,7%), apresentavam lesões (99,4%) e 74,4% residiam no Recife. Das 709 amostras, 622 (87,7%) apresentaram resultado positivo para qPCR (para um ou dois dos alvos avaliados), atendendo aos critérios estabelecidos para tipagem por MLVA; desta forma, propomos a qPCR como ferramenta para selecionar amostras para genotipagem. Dos 17VNTRs analisados, quatro apresentaram alto poder discriminatório (HGDI>0,8) e não foram empregados na definição de agrupamentos de genótipos. Os genótipos definidos por meio de 13VNTRs revelaram a existência de 31 clusters incluindo 179 (52,2%) amostras de um total de 343 isolados, sugerindo alto nível de transmissão (recente) durante o período de estudo. Observamos dois grandes clusters, compostos por 36 (10,5%) e 39 (11,4%), todavia, a razão disso é discutida. Ao associar os clusters com dados clínicos-demográficos, observamos que: idade, carga bacilar, ano de coleta e tempo de residência na região, como possíveis fatores de risco; não foi vista associação entre clusters e pacientes MB, raça, idade<15 anos e outros. Diferentemente dos pacientes com recidiva/reinfecção, falha no tratamento ou abandono, não foi observada concentração espacial na hanseníase infantil; os aglomerados espaciais não parecem estar espalhados aleatoriamente, aparentemente pertencem a um dos maiores clusters. Nossos dados demonstraram variabilidade de genótipos de M. leprae com existência de dois grandes clusters compostos por 22% dos isolados genotipados. É tentador concluir que pode ser pela existência de um ou mais fatores de risco para transmissão recente, mas uma maior virulência de cepas em cluster poderia ter papel importante nesse cenário e precisa ser investigada. Como a hanseníase é uma doença de desenvolvimento lento, a associação de clusters com determinados fatores ambientais ou humanos não é fácil e genótipos específicos podem estar presentes na população ao longo de décadas. Um novo estudo incluindo contato domiciliar, análise de redes sociais, técnicas de genotipagem mais sensível e participação não humana na transmissão pode responder a algumas das muitas perguntas que permanecem após este estudo